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PEX基因在肿瘤细胞中的表达及其体外对微血管生成的影响

2010-08-21许传杰刘林林王贵全朱桂彬李玉林

中国实验诊断学 2010年1期
关键词:实验

许传杰,刘林林,王贵全,何 旭,朱桂彬,李玉林*

(1.吉林大学第二医院 病理科,吉林长春 130041;2.吉林大学第二医院 放疗科;3.吉林大学第二医院科教科;4.吉林大学病理生物学教育部重点实验室)

PEX基因在肿瘤细胞中的表达及其体外对微血管生成的影响

许传杰1,刘林林2,王贵全3,何 旭4,朱桂彬4,李玉林4*

(1.吉林大学第二医院 病理科,吉林长春 130041;2.吉林大学第二医院 放疗科;3.吉林大学第二医院科教科;4.吉林大学病理生物学教育部重点实验室)

目的探讨PEX基因在体外对微血管生成的影响。方法利用RT-PCR、人脐静脉内皮细胞(HUVEC)小管形成实验及鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管形成实验,体外观察PEX基因对血管生成的影响。结果稳定筛选的细胞株BpcDNA-sPEX经RT-PCR可扩增出sPEX带;bFGF+BpcDNA-sPEX组小管数明显少于bFGF+BpcDNA、bFGF+B16F10组(P<0.01);bFGF+BpcDNA-sPEX组血管分支点数明显少于bFGF+BpcDNA、bFGF+B16F10组(P<0.01)。结论PEX基因能够抑制由bFGF诱导的CAM血管的新生、PEX基因能够阻抑bFGF对小管形成的促进作用。

PEX基因;RT-PCR;微血管生成

(Chin J Lab Diagn,2010,14:0014)

Brooks等发现MMP-2可通过C端与整合素蛋白家族成员α vβ3结合,激活自身催化活性,产生 C端类血红素结合片断PEX(Hemopexin),该片断可抑制MMP-2对ECM降解和血管的形成[1,2],提示PEX片断有可能成为抗肿瘤血管生成新的生物活性药物。目前对PEX基因的研究仅限于原核表达载体所表达的PEX融合蛋白对微血管生成的影响,因此本研究在构建了真核表达载体pcDNA3.1-sPEX的基础上,体外观察PEX基因对微血管生成的影响。

1 材料与方法

1.1 稳定筛选的细胞株BpcDNA-sPEX、BpcDNA获得见已文献[3]。B16F10细胞株购于中国科学院上海细胞生物研究所,以上三株细胞常规传代培养。……

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