金 铮,于金录,杨 ,李 超,黄海燕

(吉林大学第一医院神经外科,吉林长春 130021)

胶质瘤来源exosome的鉴定及其蛋白质组成研究

(吉林大学第一医院神经外科,吉林长春 130021)

目的初步分析胶质瘤细胞分泌的exosome蛋白组成,探讨胶质瘤来源exosome的潜在免疫调节功能,从而为进一步利用exosome对胶质瘤进行免疫治疗提供理论依据。方法采用差速离心法从U251胶质瘤细胞培养上清液和Ⅲ级星形胶质瘤囊液中分别提纯exosome,用透射电镜鉴定;利用二维电泳分离、分析exosome内蛋白质,并用质谱技术鉴定了部分蛋白质。结果胶质瘤细胞可以产生exosome,其平均直径约100 nm。二维电泳图显示U251细胞分泌的exosome含有270个蛋白点,与数据库相符的有66个;而来自Ⅲ级星形胶质瘤囊液的exosome含有242个蛋白点,与数据库相符的有60个;两者有130个蛋白点在等电点和表观分子量方面相同,其中包含HSP70、RNA结合蛋白、核酸外切酶、MHCI及MHCII类分子等。部分蛋白质点质谱鉴定结果为hCG、低密度脂蛋白、T细胞受体等。结论胶质瘤细胞可分泌exosome,其一般特性与已报道的exosome一致,其蛋白组成与其他细胞来源的exosome具有共性,体内和体外培养的胶质瘤细胞分泌的exosome的蛋白质组成具有同源性与差异性。胶质瘤细胞源的exosome具有一定的免疫调节功能,可以为胶质瘤免疫治疗提供理论基础。

exosome;胶质瘤;蛋白质组学;双向凝胶电泳;质谱

(Chin J Lab Diagn,2010,14:1386)

Exosome起源于细胞内晚期核内体(late endosomes,LEs),即多泡体(multivesicular bodies,MVB)。Exosome似的小囊泡在多泡体内积聚,当多泡体的外膜与细胞质膜融合后,其内的小囊泡批量地释放到细胞外基质中,从而形成exosome。……