转化生长因子-β1在大肠癌中的表达及其临床意义

张 梁1,邓益斌1,邓巧莹1,黄永秩2
(右江民族医学院附属医院 1 .检验科;2.病理科,广西 百 色533000)

转化生长因子-β1(TGF-β1)是一类功能复杂的多肽类细胞因子,构成一个多功能的细胞因子超家族,体内几乎所有细胞都能产生并存在其受体。TGF-β1是其成员之一,有资料表明TGF-β1在肿瘤发生、发展及转移过程中起着重要作用[2-4],但TGF-β1由抑癌作用转变成促癌作用的机制尚未十分清楚。因此,本文通过对大肠癌TGF-β1的表达进行研究,探讨TGF-β1在大肠癌诊疗中的临床应用价值。

1 材料与方法

1.1 材料 2005年8月-2008年8月在我院住院手术的62例大肠癌患者为病例组,男48例,女14例,年龄43-81岁,其中结肠癌40例,结肠腺癌22例,对照组为大肠癌患者自身癌旁正常组织,兔抗人TGF-β1一抗及即用型非生物素免疫组化ElivisionTM super试剂盒(福州生物技术开发有限公司)。

1.2 方法 所有标本均经过10%福尔马林固定,常规石蜡包埋,4 μ m厚连续切片,切片经二甲苯脱蜡和梯度酒精水化,蒸馏水洗,经柠檬酸盐高温修复,冷却后用PBS冲洗3次,每次3 min,滴加过氧化酶阻断溶液,室温下孵育10 min,PBS冲洗3次,每次3 min,分别滴加一抗(浓度1∶100;兔抗人TGF-β1),37℃孵育10 min,PBS冲洗3次,每次 3 min,加多聚酶结合物(试剂B)37℃孵育10 min,PBS冲洗3次,每次3 min,DAB室温显色3-5 min,自来水冲洗,苏木素复染,经梯度酒精脱水,二甲苯透明后中性树脂封片,光镜下观察,阴性对照以PBS代替-抗,阳性对照为已知阳性切片。

1.3 染色结果判定 TGF-β1主要位于细胞浆内,部分位于细胞膜上。细胞内具有棕黄色或黄褐色颗粒者为阳性。……