朱德淳,李然伟,刘禄成,温都苏,魏 巍

(吉林大学第二医院泌尿外科,吉林长春 130041)

重组腺病毒载体携带反义微小RNA-21对膀胱癌细胞生长的作用

朱德淳,李然伟,刘禄成,温都苏,魏 巍

(吉林大学第二医院泌尿外科,吉林长春 130041)

目的探讨重组腺病毒载体介导的微小RNA-21(miRNA-21)反义寡核苷酸(ASOND)对人膀胱癌细胞株T24生长的影响。方法构建反向插入miRNA-21基因的重组腺病毒载体(rAV-miRNA-21),并用反义rAV-miRNA-21转染T24,即病毒载体用药组。采用噻唑蓝(MTT)法和原位末端标记(TUNEL)法检测T24细胞的增殖和凋亡情况。同时设对照组和空病毒组作为对比。结果rAV-miRNA-21用药组、对照组和空病毒组T24细胞的增殖率分别为(37.1±6.8)%、(95.7±5.8)%、(86.3±7.5)%;凋亡率分别是(31.6±4.7)%、(8.4±2.9)%、(7.3±4.6)%。 用药组的增殖率和凋亡率分别与对照组和空病毒组相比较,差异均有统计学意义(P＜0.01),而对照组与空病毒组之间差异无统计学意义(P＞0.05)。结论反义miRNA-21重组腺病毒载体转染T24细胞可以抑制肿瘤细胞增殖,增加细胞凋亡,进而抑制膀胱癌细胞生长。

膀胱肿瘤;微小 RNA-21;重组腺病毒;基因治疗

(Chin J Lab Diagn,2010,14:1351)

膀胱癌细胞能过度表达癌基因微小RNA-21(miRNA-21),其表达与膀胱癌的发生发展密切相关,高miRNA-21表达的患者预后不良[1,2]。本研究通过构建反向携带miRNA-21基因的重组腺病毒载体(rAV-miRNA-21),观察miRNA-21反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides,ASOND)对人膀胱癌细胞株T24增殖和凋亡的影响,从而为膀胱癌的基因治疗寻找更为有效的新方法并提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 细胞及主要试剂 人膀胱癌细胞株T24购自中国科学院上海细胞所。腺病毒表达载体PDC316-EGFP-U6系统购自本元正阳公司。限制性内切酶等各种工具酶购自BioLabs公司。……