陈宁，张丹，单丽沈，刘雪雁，尚云晓，薛辛东

（中国医科大学 附属盛京医院小儿呼吸内科，沈阳 110001）

新生儿慢性肺疾病（chronic lung disease，CLD）作为早产儿肺透明膜病治疗的并发症在1967年首次被Northway描述，它也被称为支气管肺发育不良，以肺泡发育受阻、肺间质广泛纤维化为主要病理特征。肺纤维化的发生是由许多细胞因子、炎性介质、内皮细胞和上皮细胞等构成的复杂的网络。有研究表明，肺组织局部的肾素-血管紧张素系统可能是纤维化的发生中心环节，血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ，AngⅡ）通过与血管紧张素Ⅱ1型受体（angiotensin Ⅱ type 1 receptor，AT1R）结合，调节细胞因子、细胞外基质沉积［1，2］并诱导肺泡上皮细胞凋亡［3］，从而破坏正常的肺泡结构和功能，促进肺纤维化的发生。AT1R拮抗剂losartan可减轻博莱霉素诱导的纤维化动物模型的肺组织胶原的沉积［4，5］。近年研究表明，肾素-血管紧张素系统可能参与CLD 的发病过程［6，7］，特异性 AT1R 拮抗剂 losartan可明显降低高氧致CLD新生大鼠肺组织羟脯氨酸的表达［8］。本研究进一步观察AT1R拮抗剂losartan对高氧致新生大鼠CLD肺组织胶原表达的影响，从而探讨高氧致CLD可能的发病机制。

1 材料与方法

1.1 材料

动物模型的制备：将Wistar新生大鼠160只（中国医科大学附属盛京医院实验动物中心提供）出生后（连同母鼠）24 h内随机分为4组：空气组（组Ⅰ）、高氧组（组Ⅱ）、高氧+注射用水组（组Ⅲ）和高氧+losartan组（组Ⅳ）。组Ⅰ放置于空气环境（FiO2为21%）中饲养。组Ⅱ～组Ⅳ置于氧箱中，持续输入氧气，维持氧浓度85%～90%，每日用测氧仪监测（FiCO2<0.5%，钠石灰吸收CO2）。每日定时开箱0.5 h称重、添水和饲料及更换垫料，并与组Ⅰ交换母鼠以免因氧中毒而导致代母鼠喂养能力下降。各组饲养条件均为室温22～25℃，湿度60%～70%。在生后第6日开始，组Ⅳ每日将losartan（5 mg/kg）加到注射用水中按3 ml/kg灌胃，组Ⅲ每日给等量注射用水灌胃，至实验结束。

1.2 方法

各组在实验后的1、3、7、14和21 d腹腔内注射5%水合氯醛（6 ml/kg）麻醉后处死。立即打开胸腔，无菌条件下分离肺组织，取右肺各叶用冷生理盐水洗净残血，吸干水分，置于无RNase的Eppendorf管中于-80℃冰箱中保存；……