骆永年 梁 捷

黑龙江省大庆市杜尔伯特县卫生监督所（166200）

随着现代科技的飞速发展，临床检测技术也在不断更新，正向着自动化、快速、准确的方向发展。而作为微生物学检验的细菌培养，虽有自动细菌培养仪的开发应用，但仍不能向其它检验项目 那样快速、准确地回报结果。细菌培养快速慢、结果准确度不高仍然是微生物学检验的两大难题。然而，注重细菌培养前标本涂片镜检，对评价标本留取质量，快速提供信息诊断信息，指导细菌培养方向，加强质量控制都有着极为重要的意义。可有效地提高细菌培养速度和准确性。

1 培养前标本留取质量的评价

标本留取质量，直接影响细菌的培养结果的准确性。

如标在留取过程中被其它部位的常在菌、定植菌群污染，还进行培养鉴定，就会导致病源学诊断上错误，误导临订治疗。所以细菌培养前必需作涂片镜检来评价标本留取质量，只有合格的标本才能进一步进行培养鉴定。

1.1 自然留取的尿液标本应以不高离心湿片直接镜检进行质量评价，观察10个以上油镜视野，平均每个视野有1个以上细菌者，说明感染的可能性大，作进一步培养。还要观察细菌的种类，如果有3种以上细菌同时存在，则标本可能被污染，应重新留取。

1.2 对于痰标本，应在培养前作革兰染色镜检评价留取质量，基标准为：扁平上皮细胞≤10个/低倍镜视野，白细胞≥25个/低倍镜视野，细菌形态在两种以下为合格痰标本，另外有些标本白细胞数量上没有≥25个/低倍镜视野，但见到了明显形态，染色特征的致病菌，如流感嗜血杆菌、肺炎克雷伯菌等，应进行培养并向临床回报涂片检查结果。注重痰标本培养前质量评价，可大大提高培养阳性率和结果的可靠性。

1.3 对于深部位的伤口、中耳、子宫内膜感染留取的脓汁、分泌物标本，出应进行涂片染色质量评价。如有大量磷状上皮存在则说明留取过程中被污染，不能再进行培养。

2 为临床直接提供诊断信息

根据标本来源部位和临订怀疑诊断疾病，培养菌标本涂片做适当染色镜检，对急性感染症的快速诊断有重要的实用价值。

2.1 临床怀疑细菌性脑膜炎患者的脑脊液标本，离心后沉淀做涂片革兰染色镜检，如发现有典型形态、染色特征的脑膜炎双球菌、新型隐球、流感嗜血杆菌等，可直接向临床回报镜检所见细菌的形态与染色特征，并初步怀疑是哪种细菌。

2.2 阴道、尿道、前列腺分泌物或脓法标本培养前做革兰染色镜检，如见到白细胞内，外有典型的革兰阴性肾形双球菌，结合临床症状即可快速诊断为淋病。临床疑为真菌感染的阴道分泌物标本培养前可做涂片墨法染色镜检察院，如在墨色背景下查到不着色有肥厚夹膜的酵母真菌，即可向临床回报真菌的形态染色特点，为临床作出快速诊断。

2.3 深部位感染标本，在培养前做革兰涂片染色镜检，如发现菌体淡染、染色不一的革兰阴性杆菌、球杆菌等常为厌氧菌，结合标本来源部位、感观性状（有恶臭、脓血等）向临床回报所见细菌的形态，染色特性并疑为氧菌，以便临床快速、正确选择抗厌氧菌药物治疗。

2.4 标本培养前涂片镜检，还可观察到白细胞的种类与数量，如见到大量多形核白细胞和较多细菌则说明是急性细菌感染，如白细胞数量较少并以单个核细胞为主则说明为慢性感染。此住信息为临床诊断也极为重要，应及时回报。

3 指导培养方向，缩短培养时间

细菌培养前标本涂片染色观察细菌的形态，染色特点，结合标本留取部位和临床初步诊断。初步确认是那一类细菌，并向这一类细菌方向培养与鉴定。可以直接选用鉴别培养基和专用分离培养基接种分离培养。大大缩短检测时间，避免培养的盲目性。如脑脊液标本涂片染色观察到革兰阴性短小杆菌，则应疑为水磨石嗜血杆菌，直接接种到巧克力平板上培养。尿液标本如涂片见到杆菌则直接接各在亚酸钾平板上分离鉴定。

4 细菌培养质量控制的重要手段

细菌培养前涂片观察到某细菌，而培养结果为阴性或是培养生长的细菌与涂片观察到的细菌在形态和染色特点上不一致，不能再向临床回报该结果，应及时从如下几方面查找原因：①厌氧菌标本采集、运送等技术操作不当，淋球菌等脆弱细菌未及时接种培养，较长时间放置在自然环境中都可造成细菌的死亡，而使培养出现假阴性。②已经应用抗生素治疗的标本中残余抗生素抑制了细菌的生长。③培养基成分比例、pH值等不能达到要求，就不利于细菌的生长，甚至使细菌发生形态、染色性质的变异，另外，培养基所处环境气体成分、温度的变化都会影响细菌的生长。④细菌实验室内消毒不彻底，用过的培养物和培养基不及时处理，操作者无菌操作观念淡薄，可造成实验室内污染。使用权得培养结果与涂片结果不一致。

有了培养前标本涂片镜检，就可以及时发现问题，分析原因，解决处理，提高了细菌培养的可信度。