陈 婕 蒋显勇

湘南学院医学检验系(423000)

健康人的血液是无菌的。当人体局部感染向全身扩散和出现全身感染时，血液中可出现细菌。长期以来，临床微生物实验室血培养沿用传统的培养方法。这些方法由于采用肉眼观察培养液混浊、溶血、菌膜及指示剂是否因产酸变色等情况来提示有菌生长，因而需要相当长的时间及足够的菌量，故不能及时为临床提供诊断依据而延误治疗。湘南学院附属医院Bactec9120快速血培养系统能够对血液细菌进行快速培养，其原理是:每一瓶培养瓶底部都有特殊的Novel CO2感应器，有半渗透性薄膜将培养基与感应器隔离，只有CO2能通过薄膜。当培养瓶内有微生物生长，其释放的CO2可渗透到感应器，经水饱和后，产生H+，使pH发生改变，感应器的颜色也发生改变，所反射的光度亦不相同。反射光度传送至电脑时，会自动连续记忆并制成曲线图，由电脑判断阴阳性，阳性者即时发出警报。我们将已知低浓度菌量来检测Bactec9120血培养系统性能，并对湘南学院附属医院2008年4月至2009年7月临床患者血液标本共105例，同时用Bactec9120快速血培养系统和常规法进行血培养，现将有关实验情况报道如下。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 美国Bactec9120Dickinson公司生产的Bactec9120快速血培养仪及Sceptor细菌鉴定仪、标准血培养瓶、树脂培养瓶及厌氧血培养瓶、厌氧树脂培养瓶、Sceptor系统各系列反应板等，培养瓶及反应板均在有效期内使用。

1.1.2 实验菌株

需氧或兼性厌氧菌及厌氧菌共15株:金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、粪肠球菌、肺炎链球菌、溶血性链球菌、奇异变形杆菌、洛菲不动杆菌、大肠埃希菌、伤寒沙门菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、脆弱类杆菌、丙酸杆菌、双歧杆菌、乳酸杆菌，以上细菌均系临床菌株；湘南学院附属医院2008年4月至2009年7月住院患者血标本105份，全部临床资料均经湘南学院附属医院相关科室证实。

1.1.3 抗菌药物

庆大霉素、氨苄青霉素、头孢唑啉、甲硝唑、氯洁霉素，由北京天坛制药厂生产，上述药物均在有效期内使用。

1.1.4 无菌人血

1.2 方法

1.2.1 在标准培养瓶和厌氧培养瓶内注入无菌人血5mL，然后将金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、粪肠球菌、肺炎链球菌、溶血性链球菌、奇异变形杆菌、洛菲不动杆菌、大肠埃希菌、伤寒沙门菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌等11株已知菌液按最终菌液浓度10cfu/mL注入标准培养瓶中，将脆弱类杆菌、丙酸杆菌、双歧杆菌、乳酸杆菌等4株已知菌液按上述浓度注入厌氧培养瓶内，立即放入Bactec9120快速血培养仪中培养，并计时，待该细菌生长阳性警报信号发出后，计时以确定该菌株检出时间，同时抹片革兰染色镜检，用Sceptor细菌鉴定仪或常规法鉴定。5d后阴性培养瓶全部转种血平皿或厌氧平皿，仍无菌生长者为阴性。

1.2.2 需氧及厌氧树脂培养瓶吸附抗菌药物的性能检测法菌药物的需氧及厌氧树脂瓶中都生长，而加入抗菌药物的标准培养瓶和厌氧培养瓶中都不生长，在无抗菌药物的各种培养瓶中都生长，结果见表2。

表1 15株细菌检出时间

表2 需氧及厌氧树脂瓶吸附抗菌药物性能比较

①测抗菌药物MIC，其金黄色葡萄球菌和溶血性链球菌在庆大霉素、氨苄青霉素、头孢唑啉三种药物MIC值相等，分别为4、0.5、8μg/mL；大肠埃希菌和洛菲不动杆菌在庆大霉素、氨苄青霉素此两种药物MIC值相同，分别为4、8μg/mL；乳酸杆菌在甲硝唑、氯洁霉素MIC值分别为2、5μg/mL。②将金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、大肠埃希菌和洛菲不动杆菌分别注入需氧树脂培养瓶和非树脂培养瓶内；乳酸杆菌注入厌氧树脂培养瓶和厌氧非树脂培养瓶内。③将无菌人血按每瓶5mL量分别注入各种培养瓶内。④抗菌药物按各菌株不同药物MIC值的2倍分别注入上述培养瓶内；同时将菌液加入不含抗菌药物的各培养瓶内以作对照，均放入Bactec9120培养仪内培养，待该细菌生长阳性警报信号发出后，计时以确定该菌株检出时间。

1.2.3 无菌操作，在不同时期，对105例患者无菌采血2～5mL，快速注入培养瓶中，送入Bactec9120培养仪中培养，待细菌生长阳性警报发出后，计时以确定细菌检测时间，同时抹片革兰染色镜检，用Sceptor细菌鉴定仪鉴定，5d后阴性培养瓶全部转种血平皿，仍无生长者报阴性。

1.2.4 常规血培养法[1]，在对105例患者采血同时，做常规血培养。

2 结 果

2.1 15株细菌在Bactec9120培养仪检出时间，以奇异变形杆菌检出时间最短，为5.5h以脆弱类杆菌检出时间最长，为18.5h，结果见表1。

2.2 需氧及厌氧树脂培养瓶吸附抗菌药物性能检测，金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、大肠埃希菌、洛菲不动杆菌、乳酸杆菌在加入抗

2.3 105份血培养标本在Bactec9120培养检出阳性14例，其中检出14株细菌，常规血培养法检出12例阳性，其中检出12株细菌，结果见表3。

表3 105例临床血培养结果比较

3 讨 论

从表1结果观察，11种需氧或兼性厌氧菌株检出时间为5.5～13h，4种厌氧菌株检出时间为5.5～18.5h，与以往湘南学院附属医院常规血培养阳性3～4d时间相比，细菌检出时间迅速提前，与文献报道该系统检测结果基本接近[2]。说明Bactec9120血培养系统快速检出细菌性能好。

从表2结果观察，加入药物的需氧树脂瓶和厌氧树脂瓶能吸附抗菌药物，均已长菌；而加入药物的非树脂需氧及非树脂厌氧培养瓶由于抗菌药物抑菌作用而致无菌生长，说明树脂培养瓶能有效吸附抗菌药物；未加药物的所有培养瓶都长菌。因此，对已使用过抗菌药物治疗的患者应使用树脂瓶培养。表2中未加抗菌药物5种菌株树脂瓶检出时间为5.5～11h，而无树脂瓶检出细菌时间为7.1～13.6h，树脂瓶明显比非树脂瓶检出细菌时间短，可能与树脂瓶培养液已被浓缩，其营养成分浓度较高有关。

从表3结果观察，Bactec9120仪器血培养阳性率高、快速，阳性率为13.3%，比常规法11.4%高出1.9%。

Bactec9120自动血培养仪由于临床应用时间短，尚未进行充分的临床评价，许多性能指标主要依据厂商的试验结果，因此在实际应用中存在不同程度的问题，如白血病患者血中粒细胞含量过高，代谢产生大量的CO2，而产生假阳性；应用聚脑茴香钠(SPS)为抗凝剂，当SPS含量过高时对于肺炎链球菌就有抑制作用[3]。

总之，Bactec9120最大优点是能对血培养进行24h连续监测，因此能快速检出细菌。但在正常上班8h以外的时间尤其是夜间常常不能及时对阳性结果进行处理，而且无法打印结果报告。因此要充分发挥Bactec9120进行快速血培养的作用，除加强必要的管理措施外，还需实现全院微机联网。快速阳性报警可以早期阳性报告，抹片后做快速药敏报告，还可以做分级细菌报告，那么就更能快速的检出阳性。

[1]俞树荣.微生物学和微生物学检验[M].2版.北京:人民卫生出版,1997:136-137.

[2]许淑珍,张淑兰.Bactec9120血培养系统检测细菌影响因素的探讨[J].中华医学检验杂志,2004,20(5):272-274.

[3]张秀珍.当代细菌检验与临床[M].2版.北京:人民卫生出版社,2003.