杨 欣 ，王 薇 ，曹 霞 ，郑春梅 ，马春燕 ，任卫东

（1.佳木斯大学附属第一医院物理诊断科，黑龙江 佳木斯 154002；2.中国医科大学附属第一医院心功能科，辽宁 沈阳 110001）

血管内皮功能障碍是动脉粥样硬化（Atherosclerosis，AS）等疾病早期的重要表现。随着大规模他汀类降脂药物临床试验的完成，人们发现他汀类降脂药物的作用不单是降低血脂，还存在着其他作用，其中改善血管内皮功能是一个重要方面。本研究运用高频超声对AS模型兔及经辛伐他汀治疗的兔的不同时期的左髂外动脉进行在体检测血管内皮功能。

1 材料与方法

1.1 动物模型的制备

日本大耳白兔50只，3～4个月，雌雄不限，在相同的实验条件下饲养，经1周适应性饲养后随机分为3组：A组为对照组（5只），喂正常颗粒饲料；B组为AS模型组（25只），喂养混合饲料（含1%胆固醇+2%蛋黄粉+5%猪油）；C组为辛伐他汀治疗组（20只），喂养混合饲料4周后加喂辛伐他汀10mg/kg。各组兔每天饲料量约150g/只。动物单笼饲养，自由饮水，喂养至16周。

1.2 试剂与仪器

使用Vivid 7彩色超声诊断仪，线阵探头，频率13MHz；日立7170型全自动生化分析仪；胆固醇（上海国药集团化学试剂有限公司）；硝酸甘油（北京益民药业有限公司）；辛伐他汀（美国Merck公司）。

1.3 髂外动脉血管超声检测方法

兔肌注速眠新0.15ml/kg麻醉后，仰卧位固定，下肢外展，剪除局部被毛，涂抹耦合剂，连接心电图。于兔左腹股沟靠腹侧纵行检查左髂外动脉，于髂总动脉分叉后至少获得长轴1.5cm血管显像后，整个过程中探头位置保持不变。于T波末测定其内径（D），D为前后壁内膜管腔界面间的垂直距离。先测量基础状态内径（D0），然后使用止血带扎住兔左下肢中下段，加压至280mmHg，持续5min后迅速放气，放气后30～60s内记录左髂外动脉图像。动物休息15min后，舌下滴服硝酸甘油0.125mg/kg，2～3min内记录左髂外动脉图像，所有结果记录在磁光盘中，以备分析。测量时取3次测定的平均值，放气后内径为 D1，血管内皮依赖性舒张功能（EDD）=（D1-D0）/D0×100%。滴服硝酸甘油后内径为D2，血管内皮非依赖性舒张功能（NEDD）=（D2-D0）/D0×100%。

1.4 血脂测定及病理学检查

采静脉血，用酶法在全自动生化分析仪上测血清总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）。取出髂外动脉做HE染色光镜检查。

1.5 统计学分析

2 结果

2.1 各组兔血脂结果

见表1。

2.2 各组兔髂外动脉EDD及NEDD

见表2，超声检测兔髂外动脉见图1～4。

表1 各组兔血脂

表2 各组兔髂外动脉EDD及NEDD（%，±s）

表2 各组兔髂外动脉EDD及NEDD（%，±s）

注：1：与 A 组比较，P<0.05；2：与 B 组比较，P<0.05。

EDD NEDD检测指标 组别 4周 8周 12周 16周A 14.66±2.33 15.09±1.99 15.52±2.08 15.12±2.61 B 9.17±1.021 4.92±0.811 1.19±0.471 1.07±0.261 C 8.68±2.571 7.73±1.321，2 10.23±2.411，2 10.88±3.011，2 A 11.02±2.36 10.96±1.79 9.89±1.88 10.55±2.03 B 11.70±2.55 9.92±2.31 6.18±1.441 4.22±0.771 C 11.09±1.89 10.18±2.01 7.22±2.561 7.98±1.321，2

2.3 病理形态学改变

肉眼观察可见AS组髂外动脉管壁有大量黄色脂样物凸向管腔，治疗组脂纹数量明显减少。光镜观察AS组，内膜明显增厚，管壁弥漫性隆起，内含大量泡沫细胞，中膜平滑肌细胞增生明显（图5）。治疗组动脉病变较AS组明显减轻，内膜增厚不明显，可见少量泡沫细胞（图6）。

3 讨论

内皮功能失调是AS病理过程的一个早期改变[1]。高浓度的胆固醇、LDL-C、TG和低水平的HDL-C都可直接或间接损伤动脉内皮细胞，导致内皮功能紊乱，内皮功能紊乱通过分泌多种致炎细胞因子而诱发和促进动脉内膜的炎症反应[2]。而单核细胞、T淋巴细胞与血管内皮细胞发生粘附代表着AS形成早期炎症的开始，细胞粘附分子的表达在AS发病机制中具有重要意义。近年来，HMG-CoA还原酶抑制剂他汀类药物作用的多效性引起了人们的极大关注。辛伐他汀通过抑制肝细胞合成胆固醇的限速酶而降低TC、TG、LDL-C和升高HDL-C水平，这可能是减轻内皮损伤及减轻动脉内膜慢性炎症的基本机制。但近年来的研究表明，辛伐他汀除具有降脂作用外，还具有其它广泛的细胞生物学作用：可直接诱导内皮细胞NO合成酶基因的转录，从而增加NO的合成；抑制血管紧张素Ⅱ介导的信号传递；抑制血管平滑肌细胞的生长；抑制巨噬细胞、淋巴细胞及单核细胞的增殖及脂质在巨噬细胞内的聚集；抑制内皮细胞粘附分子的表达及单核细胞与内皮细胞的粘附以及对凝血系统的影响[3]。从而改善血管内皮功能，减少心血管相关疾病的发病率和死亡率[4]。

早期检测内皮功能损害有十分重要的临床意义。超声检测内皮功能的优越性在于无创性、准确性高、重复性好、操作简单等。本研究的目的旨在应用高频超声观察辛伐他汀对高胆固醇喂养兔的血管内皮功能的影响，以探讨其抗AS的机制及超声评价药物对内皮功能的影响。

结果显示，兔喂养胆固醇4周后血脂升高，但8周以后无显著差异。随着胆固醇喂养时间的延长，AS组4周时EDD出现损伤，而NEDD在4周、8周时与对照组间无明显差异，12周后才出现减低，EDD的损伤出现早于NEDD损伤，这与以往报道一致[5]。说明内皮细胞功能障碍的出现早于平滑肌细胞功能障碍，随着胆固醇喂养时间的延长，EDD和NEDD的损伤均逐渐加重。治疗组兔随着辛伐他汀的干预，血脂水平逐渐减低，8周后与AS组比较有显著改善，但仍与对照组有显著差异。EDD明显改善，与AS组间比较有显著差异，但仍低于喂养前。12周后NEDD与对照组间有显著差异，16周后才与AS组间有显著差异。病理结果显示治疗组AS病变明显轻于AS组，说明辛伐他汀不但能防止血脂的上升，而且对高脂饮食兔血管内皮功能存在保护作用。结果提示对AS患者早期进行积极的降脂治疗，对保护高胆固醇血症患者的血管内皮功能有重要的临床意义。

总之，高频超声检测外周血管内皮功能操作简单、无创，是动态评价药物干预对内皮功能影响的良好方法，可用以寻找损害内皮功能的各种危险因素及防治策略。

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[5]晏沐阳，段云友，曹铁生，等.高胆固醇血症兔动脉内皮非依赖舒张功能在体、离体研究 [J].中华超声影像学杂志，2000，9（10）：622－624.