陈贵海,武 丽,邓 巍,陈 娟,曾晓艳,运晨霞

选择与肥胖密切相关的原发性高血压病患者为研究对象,通过对血清抵抗素、脂联素、瘦素等脂肪因子及血浆内皮素等血瘀证相关指标的观察,分析肥胖与血瘀证之间的相互关系,为活血化瘀治疗肥胖及预防肥胖相关性疾病提供依据。

1 资料与方法

1.1 临床资料 病例均来源于2006年6月—2007年5月广西壮族自治区南宁市中医医院内科病房住院病例。其中符合纳入标准的原发性高血压病例共57例。根据患者临床表现分为血瘀证组与非血瘀证组。血瘀证诊断按中国中西医结合学会活血化瘀专业委员会于1982年制定、1986年修订的血瘀证诊断标准。其中血瘀证组 14例,血瘀证检出率为 25%,男 6例,女 8例,年龄(55.12±6.67)岁,病程(7.29±3.24)年;非血瘀证组43例,男23例,女20例,年龄(53.17±13.47)岁,病程(6.68±4.29)年。两组年龄、性别、职业构成等无统计学意义(P＞0.05)。研究过程中无病例脱落。

1.1.1 纳入标准 高血压病诊断采用1999年10月中华人民共和国卫生部、高血压联盟制定《中国高血压防治指南(试行本)》:收缩压≥18.7 kPa或舒张压≥12.0 kPa为高血压;年龄45岁～75岁。

1.1.2 排除标准 继发性高血压;合并心肌梗死、脑出血等严重并发症者;伴重度心肺功能不全、重度心律失常,肝脏、肾脏、造血系统等严重原发性疾病者;精神病患者,妊娠、哺乳期妇女;年龄不满45岁或超过75岁者;拒绝参加研究者。

1.2 仪器与试剂

1.2.1 仪器 TDL-5000B放免专用冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂);SN-695B型智能放免γ测量仪(上海原子核研究所日环仪器一厂);MK3酶标仪(热电上海仪器有限公司)。

1.2.2 试剂 脂联素、抵抗素ELISA试剂盒由美国ADL公司生产,上海卓康生物科技有限公司代理;肿瘤坏死因子、内皮素放免试剂盒由北京北方生物技术研究所生产;胰岛素放免试剂盒由天津协和医药科技有限公司生产;瘦素放免试剂盒由解放军总医院科技开发中心放免所生产。

1.3 方法

1.3.1 标本制作 全部操作过程中,室内温度控制在18℃～25℃。空腹测体质量、身高后,取静脉血5 mL,于含有 30 μ L EDTA和40μL抑肽酶的试管中加入2 mL血液,混匀,于空试管中加入血液3 mL自凝。抗凝血立即以4℃、3 000 r/min离心10 min,取血浆 1 mL,置-20℃冰箱保存备用。自凝管在室温下自凝析出血清后,以 4 000 r/min,4℃离心20 min,取血清1.5 mL,分为 2份,酶法检测血清空腹血糖、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),另一份置-20℃冰箱保存备用。

1.3.2 检测分析 取血浆或血清一份,室温下复融,置4℃,3 000 r/min离心5 min,取上清液测定。根据药盒说明书提供的加液程序操作,由MK3酶标仪检测,或SN-695B型智能放免γ测量仪预先编制程序,直接给出有关参数、标准曲线,计算样品浓度。酶免分析在广西中医学院微生物与免疫学实验室进行,放免检测在广西中医学院附属瑞康医院同位素实验室完成。

1.4 统计学处理 采用SAS 9.1 for windows软件包完成。计数资料采用χ2检验、等级资料采用 Ridit分析;计量资料用均数±标准差(±s)表示,方差齐性检验采用方差分析,组间比较采用t检验(方差不齐时采用t'检验),并作总体样本多元线性相关分析。P＜0.05为有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组血清抵抗素、脂联素、瘦素、胰岛素水平比较(见表1) 与非血瘀证组比较,血瘀证组瘦素浓度升高,脂联素水平降低,差异有统计学意义(P＜0.05);血清抵抗素、胰岛素均无统计学意义(P＞0.05)。详见表1。

表1 两组血清抵抗素、脂联素、瘦素、胰岛素水平比较(±s)

表1 两组血清抵抗素、脂联素、瘦素、胰岛素水平比较(±s)

组别 n 抵抗素(μ g/L) 脂联素(mg/L) 瘦素(μ g/L) 胰岛素(mIU/L)非血瘀证组 43 99.510 2±60.707 1 15.565 5±6.576 3 3.651 2±1.442 8 16.311 1±8.300 3血瘀证组 14 106.674 5±52.445 8 11.030 9±6.133 4 7.440 1±4.135 2 12.530 4±6.137 6 P＞0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＞0.05

2.2 两组患者血浆内皮素、肿瘤坏死因子水平比较(见表2)与非血瘀证组比较,血瘀证组血浆内皮素浓度升高(P＜0.05),血浆肿瘤坏死因子水平无统计学意义(P＞0.05)。

表2 两组患者血浆内皮素、肿瘤坏死因子水平比较(±s)

表2 两组患者血浆内皮素、肿瘤坏死因子水平比较(±s)

组别 n 内皮素(ng/L) 肿瘤坏死因子(μ g/L)非血瘀证组 43 41.246 5±25.601 6 11.812 4±6.745 2血瘀证组 14 58.286 1±27.922 4 14.092 4±5.621 4 P＜0.05 ＞0.05

2.3 多元线性相关分析 以抵抗素为因变量,以瘦素等脂肪因子、糖脂代谢指标为自变量,进行总样本多元线性相关分析。由简单相关系数矩阵发现:原发性高血压病患者抵抗素与脂联素、瘦素、胰岛素等均未见显著相关关系(P＞0.05);脂联素与瘦素(r=-0.150 8,P=0.085 3)、胰岛素(r=-0.203 2,P=0.106 8)呈负相关趋势,但差异无统计学意义;与HDL-C正相关(r=0.260 6,P＜0.05);瘦素与胰岛素呈显著正相关关系(r=0.714 2,P＜0.01)。

3 讨 论

抵抗素是2000年由Steppan发现的一种由脂肪细胞分泌的蛋白激素。其生物学效应仍不完全清楚,主要是对抗胰岛素,使血糖水平升高、脂肪细胞增生而致肥胖。许多研究结果表明,抵抗素降低糖耐量,与中心型肥胖、胰岛素抵抗有关,从而在糖尿病的发病中具有重要作用。近期研究结果显示,抵抗素参与血管内皮细胞功能稳态的调节。因此推测抵抗素在2型糖尿病和心血管病变发生发展过程中可能有重要病理生理学作用。但是本研究未发现原发性高血压患者抵抗素与瘦素、胰岛素等脂肪因子之间的相关关系,也未见到其与内皮素之间存在着某种必然联系,与何玉娟等[1,2]的研究结果不一致。可能抵抗素不是原发性高血压病发病和血瘀证形成的关键因素,有待进一步研究。

脂联素是1995年由Scherer发现的一种脂肪细胞特异性分泌的一种蛋白激素。血清含量与体质量指数呈负相关,糖尿病患者血浆含量降低,而伴有动脉粥样硬化的糖尿病患者含量更低,表明脂联素在调节糖代谢中具有重要作用。脂联素还有抗动脉粥样硬化的效应,并参与血管损伤的修复。本研究结果发现,高血压患者脂联素,在血瘀证与非血瘀证之间差异有统计学意义,而且与HDL-C呈正相关,表明脂联素具有防止高血压及高血压病患者血瘀证形成的作用;发现脂联素与瘦素、脂联素与胰岛素呈负相关趋势,但差异无统计学意义。与目前大多数研究结果基本一致[1,3]。

瘦素是一种脂肪组织源激素。给予肥胖基因发生突变而缺乏瘦素的肥胖鼠外源性重组瘦素,可使其摄食减少,能量消耗增多,体质量下降,高血糖得以纠正。但是对于大多数肥胖患者而言,瘦素抵抗导致糖利用障碍,脂肪量进一步增加,甚至诱发代谢综合征乃至糖尿病。本研究结果显示:瘦素与内皮素相关,二者在血瘀证与非血瘀证之间均有统计学意义,表明瘦素与血瘀证的联系可能是通过调节相关血管活性因子表达实现的。与苏彤春等[4]及我们既往的研究结果[5-7]基本一致,但与陆红等[3]研究结果不同,还有待进一步研究。

[1] 何玉娟,王卫民,崔永生.原发性高血压与血清抵抗素、脂联素水平的关系[J].中国实用神经疾病杂志,2009,12(9):84-85.

[2] 董平栓,王绍欣,李志鹃,等.肥胖高血压患者血清抵抗素水平与代谢紊乱的临床研究[J].医药论坛杂志,2008,29(14):84-86.

[3] 陆红,朱翠凤,周薇.脂肪内分泌激素在糖尿病、高血压患者中的表达[J].中华全科医学,2009,7(5):451-453.

[4] 苏彤春,霍海洋.原发性高血压血清瘦素水平变化[J].山东医药,2008,48(19):101-102.

[5] 陈利国,陈贵海,李永峰,等.高血压病血瘀证与非血瘀证患者血清瘦素水平的比较[J].中国中西医结合杂志,2002,22(10):745-747.

[6] 陈贵海,孙建,陈利国.肥胖与血瘀证的相关性[J].中国临床康复,2005,9(11):206-209.

[7] 陈利国,屈援,陈贵海,等.高血压和Ⅱ型糖尿病患者血清瘦素水平分析[J].高血压杂志,2002,10(4):307-309.