NCCLS评价酶循环法测定β-羟丁酸及临床意义
2010-06-07丁继红常文青
丁继红 常文青
β-羟丁酸(beta-hydroxybutyrate)是酮体的主要成份,占酮体的78%,在肝脏内合成,经肝外组织利用[1]。由于β-羟丁酸在酮体中所占比例最大,所以它可代表酮体的含量。酶法测定的特异性好、检测简便、反应温和、无污染,因此β-羟丁酸测定多采用酶法。随着临床化学的发展出现了一种更加灵敏的测定技术—酶循环法,酶循环法是利用酶的底物特异性来放大靶物质的测定方法。此法仅循环靶物质,减少了样品中存在的其他物质对测定的干扰,因此不需要对样品进行预处理或对靶物质的提取。该法不需要专门的设备,是种前景广阔的测定技术[2]。针对传统方法学评价中的一些不足与缺陷,美国国家标准实验室标准化委员会(national committee for clinical laboratory standards,NCCLS)制定了标准化文件,用以对临床方法的评价。本文拟用NCCLS评价酶循环法检测2008年3至9月来我院体检人员和患者血清中β-羟丁酸的含量,并探讨了β-羟丁酸检测的临床意义。
1 资料与方法
1.1 一般资料 对照组为门诊体检健康者60例,男30例,女30例;年龄18~65岁;各项理化指标均正常;糖尿病无酮症组40例,男20例,女20例;年龄40~68岁;诊断符合WHO糖尿病诊断标准;糖尿病酮症酸中毒组9例,男5例,女4例;年龄42~63岁;血糖 >25mmol/L,血 pH 值 <7.2,CO2分压明显降低,CO2结合力<12mmol/L,血钠降低,尿酮(++~+++)。
1.2 材料与方法
1.2.1 仪器与试剂:东芝TBA120FR全自动生化分析仪;酶循环法β-羟丁酸测定试剂盒RANDOX标准品宁波亚太生物技术有限责任公司生产。
1.2.2 仪器参数设定:主波长500 nm,副波长700 nm,校准方式线性,反应方向上升,温度 37℃,R1试剂 240 μl,R2试剂60 μl,样品量 10 μl,反应时间 10min,测定点 22-28,标准液浓度1mmol/L。……
