郑惠能,李 莉,陈娟娟,黄仕杰,马桂林,温慧欣,沈理通,周常义,黄建炜

1972年Kapikian报道发现诺如病毒以来,越来越多的研究证实诺如病毒是急性胃肠炎暴发疫情最主要的病原,也是成人、儿童非菌性腹泻主要的病原体。由于缺乏简易、经济的检测手段,临床上尚难与其它病毒性腹泻相鉴别,其所造成的疾病负担并未引起人们足够重视。为了解厦门地区诺如病毒的流行状况,以便进一步探索本地区诺如病毒流行规律和流行因素,为制订防控对策提供依据,本研究于2007年4月至2008年7月在3家哨点医院开展监测,收集了323例病毒性腹泻患者粪便标本,采用ELISA和realtime RT-PCR法检测标本中诺如病毒抗原和核酸,分析该人群诺如病毒感染状况及特征。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象 以厦门岛内的厦门市第一医院和厦门市妇幼保健院以及岛外的厦门市第三医院为监测哨点医院,按监测方案要求采集病毒性腹泻病例粪便标本。2007年4月至2008年7月共收集门诊和住院病毒性腹泻患者323例,采集粪便标本10～15g/份,-70℃冻存。病毒性腹泻病例定义为大便次数≥3次/d,呈水样、蛋花样或稀糊样便,常规镜检WBC＜15,RBC=0,排除常见细菌、寄生虫等感染的腹泻病例。

粪便标本诺如病毒抗原的ELISA检测。应用德国必发公司(R-Biopharm Rhone Ltd)第二代和第三代诺如病毒ELISA(RIDASCREEN Norovirus)试剂盒对粪便标本进行诺如病毒抗原检测。此试剂采用单克隆抗体夹心法,特异性检测GGⅠ和GGⅡ组诺如病毒的共同抗原。冻存的粪便标本溶解后,以试剂盒中的标本稀释液10倍稀释,振荡混匀、静置10 min后,室温5 000r/min离心5 min,取100μL上清液,按照试剂盒说明书检测和判断结果。……