辽宁医学院附属第一医院普外科(锦州 121001)

朱 培 综述 赵树鹏△ 审校

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由双链 RNA引发的序列特异性基因沉默现象[1],可高效、特异地沉默特定基因。RNA干扰提出时间并不长,但这项技术已应用于多个领域,并取得了突飞猛进的发展。随着研究的不断深入,RNAi在基因功能研究尤其是肿瘤相关基因研究及肿瘤治疗中的应用方面将有着巨大应用价值。

1 RNAi的发现和发展

1990年,Jorgensen及Mol领导的研究组在矮牵牛属植物中通过添加过量的合成色素的基因拷贝,来增加花瓣紫色的着色。结果不但紫色没有加深,而且一些转基因的花出现白色或全白色。这说明不仅导入的基因未被表达,反而连植物本身的某些合成色素的基因也失活,他们称此现象为共同抑制(cosuppression)[2]。1998年,Fire和Mello等证实 Gou发现的正义 RNA或反义 RNA诱导基因表达抑制是由体外转录制备的RNA中污染了微量的ds RNA而引起,首次提出了RNA干扰学说。同年Richard等同样向果蝇的合胞体中注入对应4个基因的双链 RNA,结果得到了相应基因功能缺失型的表型。这个结果表明 RNA干扰机制不是线虫特有的,很可能广泛存在于不同的生物中。2001年Sayda等[3]用长度为21～25bp的双链RNA在哺乳动物细胞中诱发基因特异性沉默由此证实 RNA干扰机制是生物界一种古老且进化上高度保守的现象。

2 RNAi的机制

在正常生物体内,细胞内的双链 RNA(ds RNA,38个碱基以上)在依赖ATP的情况下,被核糖核酸酶Dicer切割成双链小干扰RNA(siRNA,19～23个碱基)。siRNA这个结构对基因沉默效应有着决定作用。(1)siRNA中有两条链,一条为……