许 慧，谭雅玲

(上饶市立医院，江西 上饶 334000)

网织红细胞是反映骨髓红系造血功能以及判断贫血和相关疾病疗效的重要指标[1]，过去检测方法采用传统手工显微镜目视计数法费时费力，稳定性和重复性差，随着自动化血细胞分析仪的发展，网织红细胞计数也逐渐实现自动化检测，该技术为网织红细胞的计数提供了更先进的检测手段和更多的相关参数。本文以SysmexXT-2000i全自动血液分析仪测定网织红细胞并与人工镜检法比较，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源 收集本院2008年8月～2009年5月住院病人175人，采用BD系列真空管空腹静脉采血2ml(每1m l血液用1.4～1.5mg EDTA-K2抗凝)，标本于2小时内处理完。

1.2 仪器与试剂

日本SYSMEX公司生产的Sysmex XT-2000i全自动血液分析仪及配套试剂；1%煌焦油蓝1g，枸橼酸钠0.4g，氯化钠0.85g将上述试剂溶于双蒸馏水100ml中，过滤后备用(调节 pH=7.4-7.8)；OLYMPUS 显微镜，miller窥盘。

1.3 方法 仪器操作人员经过厂家严格培训，严格按仪器操作规程做网织红细胞分析，每天均随机进行室内质控。使用Sysmex XT-2000i全自动血液分析仪在室温25℃时用自动进样检测。手工法按《全国临床检验操作规程》方法，用仪器法计数后剩余标本由主管技师进行miller窥盘计数，且在2h内完成检验。

1.4 统计学外理 数据使用SPSS 15.0软件处理，采用配对样品t检验和相关性分析。

2 结果

2.1 重复性试验 取高中低值标本3份，两种方法分别处理分析10次，求得均值标准差(s)变异系数(CV)结果见表1。

表1 高、中、低值两种方法测定结果

以上数据表明，仪器法的重复性好，精确度高于人工显微镜目测法。

2.2 对照试验 对175例病人标本用两种方法计数结果的比较(见表 2)。

表2 175例标本两种方法所测结果比较

以上数据表明两法对比P＞0.05，无显著性差异，相关系数γ＝0.953，相关性良好。

3 讨论

网织红细胞是晚幼红细胞脱核后向成熟红细胞发育的未完全成熟的红细胞，其胞浆内含有残留的嗜碱性物质核糖粒及核糖核酸，在活体染色时这些残存的RNA(嗜碱性物质)可以被煌焦油蓝染成蓝色冠状、丝球状、破网状、点粒状结构物，故称之为网织红细胞[1]。目前国内普遍使用的网织红细胞计数方法为手工镜检法，大量的实验数据说明，手工法操作费时，影响因素多，如血液和染液比例不当；气温、湿度对染色的影响；涂片厚薄不均；用二甲苯擦片等，计数细胞少，导致计数结果精密度较差，变异系数大。在实验过程中，发现个别标本染色涂片检查时细胞表面有染料残渣颗粒沉积，影响了计数。但其能直接观察细胞形态，而且不需要昂贵的仪器、设备和试剂等。Sysmex XT-2000i全自动血液分析仪采用核酸荧光染色和流式激光测量的原理[2]，测定聚次甲基荧光染料与网织红细胞内存在的RNA结合的侧向荧光信号和前向散射光信号，分别反映网织红细胞的核酸含量和体积大小，不但能客观地计数网织红细胞的数量而且还能将其分为高荧光强度(幼雅型)、中荧光强度(成熟型)、低荧光强度(老化型)三类，并可计算未成熟网织红细胞比率和网织红细胞成熟度指数，以上新的参数可敏感、准确的反映RBC生成状况，对各种贫血的诊断、治疗及预后判断起着重要的作用，同时对估计肿瘤放疗、化疗后骨髓造血功能的恢复及器官移植效果的评价有较重大的意义[3]。从实验数据可见，Sysmex XT-2000i全自动血液分析仪测RET具有方便、快捷、精密度高、与手工法有良好的相关性，且检测参数多、干扰少等特点，可为临床更好地提供相关病情诊断及治疗转归信息；但一部先进的仪器的正常运作，还需要准确的仪器校正、良好的质控物随时检测仪器的状态，而且在全自动分析过程中还存在一些干扰因素如有核红细胞、疟原虫等造成的干扰,有干扰时应结合其他散点图共同分析。

综上所述，手工显微镜目测法计数应与全自动分析仪相互结合使用，取长补短，使实验结果更加准确、科学。

[1]叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程[M].第2版,南京:东南大学出版社,1997:14～15.

[2]寇丽钧.临床基础检验学[M].北京:人民卫生出版社,2002,8:18～19.

[3]Bock A,Herkner KR.Reticulocytematurity pattern analysis as a predictive marker of erythropoiesis in paediarics[J]. Clin Lab Haemat,1994,16(3):343～348.