熊丽红

（江西省血液中心，江西 南昌 330077）

为了提高血型检测准确率，保证临床用血安全，本中心在街头用纸片法（正定型）对无偿献血者进行血型初步筛查，再将血标本送入实验室进行正、反定型。笔者根据2009年6万多人份街头筛查结果和实验室的结果比较，寻找血型出现异常现象的各种因素，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 样本来源 2009年1月～2009年12月江西省血液中心的无偿献血者血液标本63045份，均用EDTA-Na2抗凝。

1.2 试剂来源 正定型试剂为长春博德生物技术有限责任公司和北京金豪制药股份有限公司；反定型试剂为上海血液生物医药有限责任公司和北京金豪北京金豪制药股份有限公司。

1.3 仪器 HIMILTON STAR2000全自动加样仪 （瑞士），RT-340酶标仪（瑞士），Thermo Star温控孵育振荡仪（瑞士），Labofuge400e平板式离心机（瑞士）。

1.4 方法

1.4 .1标本检测 献血前对所有献血者用纸片法进行血型的初步筛查。进入实验室后，对血袋针头血液再次用纸片法进行一遍正定型检测；用96孔U型微量孔板法（微板法）进行一次正定型检测和两次反定型检测 (实验室用不同厂家试剂进行两次正定和两次反定血型)。纸片法：在血型检定卡标记好抗-A和抗-B的位置，分别各滴1滴抗-A和抗-B血清试剂，再各加受检者血液1滴，混合后立即判断血型。微板法：用STAR全自动仪加样，反定型在U型板加两孔标本血清各50μl，再各加2～5%的标准A和B红细胞试剂50μl；正定型对标本红细胞进行2%的稀释后在U型板加两孔稀释红细胞各50μl，再各加标准抗-A和抗-B试剂50μl。加样完毕后在孵育振荡仪上孵育振荡2min，离心1min后再次孵育振荡2min，用RT-340酶标仪判读血型。

1.4 .2结果判断规则 只有正反定型相符的血型才能发放合格报告，出现血型差错的报业务科处理，出现正反定型不符的标本送输血研究室进行确认。

2 结果

2.1 2009年实验室共检测出血型异常29例，占献血总数的0.046%。

2.2 29例血型检测异常的人员中，有13例为外采人员检测血型错误，占44.8%；16例为正反定血型不符，占55.2%。

2.3 16例正反定血型不符标本经输血研究室确认后，结果回馈见表1。

表1 正反定血型不符因素分析

2.4 除上述29例血型异常现象外，尚有1例标本实验室重复检测血型未发现异常，血液被医院因血型正反定不符退回，经本中心输血研究室确认后为血液中存在冷凝集素。还有1例实验室正反定无异常，因Rh(D)阴性送输血研究室确认后发现标本中存在不规则抗体。

3 讨论

街头外采人员初筛血型与实验室重复检测后发现，血型出现异常的现象有44.8%是初筛出现错误。造成街头现场初筛血型检定错误的因素比较多，如街头实验条件、温度、湿度等实验条件比较复杂；现场献血人员过多；抗-A、抗-B血清效价较低及试剂在运输、保存、使用过程中其质量也可能发生变化等。

引起血型正反定型不符的原因比较多，除血液中抗原或抗体的减弱或丢失、获得性抗原存在或抗原改变、假或不规则抗体凝集反应等客观因素外，实验方法、人为因素等均可造成。统计本实验室2009年所有正反定型不符的结果显示有31.25%未找到明确原因，排除人为因素外，可能方法本身也有一定影响。纸片法纯手工实验，要求实验人员有高度责任心外，实验条件也是影响结果的重要因素；U型微板法检测血型快速简捷、适于批量检测，但也存有一定缺陷，因速度快，需震荡、离心，可能造成溶血及弱凝集不易发现，通过酶标仪检测凝块大小判定血型，跟抗原、抗体效价高低及加样量也有关系。客观因素中以血液中存在不规则抗体为最多，与有关报道相一致[1]。

血型鉴定错误是临床上出现溶血性输血反应主要原因之一，血型正反定型一致是血型鉴定关键所在。而血型鉴定错误首先是要避免人为因素造成的错误，除要有一套完整的质量体系文件，还需要工作人员有高度的责任心。各种免疫因素引起的正反定型不符原因比较复杂，血型的亚型、抗原或抗体减弱不可控制，但部分不规则抗体通过O型红细胞来监控，对所有无偿献血者血液标本进行不规则抗体筛查的必要性和可行性还需进一步探讨。为保证临床用血安全，血型鉴定必须百分之百准确，这要求工作人员具备丰富的理论知识和工作经验，合理应用各种血清学检查技术进行研究分析，随时学习掌握各种新理论、新技术才能适应现代输血事业发展的需要。

[1]张循善,何秀英,许连庆.血型正反鉴定结果不符原因分析及解决方法的探讨[J].安徽医科大学学报,2001,36(1):67-68.