张建忠

（江苏如东县人民医院检验科，江苏 如东 226400）

细菌性阴道病(Bacterial Vaginosis，BV)是一种育龄期妇女常见的、由正常阴道菌群与分泌物生化性质改变而引起的一种阴道炎症。感染率约15%～30%，而且易复发[1-2]。BV在细菌学上表现为阴道正常菌群(乳酸杆菌)减少，而加德纳菌，拟杆菌属、动弯杆菌等厌氧菌以及人型支原体大量增殖，通常易引起孕妇早产、盆腔炎症、HIV获得性感染等[3]。临床上仍以经典的Amsel法为诊断BV的金标准。但Amesl法检测，操作繁琐、干扰因素较多，本文对460例用Amesl法诊断的患者再行细菌性阴道病联合检测法进行检测，旨在观察其临床适用价值。

1 材料与方法

1.1 标本来源 临床诊断为BV的患者460例作为观察组；对照组为排除滴虫、真菌等明确病原感染的非BV门诊体检人群，共500例。所有被检查者要求就诊前3d无性生活、阴道灌洗及用药。样本均采用无菌棉拭纸在阴道后穹隆处采集足够量的阴道分泌物，每位受检者同时采集3份样本，立即送检。

1.2 BV诊断标准 以Amsel法临床判断为主要依据[1]。

1.3 方法

1.3 .1金标准Amsel法 (1)用pH试纸检测pH值， pH 值＞4.5；(2)阴道分泌物稀薄，有异味；(3)分泌物加入2～3滴KOH(10%～15%KOH)有腥臭味，即氨试验阳性；(4)湿片镜检到线索细胞。以上4项中至少有3项符合即为细菌性阴道病阳性。

1.3 .2阴道清洁度分级，严格按文献要求进行操作和报告[4]。即标本加生理盐水一滴，涂片后高倍镜检查，根据 所见的上皮细胞、白细胞、阴道杆菌与杂菌的数量进行判断，同时涂片，等干燥后经刘氏染色液染色油镜镜检以作对照。BASO刘氏染色液由武汉金宏生物科技发展有限责任公司提供。

1.3 .3用北京中生金域诊断技术有限公司提供的BV联合测定试剂盒检测阴道分泌物过氧化氢(H2O2)浓度、白细胞酯酶、唾液酸苷酶，具体操作方法为将取得的阴道分泌物用专用稀释液0.5m l稀释混匀并反复挤压棉签，用一次性塑料吸管将稀释的阴道分泌物液分别滴1滴(约35μl)到检测板反应孔中，再在唾液酸反应孔中加1滴唾液酸酶显色液，将反应板置于37℃恒温干浴器15min后观察和记录结果：过氧化氢(H2O2)浓度(过氧化物酶法)：阴道乳酸杆菌标志物，≥2μmol/L显紫色、 红色为阴性，＜2μmol/L显蓝色为阳性；唾液酸苷酶(5溴-4氯-3吲哚苷唾液酸苷盐法):阴道加德纳菌等BV致病菌标志物，无颜色变化为阴性，变紫色、红色为阳性；白细胞酯酶(5溴-4氯-3吲哚乙酸盐法)：炎性细胞的标志物，无颜色变化为阴性，变为蓝色或绿色为阳性。以上项目操作严格按照我室SOP文件进行。

1.4 统计学处理 实验结果用Stata 7.0统计软件处理，计量资料采用χ2检验统计分析。

2 结果

2.1 BV组和对照组按照阴道清洁度分级 由表1可知，BV组在高倍镜下镜检有37例被误判为阴道清洁度Ⅱ级。

表1 BV组和对照组按照阴道清洁度分级

2.2 BV组和对照组联合检测试剂盒各单项试验检测结果 由表2可知，BV组与对照组比较3项试验的差异均具统计学意义。BV患者阴道分泌物中H2O2、唾液酸苷酶、白细胞酯酶检测敏感性分别为74.78%、93.91%、92.83%，特异性分别为 92.6%、99%、78.8%。阳性预测值分别为90.29%、99.31%、80.11%，阴性预测值分别为79.97%、94.65%、92.27%。

表2 BV组与对照组联合检测试剂盒3项试验检测结果

2.3 联合检测H2O2浓度、唾液酸苷酶、细胞酯酶的平行试验[5]对BV的诊断价值 由表3可知H2O2浓度+唾液酸苷酶组合虽然特异性略有下降，但可达到94.64%，而联合检测诊断敏感性可大大提高，几乎达到100%（98.46%），且亦具有很好的准确性（90.31%），因白细胞酯酶特异性欠佳，其他组合的特异性亦较差，见表3。

表3 联合检测H2O2、唾液酸苷酶、细胞酯酶对BV的诊断价值(%)

3 讨论

BV感染的细菌能产生粘蛋白水解酶和唾液酸酶，破坏生殖道具有保护作用的粘蛋白外壳成分，导致其他病原微生物进入宫腔，并激发炎症反应[6]，故对于BV应做到早诊断，早治疗。诊断BV一般采用的金标准是Amesel标准，但该方法检测结果因受主观影响因素较多而影响了临床诊断的准确性[7]。而BV联合测定试剂盒是对阴道分泌物中H2O2浓度、白细胞酯酶、唾液酸苷酶进行联合测定。其中阴道分泌物中H2O2浓度可了解患者阴道内产H2O2乳酸杆菌的生态状况，分析阴道微生态是否正常；唾液酸苷酶是由阴道菌群中引发的病原体分泌的，其活性与病原菌数量成正相关[8]，检测唾液酸苷酶活性可了解病原体定居和繁殖的情况。白细胞酯酶阳性是阴道黏膜受损或已有炎症的标志，上述三者变化与BV发生时阴道内环境的改变相伴随，可作为BV诊断的辅助实验手段。虽然白带三项检测BV组与对照组比较差异均有统计学意义，但从3项检测BV的实验敏感性看依次为唾液酸苷酶、白细胞酯酶、H2O2浓度；白细胞酯酶的特异性较差，H2O2浓度敏感性不够，而唾液酸苷酶有较好的敏感性、特异性(93.91%、99%)。联合检测的平行试验显示如H2O2浓度和唾液酸苷酶任一项阳性即诊断为BV可以大大提高其敏感性，几乎为100%（98.46%），且同时具有较好的特异性（97.64%）和准确性(90.31%)。而白细胞酯酶特异性欠佳，阳性者可提示阴道粘膜受损或已并发炎症，可用于对BV诊断时的辅助参考。故BV3项指标检测相对于经典的Amsel法具有操作简便、指标更客观等优点。适用于快速诊断细菌性阴道病，从而使患者得以早期诊断和治疗。

虽然文献认为阴道清洁度Ⅰ、Ⅱ级均为正常，Ⅲ、Ⅳ级时多见于各种阴道炎[4]，但我们经统计发现占BV组8.04%（37/460）的病例经常规湿片高倍镜下阴道清洁度分级为Ⅱ级，而同时进行刘氏染色后油镜下检查却为Ⅲ级就其原因我们分析一般是由于在高倍镜下的阴道分泌物湿片背景中的少量杂菌不易辨认从而出现报告偏差，这一点应引起临床足够的重视。

[1]丰有吉,沈 铿.妇产科学[M].北京:人民卫生出版社,2005:270.

[2]马玉楠.细菌性阴道病及其诊断[J].中华医学检验杂志,2000,23(5):303-304.

[3]Fredricks DN,Fiedler TL,Marrazzo JM.Molecular identification of bacteria associated with bacterial vaginosis[J].N Engl JMed,2005,353(18):1899-1911.

[4]熊立凡,李树仁.临床检验基础[M].第3版,北京:人民卫生出版社,2004:267.

[5]杨振华.临床实验室质量管理.北京:人民卫生出版社,2003:119-120.

[6]袁江英,李琴芳.测定阴道唾液酸酶活性诊断细菌性阴道病.实用妇产科杂志,2001,17(2):75.

[7]熊海燕,张克霞,王 朔,等.微生态检测在细菌性阴道病诊断中的评价[J].现代医学检验杂志,2008,23(1):18-19.

[8]Sabina C,Jennifer FC,Manuela D S,et al.Among pregnantwomen with bacterial vaginosis， the hydrolytic enzymes sialidase and prolidase are positively associated with interleukin-1β[J].Am JObstet Gynecol,2008,198(1):132.