王伟鑫，李峥嵘，苏水林，李忠信

(1、东莞康华医院检验科，广东 东莞 523080；2、中山市宝骏生物工程研究所，广东 中山 528415)

随着科学技术的不断发展，血细胞分析仪已经普遍用于临床实验室，由于进口原装配套试剂价格比较昂贵，使用价格比较低廉的国产试剂必将成为国内一种趋势，但不同的血细胞分析仪因分析系统的差异，对同一份标本的测定，结果间可以存在着误差[1]。本文按照CLSIEP9-A2文件[2]的相关要求对使用国产试剂的自建检测系统与使用原装进口配套试剂的配套检测系统的检测性能进行比较研究，探讨使用非配套国产试剂的可行性及可能存在的一些问题。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

1.1 .1仪器 Sysmex公司生产的XE-2100血细胞分析仪(A3140)由于使用配套校准品、质控品、试剂，具有良好的精密度及准确性，每年参加卫生部、广东省临检中心的室间质评，结果均合格，故选择其作为其他两个检测系统参考仪器。

1.1 .2检测系统的组成 配套检测系统由KX-21N血细胞分析仪 (A9398)、原装配套试剂稀释液CELLPACK(CPK-303A， 批号 G8035)、 溶血素STROMATOLYSER-WH(SWH-200，批号 R8041)和EIGHTCHECK-3WP质控品(批号 92150822)组成；自建检测系统由KX-21N血细胞分析仪(A9394)、国产稀释液 (适用于日本Sysmex KX-21系列稀释液，批号A080728)和溶血素(适用于日本Sysmex KX21溶血素，批号A080722)组成。

1.2 标本来源 本院门诊、住院、体检患者静脉采血 2ml，EDTA-K2浓度为 4.45±0.85μmol/L 血液，所有检测均在4h内完成。

1.3 方法

1.3 .1检测系统的校准 使用SCS-1000校准品按照CLSIH38-P文件[3]要求对XE-2100进行校准；后采用彭黎明等介绍的方法[4]用经校准过的XE-2100定值的新鲜全血标本校准两台KX-21N血细胞分析仪。

1.3 .2试剂理化性质 对国产试剂及进口试剂的理化性质进行比较。

1.3 .3精密度

1.3 .3.1 日内精密度 分别选取(WBC、RBC、Hb、Hct、PLT)高、中、低浓度新鲜标本各一份于两套系统进行连续检测11次，弃去第一次结果，计算10次结果的均值及变异系数。

1.3 .3.2日间精密度 每日使用同一批号的配套质控品于两个检测系统各检测1次，连续检测30d，计算各系统结果的均值及变异系数。

1.3 .4相关性 选取住院门诊患者和健康体检者(男性：139、女性：101，年龄：最大 68 岁，最小 8 岁)标本240例，分别在两台KX-21N上进行平行测定，对测定结果进行统计分析。

1.3 .5检测性能 以配套检测系统结果为标准，分别以 WBC≥3.5×109/L，RBC≥3.9×1012/L，Hb≥110g/L，Hct≥0.37，PLT≥100×109/L，WBC≤10.0×109/L，RBC ≤5.5 ×1012/L，Hb ≤170g/L，Hct≤0.51，PLT ≤300×109/L作为阳性界值对自建检测系统结果进行ROC曲线分析，分别计算其曲线下面积(AUC)，阳性似然比(PPV)，阴性似然比(NPV)。

1.3 .6 参考范围验证[6]选取在我院2009年9月至2009年10月期间健康体检标本，根据CLSI C28-A3文件要求自建检测系统进行参考范围的验证，同时与配套检测系统参考范围进行比较。

1.3 .7统计学处理 以上实验数据使用SPSS 13.0统计软件以及Microsoft Excel 2003进行处理。

2 结果

2.1 检测系统的校准

对三个检测系统进行校准均合格，结果见表1。

2.2 试剂理化性质

两种试剂的理化性质均无差异，结果见表2。

2.3 精密度

表1 三套检测系统的校准结果(n=10)

表2 两种血细胞分析仪试剂的理化性质比较*

2.3 .1 日内精密度 结果显示两套检测系统的日 内精密度均良好，均在仪器要求CV之内[5]，见表3。

表3 两套检测系统的日内精密度结果的比较(n=10)

2.3 .2日间精密度 结果显示两套检测系统的日间精密度结果均良好，均在仪器要求CV之内[5]，见表4。

2.4 相关性

在检测 WBC、RBC、Hb、Hct、PLT 时，两套检测系统的结果间具有良好的相关性，相关系数均大于0.95。结果见表5。

表4 两套检测系统的日间精密度结果的比较

表5 两套检测系统结果的相关性

2.5 检测性能 以配套检测系统结果为标准，分别以 WBC≥3.5×109/L，RBC≥3.9×1012/L，Hb≥110g/L，Hct≥0.37，PLT≥100×109/L，WBC≤10.0×109/L，RBC ≤5.5 ×1012/L，Hb ≤170g/L，Hct≤0.51，PLT ≤300×109/L作为阳性界值对自建检测系统结果进行ROC曲线分析，结果自建检测系统在测定评价项目(WBC、RBC、Hb、Hct、PLT) 时具有良好的检测性能，见表6。

2.6 参考范围验证

表6 自建检测系统的诊断性能结果

自建检测系统与配套检测系统的参考范围不存在差别，结果见表7。

表7 两套检测系统的参考范围比较(x±2sd)

3 讨论

使用进口配套检测系统结果稳定可靠，但由于其试剂、校准品等比较昂贵，使用国产试剂可以降低成本，目前国内多数厂家生产的试剂众多，如何在使用国产试剂的同时，与进口配套检测系统间具有可比性，成为近期一个研究的课题。

彭黎明等研究表明用新鲜血校准仪器虽较麻烦，但适用于所有仪器，特别是不易获得配套校准品的仪器，成本低，适用性强[4]；且根据准确度传递的原理，认真做好每一个环节，通过分析验证后的结果也表明，其结果是可靠的，标准品重新定值后的准确度有进一步提高[7]。

本研究通过使用仪器配套的校准物SCS-1000对使用配套试剂的XE-2100进行校准后，用经其定值的新鲜全血对两台KX-21N进行校准，使两台KX-21N的结果可以溯源到XE-2100，保证了仪器在使用非配套试剂降低成本的同时，使结果更具可靠性。

使用病人标本进行相关性分析时，两个检测系统间结果具有良好的相关性，WBC、RBC、Hb、Hct、PLT等项目相关系数均＞0.95，P值均＞0.05。

以配套检测系统结果为标准对自建检测系统的结果进行诊断性能研究发现，自建检测系统在测定WBC、RBC、Hb、Hct、PLT 项 目 时 其 AUC 均 较 好 ＞0.93。

在参考范围的验证方面，使用自建检测系统与配套检测系统的参考范围的差异无统计意义。

Taouinet R等也论述了使用非配套血细胞分析仪试剂的可能性、可行性[8]。但由于仪器、试剂等因素改变，需定期与配套检测系统进行比对，确保其准确性。

[1]胡晓波,李 泳,吴驾浦,等.上海地区血液分析仪上准确性的研究和探讨[J].上海医学检验杂志,2001,16(16):355-357.

[2] The national committee for clinical laboratory standards method comparison and bias estimation using patient samples. Approved Guidline[S].Second Edition.EP9-A2,2002:4

[3]CLSI.Calibration and quality control of automated hematology analyzer;Proposed standard[S].National Committee for Clinical Laboratory Standards.Villanova,PA,1999,H38-P.1-22．

[4]彭黎明,蒋能刚,府伟灵.多台血细胞分析仪校准方法的建立[J].中华检验医学杂志,2005,28(5):539-542.

[5]Sysmex KX-21N血细胞分析仪操作说明书,日本Sysmex公司,2004年4月.

[6]Clinical and Laboratory Standards Institute.Defining,establishing,and verifying reference intervals in the clinical laboratory;approved guideline-third edition[S].CLSIdocument C28-A3.Wayne 2008.

[7]李熙建,王 鹏,邓述琴,等.自建检测系统与目标检测系统检测结果一致性的方法探讨[J].检验医学,2008,28(5):655-659.

[8]Taouinet R,Mougin G,Brun C,Darodes de Tailly P.Statistical comparison of the results of the blood cells count obtained with a Micros 60 ABX analyzer using the genuine reagents and generics reagents kits[J].Ann Biol Clin(Paris),2007,65(6):671-676.