钱琴芳, James E. Kirby

美国哈佛大学医学院病理系,马塞诸塞州02215

真菌的快速检测及鉴定之所以日益重要主要有以下原因:①免疫妥协的高危患者逐渐增多;②致病性真菌谱扩大;③重要的医学真菌对抗真菌药物产生耐药性。本文主要对真菌实验室诊断技术的进展进行综述,通过对真菌病的诊断进行分析,着重阐述应用于现代实验室中有助于早期诊断及经验性抗真菌治疗的实验方法。

1 直接镜检法

临床标本的直接镜检方法简便、成本低廉,一直是真菌检测的首选步骤。其优势在于检测快速且能为鉴定致病真菌类型提供最初线索,有时对形态特别的致病真菌甚至可以直接进行判定。正如革兰染色是检测临床标本中细菌感染时广泛使用的鉴别染色法一样,不同类型的真菌有不同的染色特征,使得真菌酵母相和菌丝相的形态都可以被观察到。如假丝酵母(下称念珠菌)属染色效果极佳,但双相型真菌染色结果不确定。通过使用氢氧化钾及卡尔科弗卢尔荧光增白剂,真菌检测有了进一步的改善。前者可以消化周围组织使真菌形态更明显,后者与真菌细胞壁上的多糖特异性结合从而增加检测的灵敏度和特异度。当患者发生接合菌感染时,因其进展迅速,常需要及时手术治疗以保全患者性命及四肢,此时应用氢氧化钾及卡尔科弗卢尔荧光增白剂对快速检测可能的致病真菌类型,如接合菌纲的毛霉菌属等具有极大的意义。还……