时秀云　张允标　郑绮菡

摘要：目的 通过验证不同生理周期健康女性性激素六项的生物参考区间，证实实验室所选用的参考区间能够符合本地人群特征。方法 明确健康女性不同的生理周期并筛选合适的参考人群，实施性激素六项参考区间的小样本验证，判断生物参考区间的适用性。结果 （1）卵泡早期E₂有18例数据通过；（2）卵泡中期E2有18例数据通过；卵泡中期P有18例数据通过；卵泡中期FSH有18例数据通过；卵泡中期LH有18例数据通过；（3）排卵高峰期E₂有20例数据通过；（4）黄体中期E₂有20例数据通过；黄体中期P有18例数据通过；黄体中期FSH有18例数据通过；黄体中期LH有19例数据通过；（5）周期中期高峰FSH有20例数据通过；周期中期高峰LH有18例数据通过；（6）绝经前PRL有19例数据通过；绝经后PRL有19例数据通过；（7）睾酮T有20例数据通过。结论 根据生物参考区间验证的判断标准，可知不同生理周期性激素六项的生物参考区间均验证通过，能够符合本地人群特征。

关键词：性激素六项；参考区间；验证；实验室管理

近年来，由于各种因素造成女性性激素水平异常、月经紊乱、不孕不育的患者增多，故性激素项目的准确检查尤为重要。而生物参考区间作为性激素项目性能参数之一，更应该适用于受检人群，避免过度诊疗。本文按照美国病理家学会（CAP）在实验室质量管理要求和中国合格评定国家认可委员会（CNAS）在实验室认可要求[1]中的内容，对女性性激素六项采取小样本验证方案进行生物参考区间的验证。

1材料及方法

1.1 女性不同生理周期划分

征求临床医生意见，明确女性不同生理周期划分界限，并据此筛选合适的健康人群采集样本进行性激素项目的检测。

1.2 临床样本筛选要求及健康调查

筛选单县本地不同年龄段的健康成年女性个体，妊娠妇女除外。筛选的参考个体至少应有良好的生活习惯、无近期服药史、无高血压及家族遗传病史、月经周期规律（月经期满28～30 d）等，并按照《健康調查表》中的内容填写相关信息，如是否为月经期和月经期天数（即从月经来潮第一天开始计算），以便事后安排样本采集事项。

1.3 检测设备及试剂耗材

采用美国贝克曼化学发光检测系统DXI800，试剂耗材使用原装配套。

1.4 方法

1.4.1 检测系统准备

开始实施参考区间验证前，需先对检测系统进行可靠性评价，至少应满足试验当天室内质控要求，选用室间质评成绩满意的检测系统进行检测。

1.4.2 参考个体准备及样本采集

首先完成合格参考个体的筛选，然后依据《健康调查表》中的信息对合格的参考个体进行分组，并编制《女性性激素项目生理周期调查表》。样本采集时需提前1～2 d通知待采集人员，并明确告知采集注意事项。具体患者采集时的注意事项及相关要求可见科室编制的《检验项目手册》。

1.4.3 参考区间验证方案

参考区间验证方案的制定可参考行业标准《临床实验室检验项目参考区间的制定》[2]、CNAS文件《医学实验室质量和能力认可准则在临床化学检验领域的应用说明》，及科室编制的《生物参考区间验证和建立程序》中的内容。一般从参考人群中至少选出20人，剔除离群值后不满20例需补足，然后对20例样本进行检测，并将检验结果与待验证的参考区间限值比较。若落在参考区间限值外的测定值不超过2个，则验证通过。需说明的是，同一性激素项目在不同的生理周期检测水平变动较大，试验时需按照不同的生理周期对不同的性激素项目进行分组检测，每组至少有20例数据。女性不同生理周期界定及相关性激素项目为卵泡早期（月经第5～7天）检测E2，卵泡中期（月经第12～14天）检测E₂、P、FSH、LH，排卵高峰期（月经周期的第14天左右）检测E₂，黄体中期（月经第22天左右）检测E₂、P、FSH、LH，周期中期高峰（下次月经来潮前14天）检测FSH、LH。

另外，泌乳素和睾酮项目检测水平相对稳定，不以女性生理周期的变化而发生较大波动。故泌乳素和睾酮项目女性参考区间的验证，会筛选不同年龄段的成年健康女性作为参考人群，同上实施小样本验证。

1.4.4 统计学处理

利用EXCEL 2003软件进行数据处理和统计学分析。

2结果

厂家提供的参考区间如下。卵泡早期E₂：15.16～127.81 pg/ml；卵泡中期E₂：19.86～148.13 pg/ml；卵泡中期P：0.31～1.52 ng/ml；卵泡中期FSH：3.85～8.78mIU/ml；卵泡中期LH：2.12～10.89 mIU/ml；排卵高峰期E₂：29.42～442.62 pg/ml；黄体中期E₂：30.34～274.24 pg/ml；黄体中期P：5.16～18.56 ng/ml；黄体中期FSH：1.79～5.12 mIU/ml；黄体中期LH：1.2～12.86 mIU/ml；周期中期高峰FSH：4.54～22.51 mIU/ml；周期中期高峰LH：19.18～103.03 mIU/ml。卵泡早期E2有18例数据通过；卵泡中期E₂有18例数据通过；卵泡中期P有18例数据通过；卵泡中期FSH有18例数据通过；卵泡中期LH有18例数据通过；排卵高峰期E₂有20例数据通过；黄体中期E₂有20例数据通过；黄体中期P有18例数据通过；黄体中期FSH有18例数据通过；黄体中期LH有19例数据通过；周期中期高峰FSH有20例数据通过；周期中期高峰LH有18例数据通过。见表1～2。

厂家提供的参考区间：绝经前的泌乳素水平为70.808～566.464 mIU/L，绝经后的泌乳素水平为58.088～416.368 mIU/L。由此可知，绝经前PRL有19例数据通过；绝经后PRL有19例数据通过。另外，健康女性睾酮分泌水平不受生理周期及年龄的影响，相对稳定，经验证有20例数据通过。见表3。

3讨论

生物参考区间是解释检验结果正常还是异常的重要依据，是分析检验信息的重要参数，实验室明确检验项目的生物参考区间意义重大。受年龄、性别、民族、居住地、体质、生理、生活习惯、遗传背景、生物学变异等因素影响，实验室需慎重建立或验证生物参考区间。

参考文献

[1] 丛玉隆，冯仁丰，陈晓东.临床实验室管理学[M].北京：中国医药科技出版社，2004：72-73， 89-102，123-129.

[2] 中华人民共和国卫生部.临床实验室检验项目参考区间的制定：WS/T 402—2012[S].北京：中华人民共和国卫生部，2012.