赵万富

(郑州市第三人民医院 检验科，河南 郑州 450000)

慢性阻塞性肺疾病急性加重(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease，AECOPD)属于临床常见的呼吸系统疾病。近年来随着广谱抗菌药物的普及应用以及患者自身免疫功能的降低，侵袭性肺部真菌感染成为AECOPD患者死亡的主要原因[1]。AECOPD的早期确诊和对症干预对改善患者预后、降低病死率具有重要意义。然而，真菌感染性疾病诊断困难，真菌培养虽能确定诊断，但操作复杂，耗时久易贻误治疗时机。G试验和血清白细胞介素(interleukin，IL)-6、IL-10、半乳甘露聚糖(galactomannan，GM)水平检测均是临床上常用的感染性疾病诊断方法，各具优缺点。本研究旨在观察上述方法联合应用对AECOPD并发侵袭性肺部真菌感染的早期诊断价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2018年3月至2019年3月在郑州市第三人民医院就诊的72例AECOPD患者，把单纯AECOPD患者作为对照组(50例)，把并发侵袭性肺部真菌感染患者作为观察组(22例)。观察组男13例，女9例；年龄46～73岁，平均(59.48±5.67)岁；体质量指数(body mass index，BMI)17.6～25.4 kg·m-2，平均(21.51±1.33)kg·m-2；合并基础疾病高血压5例，冠心病2例，糖尿病2例。对照组男27例，女23例；年龄44～72岁，平均(60.18±5.39)岁；BMI为17.2～25.7 kg·m-2，平均(21.48±1.26)kg·m-2；合并基础疾病高血压13例，冠心病4例，糖尿病5例。两组患者性别、年龄、BMI、合并基础疾病等一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)。本研究经郑州市第三人民医院医学伦理委员会审批通过。

1.2 纳入及排除标准(1)纳入标准：①明确COPD病史；②处于急性发作期；③入组前未接受抗真菌治疗；④患者自愿签署知情同意书。(2)排除标准：①细菌及其他病原体感染；②肺以外部位感染。

1.3 检测方法

1.3.1收集样本 患者均行G试验和血清IL-6、IL-10、GM水平检测。取患者晨起空腹静脉血3 mL，离心半径8 cm，3 500 r·min-1离心10 min，取上清液，保存至-80 ℃冰箱待测。

1.3.2G试验 取待测血清加入酶反应主剂，待溶解以微量加样器移至9 mm×65 mm平底试管，插入微生物快速动态监测系统(湛江安度斯生物有限公司，MB-80型)自动显示1，3-β-D葡聚糖水平>10 ng·L-1记为阳性。

1.3.3血清IL-6、IL-10水平检测 取待测血清，采用酶联免疫吸附法测定患者血清IL-6、IL-10水平。

1.3.4GM检测 取待测血清，与配比血清处理液混匀，水浴3 min(100 ℃)，离心，取上清液50 μL，与50 μL结合液加入EB-A2微孔板，封板，孵育90 min(37 ℃)，加显色液，避光置30 min，加终止液以自动定量酶标仪读吸光度值(A值)，A值需介于0.3～0.8间，连续2次有效A值>0.5者为阳性(+)。并发侵袭性肺部真菌感染阳性标准：上述检测任一诊断为阳性即为阳性。

1.4 观察指标(1)对比两组G试验和血清IL-6、IL-10、GM水平检测结果。(2)以真菌培养为金标准，分析G试验和血清IL-6、IL-10、GM水平检测结果。(3)比较血清IL-6、IL-10、GM水平检测与G试验联合诊断效能。

2 结果

2.1 G试验和血清IL-6、IL-10、GM水平检测观察组患者1，3-β-D葡聚糖水平、血清IL-6及IL-10水平、GM检测A值高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组患者G试验和血清IL-6、IL-10、GM水平检测结果比较

2.2 检测结果72例AECOPD患者中，经真菌培养确诊为并发侵袭性肺部真菌感染22例，血清IL-6、IL-10水平检测检出12例，G试验检出12例，GM检测检出14例，3种方法联合检出者24例。见表2。

表2 3种检测方法结果比较(n)

2.3 诊断效能G试验联合血清IL-6、IL-10、GM水平检测AECOPD并发侵袭性肺部真菌感染灵敏度为90.91%，高于G试验和血清IL-6、IL-10、GM水平检测，差异有统计学意义；G试验联合血清IL-6、IL-10、GM水平检测漏诊率为9.09%，低于G试验、GM检测、血清IL-6及IL-10水平检测，差异有统计学意义(P<0.05)；3种方法联合对AECOPD并发侵袭性肺部真菌感染诊断的准确度、特异度、误诊率、阳性预测值、阴性预测值与G试验和血清IL-6、IL-10、GM水平检测比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表3 不同方法诊断效能比较[%(n/N)]

3 讨论

COPD病情久且常反复发作，患者长期接受糖皮质激素、抗生素治疗可致免疫功能抑制，易遭受二重感染，其中以侵袭性肺部真菌感染最为常见[2]。据统计，AECOPD并发侵袭性肺部真菌感染时病死率达95.00%[3]。因此，临床上需加强早期预防及诊断，以改善患者预后。

血清IL-6、IL-10及GM水平检测是临床上评估机体炎症反应及真菌感染的常用方法。IL-6为炎症指标，有研究表明，正常情况下血清中IL-6水平极低(<7 ng·L-1)，当致病菌感染时会迅速升高[4-5]；IL-10是免疫调节因子，主要由Th2及调节性T细胞生成，能调节Th1细胞应答及巨噬细胞活性，相关研究证实，AECOPD患者血清IL-6、IL-10水平会升高，且可评估炎症反应的严重程度[6]。本研究发现，观察组AECOPD患者血清IL-6、IL-10水平高于对照组，与上述研究结果相符，说明存在侵袭性肺部真菌感染时IL-6、IL-10增加，但是发现血清IL-6、IL-10升高并无特异性，因此，无法鉴别真菌感染。此外，本研究还发现，观察组患者血清1，3-β-D葡聚糖水平和A值高于对照组，与血清IL-6、IL-10水平变化一致，或可辅助鉴别真菌感染。GM检测主要适用于侵袭性曲霉菌的早期诊断，但有报道显示，β(1-5)呋喃半乳糖残基为曲霉菌特有的细胞壁多糖成分，GM检测存在一定漏诊情况[7-8]。G试验主要检测真菌细胞壁成分1，3-β-D-葡聚糖，研究显示，人体吞噬细胞吞噬真菌后可持续释放上述物质，迅速升高血液、体液中1，3-β-D-葡聚糖水平，有利于真菌感染的早期诊断[9-10]。本研究结果显示，G试验联合血清IL-6、IL-10、GM水平检测AECOPD并发侵袭性肺部真菌感染灵敏度高于G试验和血清IL-6、IL-10、GM水平检测，漏诊率低于G试验和血清IL-6、IL-10、GM水平检测，提示G试验联合血清IL-6、IL-10水平及GM检测在AECOPD并发侵袭性肺部真菌感染具有较高的诊断效能，有利于疾病的早期确诊。但本研究首次探讨G试验联合血清IL-6、IL-10、GM水平检测对AECOPD并发侵袭性肺部真菌感染的诊断价值，且样本量较小，所得结论需大样本量研究进一步验证。

综上可知，G试验联合血清IL-6、IL-10、GM水平检测对AECOPD并发侵袭性肺部真菌感染诊断具有较高的灵敏度，能降低早期诊断漏诊率，可为临床上制定治疗方案提供参考依据。