□ 王文敏 刘立萍 罗 丹 广东产品质量监督检验研究院

牛奶总酸度包括固有酸度和真实酸度。固有酸度是指刚挤出来的新鲜牛乳本身具有的酸度，主要来源于鲜牛乳中酪蛋白、白蛋白、柠檬酸盐及磷酸盐等酸性成分；真实酸度又叫发酵酸度，指牛乳放置过程中在乳酸菌作用下，因乳糖发酵产生乳酸而升高的酸度。牛奶的总酸度包括未离解的酸的浓度和已离解的酸的浓度，其大小可借碱滴定来测定[1]。酸度测定是乳品合格与否的一项重要指标。牛奶是人们摄入优质蛋白的主要来源，常用牛奶酸度反映牛奶新鲜程度。《食品安全国家标准 巴氏杀菌乳》（GB 19645—2010）规定牛奶酸度为12～180T，一般市售牛奶的灭菌方式分为巴氏杀菌和超高温瞬时灭菌两种[2]。巴氏杀菌的牛奶一般包装较简易，保质期较短，需要冷藏保存，但营养损失少，开启后酸败速度较快。瞬时超高温灭菌的牛奶一般保质期长（可长达一年），可常温储存，牛奶中营养物质有一点的损失，开启后酸败速度较慢。

本文选择营养较为丰富，保质期较短的巴氏杀菌乳作为检测对象，按照国家标准《食品安全国家标准 食品酸度的测定》（GB 5009.239—2016）的第3法（电位滴定仪法）进行测定，依据《测量不确定度评定与表示》（JJF 1059.1—2012）和《化学分析中不确定度的评估指南》[3—4]对影响巴氏杀菌乳酸度测定结果的不确定度分量进行分析，通过计算得出其扩展不确定度，为日后对酸度的测量不确定度进行评定提供参考，以保证电位滴定法测定酸度的准确度。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

813型自动电位滴定仪（瑞士万通公司）；DT—1002 A型分 析 天 平（常熟金羊砝码仪器有限公司）；150 mL烧杯；NaOH标准滴定溶液（0.1 mol/L）。

1.2 测定方法

称取10 g试样，置于150 mL烧杯中，加20 mL新煮沸冷却至室温的水，混匀，用氢氧化钠标准溶液（0.1 mol/L）电位滴定至PH终点为8.3。滴定过程中，向锥形瓶中吹氮气，防止溶液吸收空气中的二氧化碳。记录消耗的氢氧化钠标准滴定溶液的体积（V1）。用相应体积的蒸馏水做空白实验，读取耗用氢氧化钠标准溶液的体积（V0）。

1.3 数学模型

试样中酸度的含量按式（1）计算

式中:X—试样的酸度，0T；c—氢氧化钠标准溶液的摩尔浓度，mol/L；V—滴定时所消耗氢氧化钠标准溶液的体积，mL；V0—空白实验所消耗氢氧化钠标准溶液的体积，mL；100—100 g试样；m—试样的质量，g；0.1—酸度理论定义氢氧化钠的摩尔浓度，mol/L。

2 结果与分析

2.1 不确定度来源

图1 不确定度来源

2.2 测量不确定度分量评估

2.2.1 酸度测量结果重复性引入的不确定度分量

测量的重复性以标准偏差表示，按贝塞尔公式计算：

计算结果以重复性条件下获得的2次独立测定结果的算术平均值表示，计n=2，利用预评估的标准偏差，计算本次测量平均值的标准偏差为：

2.2.2 系统效应导致的不确定度

2.2.2.1 氢氧化钠标准滴定溶液所引入的不确定度

由证书查询，0.1 mol/L的氢氧化钠标准滴定溶液的相对扩展不确定度为0.2%，置信概率P=95%。则相对标准不确定度urel（c）=0.2%/1.96=0.102 0%。

2.2.2.2 天平称取试样引入的不确定度

期待治疗指:不作任何处理,只是给予密切监测与随访,待疾病自愈的治疗方式[2]。异位妊娠患者由于胚胎着床部位不对,孕初期胚胎极易因供血营养不佳而死亡,而后自行吸收消失。对于缺乏临床症状或症状较轻、包块直径小、腹腔出血少、血清人绒毛膜促性腺激素检测值小于1500 m U/m L的异位妊娠患者而言,期待治疗方法可获得一定的疗效。与手术或药物治疗方法相比,期待治疗有效防止了因手术操作、麻醉等因素而引发的一系列并发症以及药物不良反应,治疗费用方面也大大减少了。但是,不可不提的是,期待治疗存在一定的风险,治疗前要严格掌握适应证,以免导致患者病情恶化而增加治疗难度。

由证书查询，ML204电子天平的允许误差为±0.5 mg，服从均匀分布,包括因子称量的时候分为2次，一次空盘，一次盘加试样，则称量试样时产生的标准不确定度为：

本次测量的样品质量平均值为m=10.136 4 g，重复性测量引入的相对标准不确定度为：

2.2.2.3 测定过程引入的不确定度

试样滴定消耗氢氧化钠标液体积的不确定度u（V），包括溶液温度与校正温度不同引起的不确定度。检测温度为（20±5）℃，在20 ℃时水膨胀系数为2.1×10—4/℃，滴定仪使用温度和校正计量温度差为5 ℃，设为正态分布，置信度为95%。

本次测量平均消耗氢氧化钠溶液体积V1为1.53 mL，由滴定体积引入的不确定度u（V1）为：

空白试验，由滴定体积引入的不确定度u（V0）为：

以上两项合成不确定度为：

相对标准不确定度为：

2.2.2.4 自动电位滴定仪引入的不确定度

采用813型全自动电位滴定仪测定，其pH示值误差为±0.02，按照均匀分布，取则所得示值误差的不确定度为：

滴定要求终点为pH=8.3，则示值的相对标准不确定度为：

2.3 不确定度分量统计图

如图2所示，不确定度的来源由大到小依次为：重复测试引入的不确定度u（rep）＞滴定装置引入的不确定度u（V+）＞标液浓度引入的不确定度u（c）＞测定过程引入的不确定度u（V）＞天平称取试样引入的不确定度u（m）。

图2 不确定度分量统计图

2.4 合成标准不确定度

2.4.1 合成相对标准不确定度u

2.4.2 合成标准不确定度

2.4.3 扩展不确定度

取包含因子k=2，扩展不确定度为：

3 巴氏杀菌乳酸度的扩展不确定度及测定结果的表示

在95%的置信水平下，取k=2，则牛奶中的酸度的扩展不确定度为：U=0.20T，本次牛奶中的酸度的测定结果可表示为（14.9±0.2）0T（k=2）。

4 结论

本文采用电位滴定法测定巴氏杀菌乳中的酸度。牛奶样品中酸度测量值为14.90T时，其扩展不确定度为0.20T（k=2）。通过评定巴氏杀菌乳中的酸度的不确定，分析对比不确定度分量结果可知，各测量不确定度分量中以重复测试引入的不确定度分量影响最大，即来自A类的不确定度影响贡献最大。其次为自动电位滴定仪终点识别的误差和标准滴定溶液，而由天平称取试样引入的不确定度影响最小。因此，为提高电位滴定法测定巴氏杀菌乳中的酸度时的准确度，检测员在实验操作过程中应：①严格按照标准或检验规程进行操作；②定期对电位滴定仪进行检定和期间核查；③定期对标准溶液进行重标定，保证标准溶液浓度的准确性。