王朝阳, 刘运华, 孙 乐, 谭 超

(1.安康市农业科学研究所，陕西 安康 725021；2.安康学院， 陕西 安康 725000)

硒(Se)是一种稀有元素，它在自然界中存在的价态有5种，分别为-2、0、+2、+4 、+6[1]。硒是生命所必需的微量元素，研究表明，硒可以保护心血管和心肌的健康、抗氧化、防癌抗癌等[2]。陕西省安康市是我国第二大富硒区，所产的紫阳富硒茶已经成为市场认可的富硒食品之一，但是由于茶树对硒的吸收规律尚不明确，目前紫阳富硒茶仍存在硒含量不稳定的问题[3]。本试验通过研究根施外源硒肥对茶叶产量、硒含量、主要品质成分(包括水浸出物，咖啡碱，游离氨基酸总量等)等因素的影响，研究硒在植物体内的吸收转化规律，为促进安康富硒茶生产、研究提供一定的理论依据和技术支撑。

1 材料与方法

1.1 试验地点与时间

试验于2017年2月至2018年4月在安康农科所试验茶园和实验室内进行。

1.2 试验材料

本次试验的硒肥(硒含量为300 mg·kg-1)由苏州硒谷科技有限公司提供，试验茶树品种为树龄3年的陕茶一号。

1.3 试验方案

(1)试验设计

采用随机区组设计，每个小区长7.0 m，宽4.5 m，面积31.5 m2，种植有3行茶树。硒肥施用量设置0(CK)、75、150、225、300、375 kg·hm-2共6个梯度，每个梯度设置3次重复，小区施用量设置CK(0 kg)、A1(0.24 kg)、A2(0.47 kg)、A3(0.71 kg)、A4(0.94 kg)、A5(1.18 kg)。

(2)施用方法

2016年秋季茶园施用基肥后，2017年2月按照设计方案用量与腐熟有机肥10 kg(成分：菇渣、锯末、稻壳，含硒量0.25 mg·kg-1)混合均匀，每小区施肥量保持一致，开沟20 cm施入，施入后覆土。

(3)茶园管理

茶园管理按照常规管理进行，各小区保持一致。

(4)数据采集

①茶样采集：样品采集时间为2017年4-6月，其中4-5月上旬采摘记为春茶，5月中旬至6月采摘记为夏茶。当小区80%以上茶叶达到一芽二叶期时，开始采摘一芽二叶茶鲜叶作为样品，记录采摘量及采摘时间。实际共取得3批试验样品，春茶2批，夏茶1批。每批样品随机抽取20个芽头称重，计算百芽质量。样品120℃杀青，80℃烘至足干待测。

②产量统计：样品采摘时，实际记录试验小区内的各批样品鲜叶采摘量，统计产量。

(5)样品检测方法

茶叶样品硒含量检测方法为氢化物原子荧光光谱法(GB/T21729-2008)。称取0.5 g茶叶样品于250 mL锥形瓶中，并取出一个250 mL的空锥形瓶做空白对比试验，加入10 mL混合酸(盐酸:高氯酸=4:1)及2颗玻璃珠用塑料薄膜封口，冷消化过夜。次日将试样放在电热板上加热，温度保持在160℃，在试样加热挥发至2 mL左右并伴有白烟冒出时冷却后加入5 mL浓度为6 mol·L-1的盐酸，继续加热至2 mL并伴有白烟出现，此时已将Se+6还原成了Se+4，将试液消化液冷却后转移至50 mL容量瓶中用20%的盐酸定容混匀待测。试样处理完后用AFS-2202E操作仪器进行检测，检测前打开仪器预热0.5 h，按照仪器参考条件调试仪器，待仪器调试稳定后绘制标准工作曲线，待标准曲线接近于1时转入试样测量，按照顺序先测量空白样后测量试样消化液。在测量过程中每测不同试样消化液时都要5%的盐酸溶液清洗进样器。

茶叶品质物质含量检测：水浸出物含量采用全量法(GB/T8305-2013)测定，茶多酚总量采用酒石酸亚铁比色法(GB/T8313-2008)测定，氨基酸总量采用茚三酮比色法(GB/T8314-2013)测定，咖啡碱含量采用紫外分光光度法(GB/T8312-2013)测定。

1.4 数据分析

试验数据用Excel软件计算处理，对各项指标运用spss19.0软件对数据进行显著性差异分析。

2 结果与分析

2.1 施硒对茶叶产量的影响

由表1可以看出，6个处理中，A3处理小区产量最高，为1.73 ±0.39 kg，A2和A5处理产量相对最低，但显著性分析结果显示，在5%水平各处理间差异均不显著。

2.2 施硒对茶叶硒含量的影响

根据当年茶样含硒量检测数据(表2)可以看出，春茶一芽二叶含硒量在5%下，各处理除A1外其余都与CK差异显著，在1%水平下A5与CK差异极显著。夏茶一芽二叶含硒量在5%和1%显著水平下，各处理除A1外其余都与CK差异显著。结果表明，随着硒肥施用量的增加，春茶、夏茶茶叶硒含量均呈上升趋势。春茶、夏茶硒含量最高均为A5样品，分别为(5.18±1.23) mg·kg-1和(6.31±0.37) mg·kg-1，富硒茶含量标准为0.15～5. 0mg·kg-1，A5春茶、夏茶均超出标准规定，说明施用量过高，在实际操作中应适当降低施用量。硒含量最低均为空白对照，含硒量分别为(0.15±0.11) mg·kg-1和(0.33±0.31 )mg·kg-1。夏茶的硒含量明显高于春茶。

2.3 施硒对茶叶品质成分的影响

由表3可以看出，水浸出物含量在(42.24±0.06)%～(44.82±0.08)%之间，其中A5处理水浸出物含量最高；茶多酚含量(21.86±0.42)%～(23.51±0.84)%之间，其中A2处理茶多酚含量最高；氨基酸含量在(3.09±0.03)%～(4.16±0.06)%之间，其中A5处理氨基酸含量最高；咖啡碱含量在(4.38±0.03)%～(4.45±0.05)%之间，其中A3咖啡碱含量最高。结果表明，各品质物质随着硒肥施用量增加大致呈上升趋势，除个别外，与对照相比均有不同程度的增加，但是各处理间无差异，这可能是由于施用硒肥的同时各小区均施用了大量有机肥作为施用硒肥的载体，导致各处理之间的肥力被均衡导致的。

表1 硒肥试验小区产量

注：同列相同小写字母表示5%水平无显著差异

表2 不同硒肥施用量对一芽二叶期茶叶硒含量结果 (mg·kg-1)

注：同列不同小写字母表示5%水平差异显著，同列不同大写字母表示1%水平差异极显著。

表3 不同处理春茶品质物质含量分析 (%)

注：同列相同字母表示5%水平无显著差异

3 讨论与结论

研究结果表明，本试验各处理样品均达到或超过富硒茶标准，其中A5处理春茶和夏茶硒含量最高。水浸出物检测结果表明空白对照含量最低，A5处理含量最高。茶多酚检测结果表明空白对照含量最低，A2处理含量最高。氨基酸检测结果表明A2处理含量最低，A5处理含量最高。咖啡碱检测结果表明A3处理含量最高。

综上所述，通过研究根施0～375 kg·hm-2的硒肥可知A5处理对茶树的影响最大，即硒肥施用量为375 kg·hm-2时对茶树的影响最大。因此根施外源硒肥可显著增加茶叶硒含量、水浸出物含量及氨基酸含量，其中硒肥施用量为375 kg·hm-2时茶叶中的含硒量、水浸出物含量、氨基酸含量最高；硒肥施用量为150 kg·hm-2时茶多酚含量最高；硒肥施用量为225 kg·hm-2时咖啡碱含量最高。唐颢等[4]通过研究叶面喷施和根部施用硒光合菌肥(含硒0.156 mg·mL-1)对茶叶硒含量的影响，研究结果表明，随着施硒浓度的增大茶叶硒含量呈上升趋势。薛梅[5]等研究结果表明，富硒肥可以提高农作物的产量，提高作物的硒含量，改善作物营养品质。许春霞[6]等人研究结果表明土施硒肥可明显提高茶叶含硒量，以上研究结果均与本试验研究结果一致。

因此，通过此研究表明，根施外源硒肥可显著增加茶叶硒含量，茶叶含硒量与硒肥施用量呈正相关。硒肥施用量对产量及茶叶品质影响不显著，但是外源施用硒肥对茶叶中硒含量存在形态影响尚不明确，还需进行进一步研究验证。