左世梅　张映春　师宏　李杰芬　宋瑞瑜

【摘要】 目的：探讨该院2016年6月-2017年5月引起血液感染的常见病原菌的分布及对常见抗生素的耐药情况，为临床抗菌治疗提供科学依据。方法：用Bact/Alert 3D全自动血液培养仪对19 245份血液标本进行培养检测，阳性菌株转种后用VITEK2 COMPACT全自动微生物鉴定仪进行分离鉴定及药敏情况分析。结果：在19 245份血液培养标本中分离出病原菌867株，阳性检出率为4.51%，其中革兰阴性杆菌342株，占39.45%，革兰阳性球菌499株，占57.55 %，真菌12株，占1.38%，厌氧菌14株，占1.62%;病原菌中，革兰阴性杆菌以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和甲型副伤寒沙门菌为主，革兰阳性球菌以凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌为主。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶株分别占55.98%、23.00%，且发现耐亚胺培南和美罗培南的肺炎克雷伯菌。葡萄球菌对呋喃妥因、利福平、利奈唑胺和万古霉素均高度敏感。结论：血液培养主要病原菌为革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌，分离的病原菌耐药情况严重，加强细菌耐药性的监测有助于合理使用抗菌药物。

【关键词】 血培养; 分布; 病原菌; 耐药性

Analysis on Distribution and Drug Resistance of 867 Pathogens from Blood Cultures/ZUO Shimei，ZHANG Yingchun，SHI Hong，et al.//Medical Innovation of China，2019，16（24）：-168

【Abstract】 Objective：To provide scientifical basis for clinically antimicrobial therapy，and to study the distribution of common pathogens and drug resistance to common antibiotics from June 2016 to May 2017.Method：A total of 19 245 blood cultures were determinated by Bact/Alert 3D，then the instrument of French made BioMerieux VITEK2 COMPACT was applied to identify and analyze the positive isolates.Result：A total of 19 245 blood culture specimens were detected，there were 867 isolates of pathogenic bacteria，and the positive rate was 4.51%，including 342 isolates（39.45%）of Gram-negative bacilli，499 isolates（57.55%）of Gram-positive cocci，12 isolates（1.38%）of fungi，14 isolates（1.62%）of anaerobic bacteria.The main species of the Gram-negative bacteria were Escherichia coli，Klebsiella pneumonia，Salmonella paratyphi A，the main species of the Gram-positive were Coagulase-negative Staphylococcus，Staphylococcus aureus.55.98% of Escherichia coli and 23.00% of Klebsiella pneumonia isolates were ESBL producers，and Klebsiella pneumonia isolates were found resistant to Imipenem and Meropenem.Staphylococci were highly sensitive to Nitrofurantoin，Rifampin，Linezolid and Vancomycin.Conclusion：The main isolated blood culture pathogenic bacteria are Gram-positive cocci and Gram-negative bacillus and the drug resistance of isolated pathogenic bacterium is severe，the monitoring of bacterial resistance in hospital contributes to the rational use of antibiotics.

【Key words】 Blood culture; Distribution; Pathogen; Drug resistance

First-authors address：Kunming Health Vocational College，Kunming 650600，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.24.044

血液感染是十分严重的全身感染性疾病，具有病情危重、死亡率高的特点[1-2]。血培养是目前临床诊断由细菌感染引起的菌血症、脓毒血症的主要方法之一[3-4]。在指导临床抗菌药物的使用过程中，血培养被认为是最及时、最准确的方法[5-6]。血培养属于血流感染诊断比较直接的方式，因诱发血流感染的病原菌种类、耐药性等在时间与地域上有差异，定期血培养分析病原菌分布特征与耐药性情况，可为临床诊治提供不错的依据，从而有效控制血流感染产生及传播[7-8]。对2016年6月-2017年5月本院血培養标本进行总结和回顾性分析，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源 采集2016年6月1日-2017年5月31日玉溪市人民医院临床送检的血培养标本

19 245份，每份为1瓶需氧瓶和1瓶厌氧瓶，共分离培养获得病原菌867株，多次培养且菌种相同的患者，仅采集首次血培养结果。

1.2 仪器与试剂 血培养瓶（需氧菌培养瓶和厌氧菌培养瓶）、血平板、巧克力平板、麦康凯平板、Bact/Alert 3D全自动血培养仪和VITEK2 COMPACT全自动微生物鉴定仪均购自法国梅里埃公司。细菌鉴定卡和药敏卡是法国梅里埃公司生产配套专用鉴定卡和药敏卡。质控菌株大肠埃希菌（ATCC25922）、金黄色葡萄球菌（ATCC29213）、铜绿假单胞菌（ATCC27853）由卫计委临床检验中心提供。

1.3 方法 标本按常规无菌操作方法采集。血液培养若经过5 d未報阳性，且转种后无细菌生长者判定为阴性;血液培养仪若报警提示阳性，则标本转种血平板，巧克力平板和麦康凯平板，置35 ℃温箱18～24 h后，观察生长情况，同时涂片作革兰染色镜检，向临床初报病原菌。

1.4 统计学处理 采用Whonet 5.6软件和SPSS 19.0软件进行统计分析，计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 病原菌分布情况 从19 245份血液标本中，分离出病原菌867株，阳性检出率为4.51%，病原菌分布见表1。

2.2 血培养阳性标本的科室分布 867份血培养阳性标本主要采自18个临床科室，血培养分离率较高的前5位科室是重症医学科（133株）、肝胆外科（107株）、儿医新生儿科（65株）、感染科（61株）和儿医重症医学科（55株），占比分别为15.34%、12.34%、7.50%、7.04%和6.34%。统计分析显示，各科室血培养阳性标本比例比较，差异有统计学意义（字2=61.307 9，P=0.000 0），除肝胆外科（字2=3.269 1，P=0.070 6）外，重症医学科血培养阳性标本占比均显著高于其他临床科室（字2=26.364 0、30.087 9、36.297 0，P=0.000 0）。

2.3 细菌耐药性分析

2.3.1 肠杆菌科细菌 大肠埃希菌（209株）、肺炎克雷伯菌（31株）和甲型副伤寒沙门菌（26株）是血培养阳性标本中分离到数量最多的3种肠杆菌，这3种肠杆菌中出现碳青霉烯类耐药的肠杆菌，如肺炎克雷伯菌，但绝大部分是敏感的。大肠埃希菌产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）菌株占55.98%，肺炎克雷伯菌产ESBLs菌株占23.00%。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及甲型副伤寒沙门菌耐药率见表2。

2.3.2 葡萄球菌 血培养阳性标本中分离到数量最多的5种葡萄球菌分别是人葡萄球菌（172株）、表皮葡萄球菌（127株）、溶血葡萄球菌（41株）、头状葡萄球菌（18株）、金黄色葡萄球菌（17株），前4种葡萄球菌属于凝固酶阴性葡萄球菌。5种葡萄球对16种常见抗菌药物的敏感性结果，见表3。

3 讨论

3.1 血培养病原菌的分布 菌血症诊断的重要途径是血培养，及时明确致病菌分布和抗菌药物的耐药性，对提高临床治愈率具有非常重要的意义。本研究显示，在2016年6月-2017年5月全院送检的19 245份血液标本中，分离出病原菌867株，阳性检出率为4.51%，明显低于文献[9-11]报道的数据，可能与未及时送检和采集标本时机等因素有关。血培养分离率较高的前5位科室是重症医学科、肝胆外科、儿医新生儿科、感染科和儿医重症医学科，这与国内的相关报道不一致[12]。本研究结果，革兰阳性球菌为主要病原菌，占57.55%，其次为革兰阴性杆菌，占39.45%，这与文献[13-14]报道不尽相同，而与国内外多所医院的报道结果一致[6，15]。另外本院血培养病原菌检出排前5位的分别为大肠埃希菌（24.11%），人葡萄球菌（19.84%），表皮葡萄球菌（14.65%），溶血葡萄球菌（4.73%），沙门菌属（3.81%），这应该引起各临床科室的高度重视。凝固酶阴性葡萄球菌的检出率已经大大地超过金黄色葡萄球菌的检出率，这与美国的研究报道一致[16]，由凝固酶阴性葡萄球菌引起的感染日趋增多，提醒广大医务工作者应予以高度重视，但文献[17]报道，凝固酶阴性葡萄球菌在血培养中有40.00%为污染菌，提示临床应规范血培养采集，结合临床资料判断是否为致病菌。同时血培养中也检测到厌氧菌的存在，厌氧菌引起的菌血症呈上升趋势。

3.2 血培养病原菌的耐药性 本研究结果显示，ESBLs主要由肠杆菌科细菌产生，以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为代表，大肠埃希菌ESBLs的检出率55.98%高于肺炎克雷伯菌的23.00%，与国内文献[18]细菌耐药报道一致。肠杆菌科中分离出对碳青霉烯类药物亚胺培南和美罗培南耐药的肺炎克雷伯菌，应引起重视，但是碳青霉烯类抗菌药物如亚胺培南、厄他培南和美罗培南对产ESBLs菌株具有高度的敏感性，所以为产ESBLs菌株的首选药物之一。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对阿莫西林/克拉维酸和阿米卡星的耐药率低于23.00%，临床上也可用于肠杆菌感染的菌血症治疗。两者对氨苄西林和头孢唑啉都有很高的耐药性，耐药率大于80.00%，说明氨苄西林和头孢唑啉已不适合用于由肠杆菌引起的菌血症治疗。甲型副伤寒沙门菌对美罗陪南、亚胺培南、厄他培南、呋喃妥因、阿莫西林/克拉维酸、复方新诺明、四环素等耐药率最低（0），能达到良好的治疗效果。

本研究结果显示，金黄色葡萄球菌和4种凝固酶阴性葡萄球菌对红霉素、青霉素的耐药率均大于74.00%，临床应谨慎使用。两者对万古霉素、呋喃妥因、利福平均高度敏感，对利奈唑胺100%敏感，提示糖肽类抗菌药物和利奈唑胺仍是临床治疗葡萄球菌血液感染的首选药物。未发现对万古霉素耐药菌株，但国外已有对万古霉素耐药的报道[19]，临床应注意监测。两者对奎奴普丁/达福普汀高度敏感，提示奎奴普丁/达福普汀是一种很有前景的抗葡萄球菌的良药，菌血症在医院的发生率呈现上升的趋势，血培养是确诊败血症的金标准。

综上所述，血液培养主要病原菌为革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌，随着抗菌药物的大量应用，细菌耐药性不断增长。微生物室应高度重视血培养病原菌的耐药性监测及其分布，并及时告知临床医师。临床也需要随时关注血培养病原菌分布和耐药性变化趋势，合理有效使用抗菌药物，提高疾病治愈率。

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（收稿日期：2019-01-16） （本文编辑：程旭然）