刘云涛 简 磊 潘敬芳

(三峡大学仁和医院内分泌科，湖北 宜昌 443000)

鸢尾素(Irisin)是新近发现的一种由骨骼肌分泌的细胞因子，已证实其与糖、脂代谢相关〔1，2〕。人体研究发现随着慢性肾脏疾病分级的增加，其水平逐渐降低〔3〕。研究发现Irisin是糖尿病肾病的独立影响因素〔4〕。已证实α-硫辛酸(ALA)对糖尿病肾病及其他慢性肾病具有治疗作用〔5〕。本研究观察ALA对早期2型糖尿病(T2DM)肾病患者血清Irisin水平的影响。

1 对象与方法

1.1研究对象 2013年9月至2015年10月三峡大学仁和医院门诊、肾内科、内分泌科门诊及住院部患者，体检中心体检者选取正常个体93例(NC组)，口服葡萄糖耐量实验(OGTT)排除T2DM，平均(57.41±8.21)岁，男48例，女45例。1年内新诊断的单纯T2DM 90例为T2DM组，平均(56.81±7.88)岁，男46例，女44例。血糖控制不理想的T2DM早期肾病92例(EDN组)，平均(59.57±7.52)岁，男47例，女45例，肾功能正常，尿白蛋白(UAlb)/肌酐(Cr) 30～299 mg/24 h。EDN组随机分为ALA治疗组(A组，47例，男24例，女23例)组、常规治疗组(B组，45例，男23例，女22例)。T2DM患者均符合1999年WHO诊断标准，均糖尿病饮食，入选者均排除1型糖尿病、特殊类型糖尿病。通过血常规、尿常规、大便常规及潜血试验、胸片、肝肾功能、肿瘤标志物测定排除肝肾功能不全及肿瘤、感染患者。在3个月内未发生糖尿病酮症酸中毒及其他急性并发症。排除其他类型肾病。近2 w未服用血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)类药物、血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(ARB)类药物、胰岛素增敏剂及其他影响尿蛋白的药物。

1.2相关生化指标测定 受试者禁食8 h后于清晨抽取空腹肘静脉血测空腹血糖(FPG)、血脂、糖化血红蛋白(HbA1c)。用日本ARKRAY HA8160 HbA1c分析仪及其配套试剂检测；FPG、肾功能、血脂、尿蛋白排泄率(UAER)使用美国雅培ARCHITECT C8000全自动生化分析仪检测。超氧化物歧化酶(SOD)测试盒由南京建成生物研究所提供，采用羟胺法测定。胰岛素使用德国罗氏Cobase411全自动电化学发光分析仪检测。过氧化物酶体增殖活化受体(PGC)-1α试剂盒购自上海双赢生物有限公司，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测。肿瘤坏死因子(TNF)-α试剂盒购自安迪生物技术上海有限公司，采用ELISA检测。转化生长因子(TGF)-β1检测采用ELISA检测，试剂盒购自北京鑫方程生物技术有限公司。Irisin采用ELISA检测，使用美国R&D公司试剂盒，批内CV及批间CV<10%。免疫散射法检测UAlb/Cr(罗氏P800全自动生化仪)。

1.3药物治疗及干预 所有EDN患者给予格列吡嗪控释片(5～15 mg/d)或胰岛素降糖，维持血糖相对稳定〔FPG 5.4～7.1 mmol/L，餐后2 h血糖(2 h PG)7～11 mmol/L〕；血糖稳定后A组在基础治疗上给予ALA注射液600 mg静滴，1次/d，持续2 w。依从性差，血糖控制不理想者未进入本研究。

1.4统计学分析 采用SPSS17.0统计学软件进行t检验、单因素方差分析、Pearson相关性分析、多元线性逐步回归分析。

2 结 果

2.1一般临床资料和临床生化指标的比较 T2DM、EDN组FPG、HbA1c、TGF-β1、低密度脂蛋白(LDL)、TNF-α、FINS、HOMA-IR均显著高于NC组(P<0.01或0.05)，SOD、HDL、PGC-1α低于NC组(P<0.01或0.05)；EDN组UAlb/Cr、TGF-β1、FPG、TNF-α、FINS、HOMA-IR均显著高于T2DM组(P<0.01或 0.05)，PGC-1α、SOD显著低于T2DM组(P<0.05)。见表1。

2.2Irisin水平 血清Irisin水平依次为NC组>T2DM组>EDN组(P<0.05或0.01)。见表1。

2.3相关性分析 血清Irisin水平与HOMA-IR、FINS、FPG、HbA1c、UAlb/Cr、TNF-α、TGF-β1呈负相关(P<0.05或P<0.01)，与SOD、HDL、 PGC-1α呈正相关(P<0.01)。见表2。

表1 三组间临床、生化指标的比较

与NC组比较：1)P<0.05，2)P<0.01；与T2DM组比较：3)P<0.05，4)P<0.01；SBP：收缩压，DBP：舒张压，TG：三酰甘油，TC：总胆固醇

表2 血清Irisin水平与其他指标的相关分析

2.4EDN组治疗前后临床特征的变化 A组治疗后UAlb/Cr、TGF-β1、TNF-α较治疗前显著降低(P<0.05或P<0.01)；PGC-1α、SOD显著上升(P<0.05或0.01)；Irisin水平显著上升(P<0.05)。B组治疗后TNF-α、FPG显著降低(P<0.05或P<0.01)；SOD较治疗前显著上升(P<0.05)；两组治疗后TNF-α、TGF-β1、SOD、Irisin、PGC-1α水平差异显著(P<0.05)。见表3。

表3 两组治疗前后临床、生化指标比较

与治疗前比较:1)P<0.05，2)P<0.01；与B组比较:3)P<0.05

2.5多元线性逐步回归分析 在EDN患者中，以Irisin为因变量，以FPG、HbA1c、TNF-α、PGC-1α、HOMA-IR、SOD、UAlb/Cr等为自变量进行多元线性逐步回归分析，结果显示HbA1c、PGC-1α、UAlb/Cr与Irisin相关，回归方程Irisin=-1.801×HbA1c+6.123×PGC-1α-0.202×UAlb/Cr+19.278。见表4。

表4 Irisin水平影响因素的多元逐步回归分析

3 讨 论

研究发现随着慢性肾脏疾病分级的增加，血清Irisin水平逐渐降低，Irisin与Cr、BUN具有相关性〔3〕。而本研究发现EDN患者血清Irisin水平较T2DM及NC组低，Irisin与UAlb/Cr具有相关性，这与相关研究结果一致〔6〕。本研究还发现UAlb/Cr是Irisin的独立影响因素，这些提示低水平的Irisin参与了DN的发生。杨梅丽等〔2〕研究认为Irisin可能对肾脏发挥了保护作用，但确切机制不明。

PGC-1α在糖尿病肾病中发挥了重要的保护作用，可改善高糖诱导的肾脏线粒体功能障碍及系膜细胞、足突细胞受损〔7，8〕。已证实ALA能上调PGC-1α的表达〔9〕。而本研究也发现给予ALA治疗后PGC-1α水平上升。而Irisin受PGC-1α的调控，PGC-1α对Irisin的分泌发挥了重要的促进作用〔10，11〕。而本研究说明PGC-1α与Irisin关系密切，ALA通过PGC-1α增加了Irisin的水平，PGC-1α对糖尿病肾病的保护作用可能部分依赖Irisin。

氧化应激是糖尿病肾病发生的重要因素。ALA具有较强的抗氧化应激作用。已证实Irisin具有抗氧化应激的作用〔12〕，这一作用与抑制 PKC-β/NADPH氧化酶有关〔13〕。本研究说明Irisin与氧化应激关系密切。本研究与董闪闪等〔14〕结果一致。董闪闪等〔14〕认为ALA通过抗氧化应激减少了EDN患者的尿蛋白。推测ALA的抗氧化应激作用部分通过升高Irisin实现，从而发挥保护糖尿病肾病的作用。

TNF-α在糖尿病肾病发生中发挥了重要作用。ALA对TNF-α具有抑制作用〔15〕。本文发现给予ALA治疗后TNF-α水平下降。研究发现Irisin参与了炎症的调控，可下调TNF-α的表达，对TNF-α发挥抑制作用〔16，17〕。而本研究发现Irisin与TNF-α呈负相关，这也说明Irisin与TNF-α关系密切。可能ALA对TNF-α的抑制作用部分通过升高Irisin实现。

TGF-β1是糖尿病肾病发生的重要促进因素。ALA具有抑制TGF-β1的作用〔18〕。本研究发现给予ALA治疗后糖尿病肾病患者TGF-β1水平下降，Irisin与TGF-β1呈负相关。目前尚无Irisin与TGF-β1相关性的报道，Irisin与TGF-β1的确切关系、ALA是否通过Irisin对TGF-β1产生影响值得进一步研究。Irisin参与了糖代谢，有研究发现给予重组Irisin腹腔内注射可降低糖尿病大鼠血糖〔19〕。但是本研究发现Irisin水平上升，未出现显著的血糖变化，推测本研究中Irisin的变化程度尚不足以对血糖产生影响。

综上所述，糖尿病肾病患者血清Irisin水平降低，Irisin与PGC-1α、氧化应激、TNF-α、TGF-β1关系密切。ALA通过增加糖尿病肾病患者血清Irisin水平发挥了降低尿蛋白的作用。