廖伟祥

（广州市胸科医院，广东 广州 510180）

结核性脑膜炎（tuberculous meningitis，TBM）是由结核分枝杆菌所导致的脑膜非化脓细菌性炎性病变，有些患者并没有出现肺结核的症状。现今，辅助检查结核性脑膜炎，灵敏度和特异度不高。而结核性脑膜炎是一种重症结核，病死率高，出现后遗症的概率极高[1]。所以早期快速准确诊断结核性脑膜炎对于结核性脑膜炎患者的治疗及预后尤为关键。本文对研究血IGRAs在结核性脑膜炎早期诊断中的应用价值进行了探讨。

1 资料与方法

1.1 研究对象：TBM组45例，所有患者均未进行抗结核治疗；男性25例，女性20例，年龄13～68岁，依据临床症状、脑脊液生化和常规、细菌学、结核抗体、结核杆菌PCR检查、抗结核治疗有效而确诊。对照组49例，根据其出院诊断排除结核病的患者；男性32例，女性17例，年龄17～81岁。

1.2 方法：全部试验对象都在进行治疗之前，进行外周血抽取，并且血量是4 mL，之后行IGRAs和ATA阳性率检测。

1.2.1 血IGRAs是运用采购至英国Oxford企业的T-SPOT.TB试剂盒，基于试剂说明书及本科室SOP文件进行操作。运用4 mL外周静脉血注到真空肝素锂抗凝管中，并且马上进行混匀的操作，在4 h内进行外周血单个核细胞（PBMC）的分离操作，并且借助AIM培养液，将其调节到250万PBMC/mL，再倾倒至T-SPOT.TB试剂盒微孔板内，每例标本应该配备4个微孔板，并且添加AIM（空白）、阳性对照、抗原A（ESAT-6）及抗原B（CFP-10）。最后于5%CO：培养箱中培养16～20 h。第2天，将微孔板拿出，脱去PBS，添加碱性磷酸酶标记的抗1干扰素，在4 ℃的环境下进行培养，培养时间是2 h，再次脱去PBS，显色，晾干。计算每孔中斑点数量，结果判定：当阴性对照斑点数＜6，A或B抗原孔与其所得差≥6即为阳性；当阴性对照计数≥6，检测孔斑点数是2倍或2倍以上的阴性对照数值，即为阳性。

1.2.2 血ATA运用酶联免疫手段进行血浆结核抗体（血ATA）的测定，试剂盒生产商是北京万泰生物药业股份有限公司，基于说明书进行试验操作和结果判读。

1.2.3 运用SPSS19.0进行分析。运用Pearson Chi-Square（χ2）进行测定方式观察组和对照组阳性率的对比分析，运用Fisher确切概率法进行观察组阳性率的对比分析，运用McNemar's test进行组内两种测试手段所显示的阳性率对比分析。P＜0.05表示差异具备统计学价值。

2 结 果

两组研究对象进行治疗之前的血IGRAs、ATA诊断阳性率比较，见表1。由表1可知，研究组内使用ATA和IGRAs两组诊断方法结果存在显著性差异（χ2=15.401，P=0.001＜0.05）；对照组内使用ATA和IGRAs两组诊断方法结果存在显著性差异（χ2=33.800，P=0.001＜0.05）。两组ATA诊断方法无明显差异（χ2=0.068，P=0.794＞0.05），两组IGRAs诊断方法有明显差异（χ2=78.771，P=0.001＜0.05）。

表1 两组治疗前IGRAs与ATA诊断阳性率比较（%）

3 讨 论

结核性脑膜炎是一种严重的神经系统感染性疾病，若不能在第一时间进行诊治，就会使患者出现神经系统并发症，最终造成死亡或是导致严重残疾[2]。针对肺外结核而言，TBM的致残率及病死率都是不容忽视的[3]。TBM病患早期阶段中，其临床表现并不具备很强的典型性，误诊的事件常常发生。因此，早发现、早诊断、早治疗是挽救TBM患者生命的关键。但目前尚未有一种方法可完全解决TBM的早期诊断问题[4]。基于最新TBM标准，临床上诊断TBM的标准是运用镜检的方式，在脑脊液中发现抗酸杆菌、分离培养到结核杆菌，或是运用PCR的诊断手段，能够发现结核杆菌[5]。可是，脑脊液涂片中发现抗酸杆菌阳性率并不高，并且结核杆菌的培养周期非常长，因此早期诊断具备极大的复杂性。但是针对脑脊液常规以及生化检查来说，早期阶段中，细胞数相对较高，主要分布的是中性粒细胞，7～14 d后，淋巴细胞不断增多，并且脑脊液蛋白的含量也渐渐增加。而这时，一般性脑脊液常规检查就几乎不能对TBM及其他颅内感染进行鉴别。从影像学上分析，头部CT或MRI的方式，能够检测出TBM病患颅内的病变主要是渗出性，并且能够发现软脑膜强化的现象，后期存在阻塞性脑积水征象，但早期改变并无特征性。因而临床诊断需要结合免疫学和血清学方法。IGRAs是借助早期分泌ESAT-6及CFP-10当成是特异性抗原，对T淋巴细胞进行刺激，进而使其分泌γ-干扰素，分析ELISA检测γ-干扰素的浓度，进而分析结核感染的情况。本检测手段受性别、年龄、免疫状态、BCG等影响较小，但也是临床上敏感度最高的诊断手段之一。

综上所述，IGRAs诊断结核性脑膜炎的敏感度及特异度较高，是一种早期快速完成结核感染诊断的免疫学手段，其具备极大的便捷性，并且能够针对征象不明确、ATA诊断不典型、脑脊液涂片找抗酸杆菌阴性的结核性脑膜炎都有很高的诊断价值，有利于结核性脑膜炎早发现、早诊断、早治疗，降低病死率及致残率。