刘 佳 陈 波 施建莲 张荣平 杜帅帅 江宇凯 张 丽

(1. 昆明医科大学海源学院，云南 昆明 650101；2. 昆明医科大学科研实验中心，云南 昆明 650500;3. 昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室，云南 昆明 650500;4. 昆明医科大学生物医学工程中心，云南 昆明 650500；5. 昆明医科大学学报编辑部，云南 昆明 650500)

云南地理环境复杂，气候条件多样，素有 “植物王国” 的美誉。宾川县位于云南省大理州，地处云岭横断山脉边缘，金沙江南岸云贵高原西南部。宾川县橙子资源丰富，品种优良，尤其盛产宾川脐橙和宾川血橙。橙子不仅营养丰富，还具有解油腻、消积食、止渴、醒酒等多种功效[1]。橙皮中富含的精油，气味清新怡人，作为天然的食品添加剂与赋香剂，广泛应用于食品和化妆品中[2]。此外，橙皮精油对DPPH自由基表现出较强的清除作用，具有较强的抗氧化作用[3]，且对多种微生物有较强的抑菌效果[4]。

目前，对芸香科柑橘属甜橙和赣南脐橙精油的研究比较多[5-7]，但对宾川脐橙和血橙精油的研究较少。对宾川脐橙的研究仅有对其蔗糖转运基因的克隆和表达的分析：根据植物蔗糖转运蛋白 (SUTs) 基因的保守序列通过RT-PCR的方法从宾川脐橙cDNA文库中克隆到蔗糖转运蛋白基因并进行表达分析，并通过HPLC方法对其相关的生理生化指标进行测定，研究结果表明其果肉中蔗糖的含量显著高于果皮[8]。本研究对云南宾川脐橙和血橙精油的化学成分进行了分析，以期为云南宾川脐橙和血橙的开发与利用提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

云南宾川脐橙及血橙样品 (2016年12月购于宾川脐橙及血橙种植示范基地)；挥发油测定器；恒温电热套；乙醚、无水硫酸钠 (分析纯，国药集团化学试剂有限公司)；CLARUS600GC-MS型气相色谱-质谱联用仪 (美国Perkin Elmer公司)。

1.2 实验方法

1.2.1精油的提取

分别取宾川脐橙、宾川血橙果皮1 000 g，分别加于圆底烧瓶中，加入适量蒸馏水，连接上挥发油测定器与球形冷凝管，以恒温电热套加热，控制电热套电压为200 V，温度控制在100～110 ℃之间，水蒸气蒸馏法连续提取8 h。挥发油测定器收集精油，并用10 mL乙醚冲洗精油测量处，将提取液转移到分液漏斗中，摇匀后静置分层，收集乙醚层，加入无水硫酸钠干燥，低温回收乙醚后，得到黄色透明液体，即为脐橙精油和血橙精油，用作GC/MS分析[9]。

1.2.2精油成分的分析

色谱条件：毛细管柱DB-5MS (30 m × 0.25 mm × 0.25 μm)；进样口温度为250 ℃；载气：高纯氦 (纯度 ≥ 99.999%)，流速1.0 mL/min；分流进样，进样量为1 μL，分流比30∶1；程序升温：初始温度50 ℃，保持5 min，然后每秒2 ℃升至80 ℃，再每秒3 ℃升至230 ℃，保持16 min，最后每秒12 ℃升至250 ℃，保持20 min。

质谱条件：电离方式EI+；离子化电压70 eV；扫描范围35～450 amu；离子源温度230 ℃；传输线温度260 ℃；WILEY、NIST08谱库进行检索。

2 结果与分析

2.1 宾川脐橙与血橙精油产率

宾川脐橙精油6.5 mL，产率为0.65% (精油产率=精油体积/橙皮质量 × 100%)；宾川血橙精油6.1 mL，产率为0.61%。宾川脐橙出油率略高于宾川血橙。

2.2 宾川脐橙与血橙精油成分分析

按照GC/MS条件获得2个精油样品的总离子流色谱，将总离子流色谱图的结果与计算机质谱库匹配，再根据人工解析确定精油样品化学组分的名称，采用峰面积归一法计算出各组分含量 (见表1)[10]。

表1 宾川脐橙和血橙精油成分分析Table 1 Composition analysis of essential oil from Bingchuan navel orange and blood orange

由表1可知，从宾川脐橙精油中鉴别出10种化学成分，而宾川血橙中鉴别出5种化学成分，且宾川血橙中含有的5种化学成分均存在于宾川脐橙中。宾川脐橙和宾川血橙中的2, 6, 6-三甲基二环庚烯的含量分别为0.124%和0.144%，月桂烯含量分别为0.847%和0.551%，柠檬烯含量分别为97.067%和98.397%，3, 7-二甲基-1, 6-辛二烯-3-醇-2-氨基苯甲酸酯含量分别为0.837%和0.662%，癸醛含量分别为0.129%和0.247%。宾川脐橙和血橙同属芸香科柑橘属，这可能是2种精油共有的5种成分的含量差异不大的原因。此外，宾川脐橙精油中还含有5种宾川血橙所没有的化学成分，即：辛醛、(E)-3, 7-二甲基-1, 3, 6-辛三烯、4-甲基-1-(1-甲基乙基)-3-环己烷-1-醇、α-松油醇、1-异丙基-7-甲基-4-亚甲基-1, 2, 3, 4, 4α, 5, 6, 8α-八氢萘。

3 结论与讨论

宾川脐橙和血橙精油主要成分均为柠檬烯。柠檬烯具有令人舒适的柠檬香气，不仅可以有效去除油垢，还具有抗菌、抗氧化、抗肿瘤、降血糖等多种药理作用[11-14]。以柠檬烯为主要成分的市售药品柠檬烯胶囊，可以用于治疗胆囊炎、胆管炎、胆结石和胆道术后综合征[15]。柠檬烯不仅具有多种药理活性，而且具有较高的安全性。用途广泛的δ-柠檬烯已被美国食品医药管理局 (FDA) 列为公认安全物质 (GRAS)。因此，富含柠檬烯的宾川脐橙和血橙是一种十分具有发展潜力的药用资源。

宾川脐橙含有的α-松油醇，是芸香科柑橘属大部分植物精油所没有的[16]。α-松油醇广泛应用于油墨、化工、轻工、医药和电讯工业中[17]。例如：用作印制铁皮或玻璃器皿上彩的优良溶剂，配制香皂或化妆品，配制柠檬、桃子、树莓、樱桃等香精[18]。因此，这不仅为宾川脐橙精油和血橙精油的鉴别提供参考，也为宾川脐橙精油的利用提供了新的思路。

宾川脐橙与血橙源于高原特色农业的绿色生态力释放出的巨大 “红利”。但橙子取汁后的橙皮除少量用于医药工业外，大部分被丢弃，橙皮加工率仅10%左右。发展橙皮加工产业将大大提高产品附加值，推动贫困地区脱贫致富。提升绿色农产品的药用价值和产业发展，对云南发展高原特色现代农业产业，走产出绿色高效、环境友好的现代农业发展道路具有重要意义。

[1] 丁晓波, 张华, 刘世尧, 等. 柑橘果品营养学研究现状[J]. 园艺学报, 2012, 39(9): 1687-1702.

[2] 王馥, 赵丽平. 橙皮香精油的提取与应用研究[J]. 科技创新导报, 2011(27): 77-77.

[3] 张娟, 陈海燕, 曹艳平. 赣南脐橙皮精油的提取、成分分析及抗氧化性研究[J]. 食品科技, 2016(12): 220-224.

[4] 江慧, 陈英海. 橙皮精油提取工艺及抑菌性能的研究[J]. 化学工程与装备, 2016(9): 23-26.

[5] 陈红丽, 郭青云, 钟八莲, 等. 甜橙精油分子蒸馏组分的成分分析及其抗菌活性研究[J]. 保鲜与加工, 2017(2): 95-100.

[6] 吴均, 杨德莹, 李抒桐, 等. 甜橙精油的化学成分、抑菌和抗氧化活性研究[J]. 食品工业科技, 2016, 37(14): 148-153.

[7] 张娟, 陈海燕, 曹艳平. 赣南脐橙皮精油的提取、成分分析及抗氧化性研究[J]. 食品科技, 2016(12): 220-224.

[8] 乔璞, 陈秭君, 靳子安, 等. 云南宾川脐橙蔗糖转运基因的克隆和表达分析[J]. 昆明理工大学学报 (自然科学版), 2015, 40(1): 74-78.

[9] 殷智超, 周海文, 闫秋婷, 等. 橙皮挥发油的提取及成分分析[J]. 皖西学院学报, 2014, 30(5): 107-108.

[10] 李军集, 孟忠磊, 黎贵卿. 广西白玉兰花和叶片挥发油化学成分的GC/MS分析[J]. 西南林业大学学报, 2012, 32(6): 102-106.

[11] 曹甜, 刘晓艳, 丁心, 等. 柠檬烯的研究与应用进展[J]. 农产品加工, 2017(8): 51-54.

[12] 郝静梅, 盛冉, 孙志高, 等. 柠檬烯抗菌性研究进展[J]. 食品与发酵工业, 2017, 43(2): 274-278.

[13] 黄巧娟, 孙志高, 龙勇, 等. D-柠檬烯抗癌机制的研究进展[J]. 食品科学, 2015, 36(7): 240-244.

[14] 靖丽. 柑橘精油的代谢图谱及其主要成分δ-柠檬烯对糖脂代谢紊乱的防治作用研究[D]. 重庆: 西南大学, 2014.

[15] 马丹, 潘娜. 旋光度法测定柠檬烯胶囊中柠檬烯的含量[J]. 农业科技与信息, 2016(25): 44-45.

[16] Gad H A, El-Ahmady S H, Abou-Shoer M I, et al. Application of chemometrics in authentication of herbal medicines: a review[J]. Phytochemical Analysis, 2013, 24(1): 1-24.

[17] Tranchida P Q, Bonaccorsi I, Dugo P, et al. Analysis ofCitrus, essential oils: state of the art and future perspectives. A review[J]. Flavour & Fragrance Journal, 2012, 27(2): 98-123.

[18] Flamini G, Tebano M, Cioni P L. Volatiles emission patterns of different plant organs and pollen ofCitruslimon[J]. Analytica Chimica Acta, 2007, 589(1): 120-124.