闫新玲 王玻玮 古丽那尔·阿布拉江 马遇庆1，（通讯作者）

（1新疆医科大学基础医学院病理教研室 新疆 乌鲁木齐 830054）

（2乌鲁木齐市中医医院病理科 新疆 乌鲁木齐 830000）

（3新疆医科大学第一附属医院病理科 新疆 乌鲁木齐 830054）

我国每年死于食管癌的人数在15万以上[1]，且呈逐年上升趋势。新疆是哈萨克族聚居地，其食管癌发病率明显高于其他民族[2]。近年研究表明Wnt/β-catenin信号通路在肿瘤细胞内与生长分化有关，是信号转导障碍导致增值失控的重要因素[3]。有研究证实CK2在Wnt通路中可发挥正调节作用[4]。SFRP2在食管鳞癌中发挥抑癌基因的作用，其表观遗传沉默导致其抑癌作用丧失或削弱，从而可能影响肿瘤的发生发展[5]。但关于CK2和SFRP2在ESCC及二者在新疆两民族的研究很少，应用免疫组织化学法进行检测，现报告如下。

1.资料和方法

1.1 一般资料

选取2007年2月—2014年1月在新疆医科大学第一附属医院经手术病理证实的原发食管癌患者165例，术前均行钡餐、局部活检等确诊原发食管癌，临床表现为不同程度的进行性吞咽困难，并伴有营养不良，消瘦等症状。男性111例，女性54例，年龄：39～80岁，平均（53±6）岁。

1.2 检测方法

1.2.1 免疫组织化学染色法 将组织玻片置于65℃烤箱中，2h后脱蜡水化，用PBS充分冲洗，孵育15分钟，再次冲洗，用枸缘酸盐溶浸润玻片和切片架高温加热，冷却后PBS冲洗3遍共10分钟；加入1∶200的CK2和SFRP2一抗，置于4℃的环境下过夜；PBS冲洗，滴加二抗，孵育90分钟，DNA显色，常规脱水封片。

1.2.2 表达程度判定标准 免疫组化结果由两位病理医生共同判定。双盲法在每张切片随机选取10个高倍视野从细胞的染色强度和阳性细胞数进行判读。3分为棕褐色，2分为棕黄色，1分为淡黄色，0分为无着色。阳性细胞数：4分为≥76%，3分为51%～75%，2分为11%～50%，1分为1%～10%。将两项评分相乘得出最终结果：强阳性（+++）≥5分，中阳性（++）4分，弱阳性（+）3分，阴性（-）＜3分。

1.3 统计学处理

采用SPSS17.0统计软件进行数据分析，进行Wilcoxon秩和检验，分析CK2及SFRP2表达与新疆两民族ESCC患者的临床参数的差异，以计数资料对比，采用卡方检验以P＜0.05为差异有统计学意义。

2.结果

2.1 两民族ESCC的临床病理特征

该实验以患者的年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤大小、分化程度、肿瘤类型、浸润深度、淋巴结转移情况，血管和神经的侵犯等状况进行免疫组化法对照分析研究（表略）。

2.2 检测结果

2.2.1 CK2的表达及临床参数间的关系 CK2阳性表达定位于ESCC细胞浆和细胞核，镜下呈褐色或黄褐色颗粒分布。CK2在165例ECSS中61.2%阳性表达；癌旁组织34.5%阳性表达,癌组织中的表达明显高于癌旁；两者阳性率之间的比较有统计学差异（P＜0.01），见表1 CK2的表达与浸润深度密切相关（P＜0.05），与其他临床病理参数无统计学意义（P＞0.05）CK2在ESCC中阳性表达哈萨克族56例，汉族50例,两者比较差异没有统计学意义（P=0.111）（表略）

表1 CK2在食管癌组织和癌旁正常组织中的表达

图1 CK2的表达（免疫组化*400）

2.2.2 SFRP2的表达及临床参数间的关系 （表2） SFRP2阳性表达定位于ESCC细胞浆和细胞核，镜下呈褐色或黄褐色颗粒分布。SFRP2在165例癌旁组织中72.1%阳性表达；ECSS中27.2%阳性表达。SFRP2在癌旁组织中的表达明显高于ESCC，两者阳性率之间的比较有统计学差异（P＜0.01）。哈萨克族56例，汉族50例，两民族阳性表达率比较其差异没有统计学意义（P=0.111），FRP2与临床参数无明确相关性（P＞0.05）（表略）SFRP2在ESCC的表达不存在民族差异性（表略）

表2 SFRP2在食管癌组织和癌旁组织中的表达

图2 SFRP2在食管癌组织和癌旁组织中的表达（免疫组化*100）

2.3 CK2和SFRP2相关性

表3 CK2与SFRP2的表达与食管鳞状细胞癌的相关性

经统计学χ2分析发现CK2在食管癌组织中的表达与SFRP2的表达之间无明确相关性（P=0.474），即差异无统计学意义。

3.讨论

近些年，许多研究表明Wnt经典通路在ESCC的发生、发展中发挥及其重要的作用，其中CK2及SFRP2为Wnt经典通路中的关键差异蛋白[6]。本研究中我们通过免疫组化实验发现发现：（1）CK2的阳性表达率在ESCC组织中明显高于癌旁组织；（2）在哈萨克族ESCC患者中，CK2的表达与浸润深度密切相关，但与其他临床病理参数无关；（3）SFRP2是一种ESCC相关差异蛋白，与其发生呈负相关，其为一种抑癌基因。

CK2、SFRP2在ESCC与癌旁组织中的阳性表达存在统计学差异，提示两者可能为相关差异蛋白，推测它们可能可以作为ESCC的诊断、治疗标记物。然而CK2及SFRP2在ESCC中的相关研究尚未有太大进展，故进一步深入研究CK2及SFRP2在ESCC发生与进展中的作用机制，发现ESCC相关生物学标记物对临床诊断与治疗具有重要意义。

[1]韩立波，孙冬梅，丰立忠，等.蛋白激酶CK2β在食管癌组织中的表达及临床意义[J].中国肿瘤临床与康复，2013，50(10)18-20.

[2]王立芝等SFRP-2对人肝细胞株HepG1生物学行为的影响.重庆医科大学，2007，25（2）220-223.

[3]路喆鑫，连锋.分泌型卷曲相关蛋白2在心肌再生治疗中的作用，中国胸心血管外科临床杂，2012，19（4）220-222.

[4]王玉，唐海珍，毕芳芳，杨清，张淑兰.蛋白激酶CK2α在人子宫内膜腺癌中的表达及意义[J].生物医学工程与临床，2012，65(1)99-102.

[5]齐健，朱尤庆，罗峻，等.结直肠肿瘤中SFRP基因的甲基化及表达调控[J].中华肿瘤杂志，2007，29(11):842-845.

[6]赵成海，卜献民，张宁，等.Wnt拮抗因子SFRP2在胃癌中的甲基化和异常表达[J].中国病理生理杂志，2009，25(8):1617-1620.