卜媛媛，金 鹏

（淮安市食品药品检验所，江苏 淮安 223001）

盐酸贝那普利片仿制药与原研药的溶出度一致性评价

卜媛媛，金 鹏

（淮安市食品药品检验所，江苏 淮安 223001）

目的比较3种国产盐酸贝那普利片仿制药与原研药的体外溶出度，对溶出曲线进行比较评价一致性。方法采用桨法，溶出介质体积500 mL，转速50 rpm，分别以水、pH1.2盐酸溶液、pH4.5磷酸盐缓冲液、pH6.8磷酸盐缓冲液为溶出介质测定溶出度，HPLC法测定含量。通过计算相似因子评价溶出曲线相似性。结果仅仿制药B 与参比制剂D的溶出度一致性相似，A和C与参比制剂溶出一致性不一致。结论部分仿制药与原研制剂溶出一致性较差，制剂工艺有待改善。

盐酸贝那普利；仿制药；溶出曲线；一致性评价

盐酸贝那普利是世卫组织推荐的一线抗高血压药，是血管紧张素转化酶抑制剂类的抗高血压药中安全性高、疗效佳、不良反应少的手性药物，广泛应用于临床[1]。国内批准的化学药物绝大部分都是仿制药，这些药品质量参差不齐，部分与国际先进水平差距较大。2016年3月国家食药总局发布一致性评价指导原则，目的是提高仿制药整体水平，达到与原研产品相同的质量水准，提高人民群众用药水平[2]。本文对盐酸贝那普利片的3种仿制药进行溶出度的测定，参照总局发布的《普通口服固体制剂溶出曲线测定与比较指导原则》[3]与原研药进行溶出曲线相似性比较，对盐酸贝那普利进行仿制药与原研药的一致性评价。

1 仪器与试药

1.1 仪器

电子天平（梅特勒XSDU205型）；智能溶出试验仪（天大天发ZRS-8G）；高效液相色谱仪（戴安U3000）。

1.2 试药

盐酸贝那普利对照品（中国药品生物制品检定研究院；批号：100768-201102； HPLC法测定含量：99.5%）；磷酸二氢钾、氯化钾、氢氧化钠、盐酸、高氯酸钠为国产分析纯；甲醇为国产色谱纯；水为纯化水。参比制剂为盐酸贝那普利片（生产企业：D，批号：x2276、x2425）。受试制剂为盐酸贝那普利片（生产企业：A，批号：160507；生产企业：B，批号：161001；生产企业：C，批号：FB20160901）。

2 方 法

2.1 溶出度试验条件

参照参比制剂标准规定溶出度检查方法[4]：溶出介质500 mL，浆法，50转/分钟，取样时间点分别为5、10、15、20、30和40分钟，同时考察试样在水、pH1.2盐酸溶液（盐酸7.65 mL→1000 mL）、pH4.5磷酸盐缓冲液（0.2 mol/L磷酸二氢钾溶液250 mL→1000 mL）、pH6.8磷酸盐缓冲液（0.2 mol/L磷酸二氢钾溶液250 mL+0.2 mol/L氢氧化钠溶液112 mL→1000 mL）等4种溶出介质中的溶出曲线。

2.2 溶出度测定方法及验证

参照参比制剂含量测定高效液相法[4]。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以氯化钾缓冲液（每1000 mL中含0.010 mol盐酸和0.090 mol氯化钾，pH值2.06）-甲醇-水（17∶58：25）为混合溶液，每1000 mL混合溶液中加612 mg高氯酸钠为流动相；检测波长：240 nm。按3.1项下试验条件，溶液过0.45 μm滤膜，取续滤液作为供试液；另称取盐酸贝那普利对照品，用溶出介质溶解制成0.01 mg/mL的溶液作为对照液。精密量取上述供试液与对照液各20 μL注入液相色谱仪，按外标法以峰面积计算出每片累积溶出量。

2.2.1 系统适用性试验

取参比制剂供试液各20 μL注入高效液相色谱仪，记录色谱图见图1，理论板数均大于8000，盐酸贝那普利峰与相邻杂质峰的分离度也符合要求。

a 供试品溶液色谱图（溶剂为水）

b 供试品溶液色谱图（溶剂为pH1.2盐酸溶液）

c 供试品溶液色谱图（溶剂为pH4.5磷酸盐缓冲液）

图1 供试品溶液色谱图

2.2.2 线性范围

精密称取盐酸贝那普利对照品52.00 mg，加水溶解并稀释至500 mL，作为对照品贮备液。精密量取对照品贮备液0.2 mL、0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、5.0 mL分别置于20 mL的量瓶中，用溶出介质定容并摇匀。分别取20μl注入高效液相色谱仪，测定峰面积，并以峰面积为纵坐标，以浓度为横坐标，进行线性回归，结果见表1，结果表明4种不同溶出介质中，盐酸贝那普利在1.035μg/mL～25.870 μg/mL范围内线性关系均良好。

表1 线性关系考察

2.2.3 稳定性

分别取4种溶出介质中30分钟时的供试品溶液（厂家：B，批号：161001），在放置于HPLC进样盘的情况下，在制备后的0、2、6、14、20、24小时测定含量。结果表明：供试液24小时内稳定。

2.2.4 准确度[5]

取参比制剂样品细粉0.4438 g（批号：x2276，含量：99.12%，平均片重：0.1868 g）置50 mL量瓶中，用水稀释成浓度为0.4710 mg/mL的溶液，摇匀，滤过，作为样品溶液，精密称取对照品52.00 mg，置500 mL的量瓶中，以水作为溶剂稀释至刻度，作为对照液。精密量取1 mL样品溶液9份置100 mL量瓶中，分别加入对照液3 mL、5 mL、7 mL各3份，用水定容至刻度，作为溶出介质为水的准确度试验供试液。同法配置其他三种溶出介质的准确度试验供试液。精密量取供试液和2.2项下的对照液各20 μL注入高效液相色谱仪，按外标法以峰面积计算。水作为介质时平均回收率99.07%，RSD为1.5%；pH1.2盐酸溶液为介质时平均回收率99.37%，RSD为1.1%；pH4.5磷酸盐缓冲液为介质时平均回收率99.20%，RSD为0.92%；pH6.8磷酸盐缓冲液为介质时平均回收率100.14%，RSD为1.2%；结果表明：方法准确度良好。

3 结果与讨论

3.1 参比制剂与受试制剂溶出曲线比较

按照2.1～2.2项下试验方法，测定参比制剂与受试制剂的溶出曲线。见图2。

图2 不同介质中的溶出曲线比较

从图2结果可以看出：

（1）15分钟内，参比制剂在各溶出介质中平均溶出量均达到85%以上，B厂家样品在各溶出介质中平均溶出量均达到85%以上，可以认为溶出曲线相似。

（2）A厂家样品在pH1.2盐酸溶液、pH4.5磷酸盐缓冲液、pH6.8磷酸盐缓冲液3种溶出介质中15分钟内平均溶出量未达到85%，C厂家样品在各溶出介质中15分钟内平均溶出量未达到85%，则使用相似因子f2法[6-7]评价与参比制剂的相似性。计算公式如下：

公式中：Tt为t时间受试制剂的累积溶出百分率；Rt为t时间参比制剂的累积溶出百分率；n为取样时间点个数。当f2在50～100之间时，表明两制剂溶出度相似或等同。

参照一致性评价指导原则，计算f2因子时，两制剂所取时间点须一致且不少于3个，溶出率在85%以上的时间点不应多于1个。本实验选用5、10、15、20、30和40分钟一共6个点，经对试验的数据进行分析，选用了5、10、15和20分钟一共4个点来计算f2因子。见表2。

表2 f2因子计算结果

3.2 讨论

由以上结果可得，B厂家的样品与参比制剂在4种溶出介质中曲线均相似，可以判定为溶出度一致性相似；C厂家样品与参比制剂在4种溶出介质中曲线均不相似，可以判定为溶出度一致性不相似；A厂家样品仅在水中与参比制剂溶出曲线相似，可判定为与参比制剂溶出度一致性基本不相似。整体来说，国内的仿制药质量差异比较大，与参比制剂相比较，释药速度较慢，可能是由于辅料选择和制剂工艺等有所差别。国家开展仿制药一致性评价工作，可以促使企业对药品质量更为重视，提高合理用药水平，保障公众用药质量。

[1] 金 鹏,刘 艳,卜媛媛.不同厂家盐酸贝那普利片溶出度考察[J].中国药事,2015,29(2):183-188

[2] 余珊珊,张正付,李正奇.仿制药一致性评价现状调查及对策[J].中国临床药理学与治疗学,2015,20(1):118-120.

[3] 国家食品药品监督管理局.普通口服固体制剂溶出度试验技术指导原则[ED/OL].2015.

[4] 国家食品药品监督管理局.《国家药品标准》新药转正标准第四十五册[S].WS1-(X-347),2003Z:86-87

[5] 国家药典委员会.《中华人民共和国药典》(2015年版四部)[S].通则:374-377

[6] 张启明,谢沐风,宁保明,等.采用多条溶出曲线评价口服固体制剂的内在质量[J].中国医药工业杂志,2009,40(12):946-950,955.

[7] 谢沐风.溶出曲线相似性的评价方法[J].中国医药工业杂志,2009,40(4):308-310

R927.1

B

ISSN.2095-8242.2017.055.10828.03

卜媛媛（1983-），女，江苏涟水人，主管药师，硕士研究生，研究方法：药学方向

本文编辑：吴玲丽