弓素梅，郭红斌

(1.河北农业大学科教兴农中心，河北保定071001 ； 2.河北农业大学动物医学院，河北保定071000)

中药产后康防治奶牛产后瘫对免疫机能的影响

弓素梅1，郭红斌2

(1.河北农业大学科教兴农中心，河北保定071001 ； 2.河北农业大学动物医学院，河北保定071000)

为了研究“产后康”防治奶牛产后瘫对免疫机能的影响，选择了平均胎次为3，预产期为产前5 d的中国荷斯坦奶牛20头，分为健康组，病理组，治疗组和预防组4组，用试剂盒测定了血清中 IgM，IgA，IgG，IL-1β和TNF-α含量变化。结果表明,应用“产后康 ”防治奶牛产后瘫，奶牛血清中IgA和IgG浓度逐渐升高，IgM浓度变化不明显，可显著降低血清中 IL-1β 和 TNF-α 水平。结论：“产后康 ”用于防治奶牛产后瘫具有提高血清IgA和IgG浓度，下调血清 IL-1β 和 TNF-α 的作用，在产后瘫反应过程中发挥着重要免疫调节作用。

中药 ； 产后康 ； 奶牛 ； 产后瘫 ； 免疫机能

产后瘫是奶牛养殖中的常见病，其病因较多而复杂，主要由于母牛妊娠期间或分娩前后饲养管理不当，营养不全而导致，患产后瘫的奶牛可使生产年限缩短四年左右，如得不到及时有效的治疗，将导致机体多种功能减弱，生命活动严重障碍，甚至死亡，给养殖者造成极大损失[1-3]。奶牛分娩后，机体从妊娠和分娩应激中逐渐转入高产应激状态，卵巢上既无黄体又无卵泡，免疫系统暂时失去了性腺激素的调节，加上乳房开始泌乳，机体丢失大量免疫细胞和免疫球蛋白，可见，产后奶牛其天然的和获得性的防御能力都被削弱[4]。在生产实践中，通过辨证，应用相应中药方剂治疗奶牛产后瘫，能够发挥明显的治疗效果。本试验是在临床应用疗效确切的基础上，通过“产后康”防治奶牛产后瘫，探讨其对免疫机能的影响，为中药防治奶牛产后瘫探明机理。

1 材料与方法

1.1 试验动物 选择河北省沽源县九连城盛丰牧业有限责任公司，平均胎次为3，预产期为产前5 d的中国荷斯坦奶牛20头。

1.2 药品及试剂 “产后康 ”(益母生化散)，购自河北商宇有限责任公司 ，批号:兽药字(2011)0305951480。

免疫球蛋白M (IgM)，免疫球蛋白A(IgA)，免疫球蛋白G(IgG)，白细胞介素1β(IL-1β)ELISA，肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒，均为南京森贝伽生物科技有限公司。

1.3 试验方法

1.3.1 分组 分为4组，每组5头。

健康组：产前5 d，机能状态、生产性能良好，无任何临床症状。

病理组：有患病临床症状(反刍停止，食欲减退，体温正常或略有升高，后肢僵硬，站着时频繁倒腿，走路步态不稳，有的患牛两后肢向后移位而呈现出犬坐姿势)。

治疗组：产前5 d，有患病临床症状，治疗时间为产前1 d，产前2 d，产后1～7 d，每天早晚各灌药1次，每次2袋，每袋350 g。

预防组：无临床症状，预防用药时间为产前1 d，产前2 d，产后1～7 d，每天早晚各灌药1次，每次1袋。

1.3.2 血清的采集 按组分别于产前1天，产后第1天，第3天，第5天和第7天早晨空腹颈静脉采血10 mL，室温下静置，自然析出血清，于离心机3 000 r/min离心10 min，分离血清标号后，-20 ℃冰箱冷冻保存。1.3.3 项目的测定及方法 酶联免疫测定法(ELISA)试剂盒检测血清中 IgM，IgA，IgG，IL-1β和TNF-α。

1.4 数据处理

采用 Excel 2003 进行数据统计，应用SAS-V8 软件进行方差分析 。

2 结果与分析

2.1 血清IgM 含量 见表1。由表1可见，血清中IgM含量，病理组在各天与健康组和预防组比较，差异显著(P<0.05)，与治疗组比较，在产前1 d和产后第1、3、5天，差异不显著(P>0.05)，在产后第7天，差异显著(P<0.05)；预防组和健康组之间比较差异不显著(P>0.05)。可见，“产后康”防治奶牛产后瘫对IgM含量影响不太明显。

2.2 血清IgA的含量 见表2。由表2可见，血清中IgA含量，病理组产前和产后均低于健康组和预防组，且在各天中与健康组和预防组比较，差异极显著(P<0.01)；治疗组与健康组比较，在产前1天，产后第1天差异极显著(P<0.01)，在产后第3、5、7天，差异不显著(P>0.05)，与预防组比较，在第1天差异极显著(P<0.01)，在产后第3、5、7天，差异显著(P<0.05)；预防组与健康组比较，在产前1天，产后第1天差异不显著(P>0.05)，在产后第3、5、7天，差异显著(P<0.05)。可见，中药“产后康”预防和治疗奶牛产后瘫，可以升高血清中的IgA，发挥防治效果。

表1 血清IgM含量 (mg/mL)

注：同列数据肩标大小写字母均不相同表示差异极显著(P<0.01)，大写字母相同小写字母不同表示差异显著(P<0.05)，字母完全相同表示差异不显著(P>0.05)，下表同

表2 血清IgA含量 (μg/mL)

表3 血清IgG含量 (mg/mL)

2.3 血清IgG测定结果 见表3。由表3可见，血清中IgG含量，病理组产前和产后均低于健康组和预防组，且在各天中与健康组和预防组比较，差异极显著(P<0.01)；预防组与健康组比较，在产前1 d，产后第1、3天差异不显著(P>0.05)，在产后第5,7天，差异显著(P<0.05)；治疗组与健康组比较，在产前1 d，产后第1、3天差异极显著(P<0.01)，在产后第5、7天，差异不显著(P>0.05)，与预防组比较，在产前第1天和产后第1、3天，差异极显著(P<0.01)，在产后第5、7天，差异显著(P<0.05)。可见,“产后康”治疗产后瘫奶牛从产后第5天开始可以升高血清中IgG含量，并且应用“产后康”预防产后瘫奶牛，血清中IgG含量高于健康组，说明 “产后康”防治奶牛产后瘫能够升高IgG，增加机体的免疫力。

2.4 血清IL-1β含量 见表4。由表4可见，血清中IL-1β含量，病理组在各天与健康组、预防组比较，差异极显著(P<0.01)；预防组与健康组比较，各天均差异不显著(P>0.05)，与治疗组比较，在产前1 d，产后第1、3天，差异极显著(P<0.01)，在产后第5、7天，差异不显著(P>0.05))；治疗组与病理组比较，在产前1天，差异不显著(P>0.05)，在产后第1、3天，差异显著(P<0.05)，在产后第5、7天，差异极显著(P<0.01)。

表4 血清IL-1β含量 (ng/L)

表5 血清TNF-α含量 (ng/L)

2.5 血清TNF-α含量 见表5。由表5可见，血清中TNF-α含量，病理组比健康组和预防组均高，且差异极显著(P<0.01)；预防组和健康组比较，在各天差异均不显著(P>0.05)，与治疗组比较，在产前1 d，产后第1、3天，差异极显著(P<0.01)，在产后第5、7天，差异不显著(P>0.05))；治疗组与病理组比较，在产前1 d，差异不显著(P>0.05)，在产后第1、3天，差异显著(P<0.05)，在产后第5、7天，差异极显著(P<0.01)。

3 讨论

“产后康 ”(益母生化散)由益母草、当归、 川芎、桃仁、炮干姜、炙甘草组成，主治奶牛产生恶露不行，血瘀腹痛，胎衣滞留，产后瘫痪[5]。据现代临床及动物试验证明，方中益母草含有多种微量元素，硒具有增强免疫细胞活力及提高机体防御疾病功能体系之作用；当归中的当归多糖对单核-巨噬细胞系统有明显的刺激作用，对免疫功能低下的机体也有免疫调节和恢复作用。白术有影响非特异性免疫功能，增强巨噬细胞活力的作用，影响特异性免疫功能，促进细胞免疫功能，增强体液免疫的功能，能使血清IgG含量显著上升[6]。

IgM在体内产生时间早，持续时间短，参与了机体免疫的第一道防御过程。IgA 其分子上含有多个抗原结合部位，是一种高效能的抗体，在免疫调节方面也起到重要作用。IgG 不仅是动物血清中含量最丰富的免疫球蛋白，而且持续时间长，是动物机体抗感染免疫和血清学诊断的主要抗体[7]。试验中，应用“产后康 ”防治产后瘫，奶牛血清中IgA和IgG浓度逐渐升高，且极显著高于患病奶牛组，说明“产后康 ”用于防治奶牛产后瘫可以提高血清中IgA和IgG浓度，提高机体的免疫力；“产后康 ”用于防治奶牛产后瘫血清中IgM浓度变化不明显，可能是由于IgM 在体内持续时间短，其机理尚待进一步研究。

细胞因子是免疫细胞分泌的一类具有调节活性的低分子量蛋白物质的统称，其主要功能是介导免疫细胞间的相互作用。IL-1β 和 TNF-α 属于前炎症细胞因子，它们参与许多炎症等相关的免疫过程中[8]。本研究中“产后康”防治奶牛产后瘫可以显著降低血清中 IL-1β 和 TNF-α 水平，说明“产后康 ”具有下调患有产后瘫奶牛血清 IL-1β 和 TNF-α 的作用，在产后瘫反应过程中发挥着重要免疫调节作用。

综上，应用中药“产后康 ”防治奶牛产后瘫，能够提高机体中的IgA和IgG浓度，从而提高机体的免疫力，能够降低血清中 IL-1β 和 TNF-α 水平，减少骨质吸收和骨质破坏作用，调节机体的免疫功能，发挥良好的防治效果。

[1] 王素萍．奶牛产后瘫病因分析及预防措施[J]．中国畜牧兽医文摘，2014,30(12):83.

[2] 张海芹.奶牛产后瘫痪的综合防治[J].中国畜禽种业，2015,11(12):108-110.

[3] 牛长营,杨祎,张玉琴.浅谈奶牛产后瘫的防治[J]．河南畜牧兽医,2001,22(1):28.

[4] 黄群山，戴承胜，刘宇．八珍汤对乳牛产后免疫状态的影响[J].中国兽医科技,2005，35(11):912-916．

[5] 黄修奇. 中西医结合治疗牛产后瘫痪[J].中兽医学杂志,2003(1):6-7.

[6] 张玉军.益母生化散对奶牛产后疾病的治疗[J].兽医导刊，2003,4:71.

[7] 王连江,陈燕军,魏永刚,等.围产期奶牛免疫力的动态变化[J].中国乳业,2006(11):38-40.

[8] 吕建存,刘荣欣.四君子散与益母生化散对围产期奶牛血浆IL-2、IFN-γ和TNF-α的影响[J]. 中国兽医杂志,2011,47(6):45-46.

2016-07-07

弓素梅(1972-)，女，副教授，硕士，从事中兽医学科研与教学工作，E-mail：hbndgsmgsm@126.com

S815.2

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0529-6005(2017)04-0059-03