祁洁，徐颖磊，梁文怡，费朵，乌昕儿，金建昌，杜琪珍*，许勇泉，高颖

1. 浙江农林大学农业与食品科学学院，浙江 临安 311300；2. 浙江树人大学生物与环境工程学院，浙江 杭州310015；3. 中国农业科学院茶叶研究所，浙江 杭州 310008

EGCG纳米载体制备技术及其对EGCG活性影响的研究进展

祁洁1，徐颖磊1，梁文怡1，费朵1，乌昕儿1，金建昌2，杜琪珍1*，许勇泉3，高颖3

1. 浙江农林大学农业与食品科学学院，浙江 临安 311300；2. 浙江树人大学生物与环境工程学院，浙江 杭州310015；3. 中国农业科学院茶叶研究所，浙江 杭州 310008

表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）是绿茶中最重要的生物活性成分，在肿瘤形成的各个阶段都有抑癌活性。纳米化途径是提高 EGCG稳定性和生物利用度的有效技术之一。已有较多的研究表明，多类材料可用于制备纳米粒子作为EGCG载体，并在改善EGCG生物活性方面效果显著。本文按制备纳米粒子主要材料的不同，对各类纳米粒子的制备方法、特性及其在改善 EGCG的生物活性方面的研究进行了分述，并对各种纳米粒的增效作用进行了归纳总结。

EGCG；纳米粒；材料；制备；生物有效性

表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）是绿茶中最重要的生物活性成分[1]，在动物模型的多个癌症位点[2]及人类一些流行病学研究中[3-5]都证实了它的抗癌活性。然而，体外实验表明，EGCG需要在相对较高的浓度条件下才能作用于相关分子靶点及影响与疾病相关的细胞进程[2]。其次 EGCG在肠液环境（pH＞7.0）易降解和聚合，导致口服的生物利用度非常低[6]。而血液环境中（pH=7.4）EGCG更不稳定，即使静脉给药，EGCG在到达作用靶点前就有可能分解[7-8]。因此，提高 EGCG的稳定性和生物利用度是将 EGCG开发为防癌治癌制品的关键之一。

纳米粒子具有独特的表面效应和尺寸效应，因而具有不同于传统材料的特殊性能[9-10]。通过采用纳米技术，将药物和食品功能因子包裹于纳米粒子内部，或吸附于纳米粒子表面，可以使药物和食品功能因子避免肠胃环境的影响，实现可控和靶向的释放，从而提高药物和食品功能因子的生物利用度[11]；其次，生物利用度的提高也相对降低了药物的毒副作用[12]。

已有较多的研究表明，多类材料可用于制备纳米粒子作为EGCG载体，并在改善EGCG生物活性方面效果显著。本文按制备纳米粒子主要材料的不同，对各类纳米粒子的制备方法、特性及其对 EGCG生物活性的影响方面进行综合论述。

1 以金属为载体EGCG纳米粒制备

金属纳米粒子是指在形态上被缩小至纳米程度（5～100 nm）的金属颗粒，这种新型纳米材料，其原子和电子结构不同于化学成分相同的金属粒子[13]。随着粒径的减小，纳米粒子的表面原子与总原子数之比急剧增大，显示出强烈的体积效应（即小尺寸效应）、量子尺寸效应、表面效应和宏观量子隧道效应[14]。

纳米金是目前研究最为深入的金属纳米粒子，其自身具有一定的生物活性，能干扰血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子，从而抑制肿瘤的生长。纳米金作为 EGCG的载体也得到了广泛的研究。Hsieh D C等[15]人通过物理吸附法制备 EGCG-金纳米粒子，通过激活线粒体通道中的Bcl-2家族的细胞凋亡蛋白酶实现其介导肿瘤细胞凋亡。在靶向性注射 EGCG-金纳米粒子时，通过下调血管内皮生长因子（VEGF）来实现对肿瘤的抑制；体外细胞实验发现，EGCG-金纳米粒子由于具有良好的协同效应而比单纯使用 EGCG对抑制老鼠体内的膀胱肿瘤效果更好。Shukla R等[16]将放射性的198Au与 EGCG 制备成对Laminin67R受体有靶向亲和作用的纳米金（198AuNP-EGCG），该纳米金能起到局部放疗效果。小鼠动物实验表明，在肿瘤中注射这种纳米金制剂对前列腺肿瘤的抑制达到 80%。Hussain S[17]制备了一种EGCG-银纳米粒子。其制备原理是利用羟基能将银离子还原成银，最终形成银纳米粒子。EGCG可以快速将银离子还原成金属银，自由羟基基团能够通过纳米银和EGCG分子的氧原子表面的Ag原子之间的相互作用稳定纳米银。Mukherjee S等[18]使用绿色纳米技术合成了 EGCG-NPs纳米金粒子，粒径为 59.8 nm。纳米粒子表现出非凡的稳定性、细胞快速吸收性和良好的体外抗氧化性。它可以通过改变癌细胞的氧化还原状态，引发癌细胞的凋亡，同时凭借其抗氧化性能避免正常肝细胞的损伤。Nagabhushana H等[19]采用绿色合成方法制备高纯度且结晶化的EGCG-氧化镉纳米粒，平均粒径5～17 nm，其形态与提取物浓度关系密切。此合成方法可用于大规模的 EGCG-氧化镉纳米粒的合成，虽然其进一步应用有待研究。

2 以蛋白为载体的EGCG纳米粒制备

蛋白质类物质在不同的温度下展现不同的空间结构，利用其内部较多的特殊基团，可与 EGCG以多种形式进行结合，具有较好的包埋活性。常用于包埋的蛋白质有乳球蛋白、酪蛋白、明胶、白蛋白等。

祖元刚等[20]通过去溶剂法制备了叶酸介导的 EGCG白蛋白纳米粒，制得的纳米粒平均粒径为200 nm，EGCG包埋率达到81.5%，叶酸偶联量达到18.4 μg·mg-1BSA。该纳米粒能明显提高EGCG对前列腺癌细胞PC-3的靶向效果，对癌细胞的致死效果也明显提升。Shpigelman A等[21]将经热诱导的β-乳球蛋白与EGCG通过自组装制备成EGCG-β-乳球蛋白纳米粒，在最优热处理条件75～85℃下制备的纳米粒粒径均小于50 nm。该纳米制剂能显著抑制 EGCG的降解，从而提高了抗氧化的EGCG分子比例。其次，这种纳米制剂能在肠胃中起到缓释效果，从而提高 EGCG的生物利用度[22]。Li B 等[23]通过热诱导法制备EGCG-β-LG纳米粒，并证明了这种EGCG纳米粒比单独 EGCG的抗氧化能力的丧失时间大幅度延长。寡聚EGCG（OEGCG）及EGCG聚乙二醇衍生物（EGCG-PEG）被Chung J E等[24]用于构建装载蛋白抗癌药物赫赛汀和干扰素的纳米粒。该类纳米粒静脉注入荷瘤小鼠体内后，其肿瘤抑制活性比单独注射赫赛汀和干扰素疗效超出两倍之多。其次，通过纳米载药系统，药物在小鼠肝脏和肾脏的积累降低了70%左右，在肺部的积累降低了40%，可以降低药物的毒副作用。黄美蓉等[25]采用热诱导法制备了 EGCG-抗坏血酸-β-乳球蛋白纳米粒，该纳米粒对 A-375皮肤癌细胞、TE-1食管癌细胞的增殖抑制有显著增效作用。实验表明，与单独EGCG相比，纳米粒能显著提高细胞的微核率、凋亡率和坏死率。Yang R 等[26]用EGCG与去铁的大豆铁蛋白（apoSSF）构建了芦丁黄酮纳米载体，该载体有效提高了芦丁的稳定性，使芦丁在模拟胃和肠液中的释放时间显著延长，可望提高芦丁口服的生物有效性。

3 以多糖为载体的EGCG纳米粒制备

糖类物质由于具有可降解性、安全无毒，在纳米粒制备中有良好的应用前景。常见可用于制备纳米粒的糖类有环状糊精、壳聚糖、藻酸盐等。其中又以壳聚糖（Chitosan，CS）的使用最为广泛，以其为载体递送抗癌药物、基因和疫苗的纳米粒药物输送系统已经被广泛研究[27-28]。壳聚糖纳米粒（CS-NPs）的制备方法有复凝聚法、共价交联法、离子凝胶化法、乳滴聚结法等。

胡冰等[29]利用分子自组装原理，通过控制壳聚糖与TPP质量比为1.3～3.0，制备得到了粒径 10～50 nm、分散稳定、形态规则、表面光滑的球形纳米颗粒。儿茶素与壳聚糖初始质量浓度比为0.4时，儿茶素的包封率最高，达到50%，并且在纳米胶囊包封过程中能很好地保持EGCG的稳定性。Gomes J F P S等[30]用麦芽糊精、阿拉伯胶和蛋黄磷脂酰胆碱/硬脂胺制备出纳米脂质体（250～300 nm），该脂质体在装载 EGCG后能有效地缓释 EGCG，并增强 EGCG在体液 pH环境中的稳定性。Dube A等[31]将EGCG包埋在壳聚糖和三聚磷酸共组装形成的纳米粒（440 nm）中，该纳米粒 EGCG的肠胃吸收大大改善，从而提高了EGCG的生物有效性。口服此种 EGCG纳米粒，暴露于血浆的EGCG量增加1.5倍，EGCG在空肠腔的暴露增加2.3倍[32]。Peres N等[33]用麦芽糊精、阿拉伯胶通过匀浆与分散制备出平均粒径400 nm的纳米粒，纳米粒装载EGCG可使 EGCG的抗氧化性能得到较好的保护。Liang K等[34]成功地用质粒 DNA、接支聚乙烯亚胺和透明质酸-EGCG组装而成具有对靶向基因释放的纳米载体（167 nm），这种纳米结构的复合物不仅能通过强的 EGCG的亲和力结合到DNA位点，也便于通过受体介导的内吞运输将EGCG转运到CD44细胞。这种纳米结构的复合物表现出增强的抗核酸酶攻击作用和聚阴离子诱导的解离。此外，由于这种纳米复合物具有CD44的靶向性，因而能在血清培养基中有效转染难转染的结肠癌HCT-116细胞。研究结果表明，这种纳米复合物可望用于 CD44的靶核酸为基础的治疗方法。Tang D W等[35]用壳聚糖和聚谷氨酸自组装成可食用的纳米粒装载主要含有 EGCG的茶儿茶素。他们研究认为，表面正电荷的该纳米颗粒可以瞬时打开 Caco-2细胞之间的紧密连接而增加 EGCG的包外转移，从而提高儿茶素的利用效率。Liang J等[36]以叶酸改性羧甲基壳聚糖（FA-CMC）和盐酸化壳聚糖采用离子凝聚法制备叶酸壳聚糖包埋的 EGCG纳米粒（FCS-EGCG-NPs）。制备的FCS-EGCGNPs直径400 nm，EGCG最大装载量达75%。该纳米粒在不同的缓冲溶液中有不同的缓释效应，并能增加肿瘤细胞中的双靶向抗肿瘤活性，对肺腺癌 H1299细胞的最大抑制率约为56%，而游离EGCG仅为22%。Lin Y H等[37]制备了EGCG-岩藻糖-壳聚糖/明胶纳米粒，模拟胃肠实验结果表明，该纳米载体系统有效地控制 EGCG的释放，可直接与幽门螺旋杆菌感染部位的细胞间相互作用。同时发现该纳米粒对幽门螺杆菌有显著的清除效果，可有效减少幽门螺旋杆菌引起的胃窦炎。Siddiqui I A等[38]研究发现装载在壳聚糖纳米粒中的EGCG对在体外和体内生长的人体黑色素瘤细胞有优异的抗增殖和促凋亡效应。比单独EGCG的效果好8倍。Hong Z等[39]将聚天冬氨酸（PAA）和壳聚糖（CS）以1∶1的质量比制成平均直径约 93 nm 的空白纳米粒，EGCG负载在纳米颗粒上制备成 EGCG-壳聚糖-聚天冬氨酸（EGCG-CS-PAA）纳米粒子，粒径约 102 nm，稳定性良好，纳米颗粒通过离心、冷冻干燥后再分散在溶液中具有较好的恢复性。白兔动物实验表明，该纳米粒在治疗动脉粥样硬化时具有比 EGCG更好的生物有效性。Zou L等[40]将硫酸葡聚糖（DS）涂布在两亲性壳聚糖衍生物表面制备出纳米载体，该纳米载体能装载EGCG，EGCG包埋率达到90%。研究表明，该纳米粒具有良好的胃肠道环境稳定性和相对较好的 EGCG缓释性能。孙静等[41]采用离子凝胶化法制备了 EGCG壳聚糖（CS）纳米粒（EGCG-CS-NPs）。制备的纳米粒包埋率为 85.8%，粒径 102.2 nm。EGCG-CS-NPs在24 h内平稳缓慢释药。Park S J等[42]利用高压均质法制备了 EGCG-海藻酸-壳聚糖纳米粒（EGCG-ACNS）。纳米粒粒径293 nm，EGCG包埋率 80.1%。该纳米粒在pH=2.6和pH6.9时对EGCG的保护作用良好。闫敬娜等[43]以壳聚糖、三聚磷酸制备纳米粒，并以叶酸和聚乙二醇（Polyethylene glycol，PEG）作靶向性修饰，制备出EGCG纳米粒，该纳米粒对6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞的毒性显著降低。

4 以聚合物为载体的EGCG纳米粒制备

聚合物纳米粒是由高聚物组成的实体结构，特别适合于水溶性差的药物。它通过化学结合或物理共聚作用，如疏水作用、离子作用或氢键，聚合物胶束的疏水性核可以吸附各类药物。这类纳米粒具有粒径小、热力学稳定性好、可增加疏水性分子的溶解度、可缓慢释放药物和可避免网状内皮系统对药物的快速清除等优点[44]。通常情况下聚合物胶束的核-壳结合是由两亲性嵌段共聚物形成的，在水溶液中，嵌段共聚物形成多聚体胶是一个自组装过程。

Siddiqui A等[45]将 EGCG包埋在聚乳酸（PLA）和聚乙二醇（PEG）纳米粒子中。纳米粒子中的 EGCG无论是在体外（细胞培养体系）还是在体内（植入了人类前列腺癌细胞的裸鼠体内）的存留量都是没有进行包封EGCG存留量的10倍多。Srivastava A K等[46]用溶剂挥发法制备了 EGCG的聚乳酸羟基乙酸共聚物（PLGA）纳米粒。实验得出，EGCG-PLGA纳米粒促凋亡和血管生成抑制作用的剂量比单独EGCG降低30倍。另外，EGCG的PLGA纳米粒有显著的修复XRCC1、XRCC3、ERCC3基因、p53基因、p21基因、MDM2、GADD45α和COX-2等DNA损伤应答基因的潜力，且EGCG-PLGA纳米粒具有防止DMBA诱导DNA损伤的能力。Shin Y C等[47]通过静电吸附的方法，以PLGA和EGCG制备了具有药物控释功能的生物可降解的纳米纤维（E-PLGA）。这种纳米纤维用于皮肤损伤，可以减少组织粘连，加速愈合。纳米纤维直径300～500 nm，EGCG可随着PLGA的降解缓慢释放长达 28 d，同时 EGCG也不会影响纤维的使用强度。E-PLGA既可以有效清除活性氧，也能延伸凝血酶活化的时间。E-PLGA在预防手术后的粘连要明显好于其他产品，具有潜在的医用开发应用价值。Pal S等[48]采用单乳化溶剂蒸发技术制备 PLGA纳米粒子封装EGCG。合成的纳米颗粒表面光滑呈球形，平均直径 300 nm。体内释放动力学实验表明该 EGCG纳米粒能延缓并控制释放，作用于肿瘤细胞K562时，该纳米系统的抑制效果远高于游离的EGCG。Singh M等[49]采用溶剂蒸发法将EGCG装载到PLGA和聚乙烯醇形成的纳米粒（EGCG-NP，239 nm）。研究表明，此种纳米粒抗肿瘤细胞增殖作用比EGCG高7倍。将顺铂装载到EGCG-NP中，能增强顺铂抑制A549（肺癌）、Hela（宫颈癌）细胞的增殖。体内实验表明，顺铂的EGCG-NP在小鼠肿瘤化疗时的增敏作用比 EGCG显著提高。Narayanan S等[50]采用乳化-沉淀法制备出PLGA为核、酪蛋白为壳的纳米载体，该纳米载体可以将低极性的紫杉醇包埋在纳米粒核内，将极性较强的EGCG吸附在酪蛋白壳上，因而能实现紫杉醇-EGCG的顺序释放。其次，亦可将EGFR抗体偶联到纳米粒上，最终形成250 nm左右的纳米药物[51]。这种纳米粒能选择性地结合到乳腺癌细胞上，从而提高癌细胞对药物的敏感性，增强化疗的效果。

5 以脂质为载体的EGCG纳米粒制备

脂质体是一种自组装胶束微粒，磷脂是最常见的脂质，常分散在水中自然形成闭合多层囊泡，每层均为脂质的双分子层，水溶性活性物质包埋于水或醇相中，脂溶性活性物质包埋在磷脂双分子层中。因此各类水溶性、脂溶性活性物质都可以用脂质体作为纳米载体。脂质体具有靶向性、缓释性、无毒性、给药途径多样化等特性[52]；作为活性物质的载体时，能促进肠道对它的吸收，提高其生物利用率[53]。

Fang J等[54]制备了含卵磷脂、胆固醇与溶于 15%乙醇的阴离子表面活性剂的脂质体（133 nm），并对影响脂质体理化性质和儿茶素在体内瘤中的沉积效果的因素进行了研究。当脂质体作为 EGCG的载体作用于基底细胞癌、黑素瘤细胞、结肠肿瘤细胞时，有比游离EGCG高 20倍的药物沉积。明显地，EGCG脂质纳米粒的形式可减少因避免诱发药物副作用所需的药物剂量。脂质体递送系统表明它们可以经过配方设计作为有效的EGCG载体，脂质体也能够提供细胞内更高的EGCG积累，并增加囊泡内的EGCG的稳定性。潘桂玲等[55]采用薄膜蒸发法用大豆卵磷脂、胆固醇、EGCG 制备出平均粒径 120 nm、包封率79.8%、载药量7.0%的EGCG纳米脂质体，其稳定较好。Barras A等[56]用辛酸/癸酸三酸甘油酯、大豆卵磷脂、聚乙二醇660和聚乙二醇660羟基硬脂酸酯制备出装载 EGCG的脂质体，该脂质体能在10周内稳定，EGCG在贮藏过程中的泄漏率显著降低。Smith A[57]等采用单相液体共溶法制备出 EGCG的纳米脂质体（50 nm），大鼠实验表明，该脂质体使得EGCG的生物有效性显著提高，使得 EGCG诱导改善神经元 SweAPP N2a细胞产生 α-分泌酶的能力提高，从而提高了 EGCG治疗阿尔茨海默症和HIV相关痴呆症的效果。Zhang J等[58]用天然油脂，表面活性剂、壳聚糖和EGCG成功地合成了50 nm的EGCG纳米脂质体（CSNLCE）。相比非纳米化的 EGCG，CSNLCE大大提高了EGCG的稳定性，能显著增加来自巨噬细胞的 THP-1含量，显著降低 mRNA 水平及单核细胞分泌蛋白-1（MCP-1）在巨噬细胞中的水平，从而抑制动脉粥样硬化病变的发展。然而，CSNLCE中含有大量的甘油三酯，可能增加血液甘油三酯的浓度，亦会带来致心血管疾病的危险因素。为了克服这个问题，他们又用 α-生育酚乙酸酯代替甘油三酯，成功地开发了一个无甘油三酯的纳米粒（Enano）[59]。Gü lseren I等[60]用牛乳磷脂、EGCG溶于咪唑-NaCl缓冲液，通过高压匀浆制备出平均粒径小于200 nm的纳米脂质体。体外实验表明，该脂质体能提高EGCG在腺癌细胞中的释放效果。Rashidinejad A 等[61]用大豆卵磷脂和醋酸盐缓冲液通过高速匀浆制备出纳米脂质体（133 nm），该脂质体能包埋溶液中80%的EGCG，包埋在纳米脂质体中的 EGCG能在低脂奶酪中有效释放。Luo X等[62]通过逆相蒸发法制备EGCG纳米脂质体。最佳制备条件为磷脂和胆固醇的比例为4，EGCG纳米脂质体的包埋率和大小分别为 85.8%和 180 nm。体外释放试验表明，所制备的 EGCG纳米脂质体是稳定的，适合于口服，可以抑制肿瘤细胞的生长。Zou L等[63]利用乙醇注射法和动态高压微射流相结合制备了EGCG纳米脂质体（EN），该脂质体具有良好的物理化学表征（包封率92.1%，平均粒径71.7 nm），并表现出相对良好的缓释性，使EGCG在接近中性或碱性的流体中的被破坏程度降低，抗氧化时效得以延长。贾坤等[64]采用薄膜超声法将硬脂酸、卵磷脂、吐温 80和姜黄素-EGCG复合物制备出平均粒径约90 nm的固体脂质纳米粒，该脂质纳米粒对CT-26和 Hela肿瘤细胞抑制作用比同剂量的 EGCG显著提高。Zou L等[65]通过静电相互作用将硫酸葡聚糖（DS）涂覆于两亲壳聚糖衍生物纳米脂质体（DCMC-NL）的表面上，制备出一种新型纳米粒 DS-DCMC-NL。该纳米粒具有高度的EGCG封装能力，对EGCG的包埋率达到90.8%，同时表现出较好的EGCG缓释性和对EGCG较强的保护能力，为EGCG在食品加工的进一步应用提供了一个有较好应用前景的载体。Radhakrishnan R等[66]通过乳化剂挥发法将 EGCG封装在固体脂质纳米粒制备中制备出EGCG-SLN。EGCG-SLN表现出血清中的稳定性和高的耐电解质诱导性，可被认为是有前景的递送 EGCG的化学治疗剂。Liao B等[67]用卵磷脂、蔗糖酯、吐温和乙醇制备出70 nm左右的醇质体，这种醇质体能很好地装载 EGCG和多烯紫杉醇。EGCG装载到醇质体后，醇质体的透皮性能大大改善。将多烯紫杉醇装载到 EGCG的醇质体上，在肿瘤表层透皮给药可以高效地将多烯紫杉醇释放到瘤体，实现多烯紫杉醇透皮给药的治疗，以降低它对其他器官的损害。

6 总结与展望

以上按制备纳米粒子主要材料的不同，对各类纳米粒子的制备方法、特性及其在改善EGCG的生物活性方面的研究进行了分述。金属纳米粒的制备采用的是金属纳米粒对EGCG的吸附作用；蛋白、聚合物和多糖则是利用了高分子的空间结构及其与 EGCG的相互作用使 EGCG包埋在高分子内部或吸附在表层；而脂质体则主要利用的是多层脂质结构对 EGCG的包埋。因此，不同的材料构建的EGCG纳米体系的稳定性、释放性和可能的靶向性是不同的。从构建的 EGCG纳米粒的增效作用（表1）来看，大多数研究的目标是指向抑制体外、体内肿瘤细胞的增殖和改善EGCG在胃肠道中的稳定性、释放性能和在肠道中的吸收率。纳米 EGCG的尺度小，装载在纳米粒子上的 EGCG可以更易穿透各种阻碍到达作用靶点；装载在纳米粒子上的EGCG能延缓 EGCG在体液环境中的降解。因此，EGCG的生物利用度得以大大提高，从而提高抑制体外、体内肿瘤细胞的增殖。金属、蛋白、聚合物、多糖和脂质体均能不同程度地起到以上作用。有相当多的研究的目的是想通过EGCG的纳米形式改善EGCG在胃肠道中的稳定性、释放性能和在肠道中的吸收率，从而为口服制品的生物有效性的提高探索新的途径。由于磷脂和多糖具有较好的安全性和在胃肠中的稳定性，因此，这些纳米体系的构建主要采用壳聚糖、磷脂等材料。其次，将EGCG用于构建纳米粒，可以改变纳米粒的透皮性、释放性等功能性质，EGCG纳米粒在装载其他药物（如多烯紫杉醇、赫塞汀、顺铂、芦丁）后可以在利用药物功能的同时发挥 EGCG的功能，从而同时提高 EGCG和所载药物的生 物利用度。

表1 EGCG纳米粒的增效作用及其构建的纳米体系Table 1 Improvement of effectiveness by EGCG nanoparticles formulation and the composition of the nano formulation

将 EGCG通过纳米载体提高其稳定性和生物有效性已取得了较大进展，但是想要在人体实验中获得成功还有较长的路要走。（1）一些纳米载体的制备成本还较高，如金纳米粒；（2）纳米粒本身的稳定时效有待延长；（3）EGCG纳米粒的生物活性离药物水平还有一定的差距；（4）临床试验验证已有的体外和动物实验结果亟待进行。其次，纳米 EGCG的研究还可以从以下几方面深入下去：（1）研发新的能对抗消化吸收环境的、稳定性强的EGCG纳米粒，这种EGCG纳米粒在EGCG功能食品和口服药品的开发方面极有潜能；（2）研发新的能对抗血液环境的稳定性强的EGCG纳米粒，这种 EGCG纳米粒具有静脉给药的可行性；（3）将 EGCG与其他生物活性成分联用，制备功能、活性更强的 EGCG纳米粒，如EGCG与紫杉醇等抗癌药物；（4）将抗体、抗原偶联至纳米载体上提高 EGCG的靶向性。我们认为，制备靶向性纳米制品应该是最有前途的方向。这方面已有相关的研究报道。如Zhang J等[59]用α-生育酚乙酸酯、表面活性剂、壳聚糖和 EGCG成功地合成开发了一种纳米粒（Enano），并将CD36靶向物（1-棕榈酰）-2-（5-酮基-6-辛烯酰）磷脂酰胆碱（Ligand）偶联到 Enano上形成 108 nm 的L-Enano。装载EGCG的L-Enano（108 nm）对 THP-1源性巨噬细胞的亲和力显著增强，从而提高了 EGCG-Enano用于抑制动脉粥样硬化病变的安全性（图1）。

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图1 CD36靶向EGCG纳米复合体及其靶向作用于巨噬细胞的机理[58]Fig. 1 Illustration of targeted L-Enanocomposition, structure and targeting mechanisms to macrophages

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To reproduce the measured NBTI degradation in practice, both of the above two mechanisms must be involved in the prediction model as independent components:

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Progress on the Preparation Technologies and the Active Improvement of EGCG Nano-carriers

QI Jie1, XU Yinglei1, LIANG Wenyi1, FEI Duo1, WU Xiner1, JIN Jianchang2, DU Qizhen1*, XU Yongquan3, GAO Ying3

1. College of Agriculture and Food Science, Zhejiang Agriculture and Forestry University, Lin'an 311300, China; 2. College of Biological and Environmental Engineering, Zhejiang Shuren University, Hangzhou 310015, China 3. Tea Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Hangzhou 310008, China

(-)-Epigallocatechin gallate (EGCG) is one of the most important bioactive compounds in green tea, which has shown antitumor activity in various stages of tumor formation. Loading EGCG in nano-carriers is an effective technique to improve the stability and bioavailability of EGCG. Many studies had shown that various kinds of materials can be used for the preparation of nanoparticles as a EGCG nano-carrier, which significantly improved the biological activity of EGCG. The preparation methods, characteristics and the biological activity of EGCG nano-carrier were reviewed, and the improvement of effectiveness by EGCG nanoparticles formulation was also dicussed.

(-)-Epigallocatechin gallate, nano-carrier, material, preparation, bioavailability

TS272；Q946.84+1

A

1000-369X（2017）02-119-11

2016-08-16

2016-10-13

国家大学生创新项目（201610341007）、浙江农林大学人才发展基金（2014FR064）、国家自然科学基金（31270724）

祁洁，女，本科生，国家大学生创新项目主持人。*通讯作者：qizhendu@163.com