王玥 李满元 王明娴 王倩

孕产妇胃幽门螺杆菌感染常见检测方法的比较

王玥 李满元 王明娴 王倩

目的探讨几种不同检测方法对胃幽门螺杆菌(Hp)感染诊断的价值,从而寻求最适合孕产妇的检测方法。方法以13C尿素呼气试验(13C UBT)作为“金标准”,对由于消化系统症状就诊的309例孕产妇分别采用Hp免疫球蛋白G(IgG)抗体检测、酶联免疫试验(ELISA)、免疫印迹法(IBT)进行检测,观察各种检测方法诊断Hp感染的效果。结果13C UBT与Hp IgG抗体检测Hp检出率比较,差异具有统计学意义(χ2=15.541,P＜0.05)、13C UBT与ELISA检出率比较,差异具有统计学意义(χ2=8.870,P＜0.05),13C UBT与IBT检出率比较,差异无统计学意义(χ2=0.428,P＞0.05)。准确度方面,IgG抗体检测为76.70%,ELISA为76.38%,IBT为85.11%。敏感度由高到低分别为Hp IgG抗体检测、ELISA、IBT,特异度由高到低分别为IBT、ELISA、Hp IgG抗体检测。Hp IgG抗体检测Kappa值为0.424,ELISA为0.537,IBT为0.759。结论Hp IgG抗体检测可以作为Hp感染大批量的流行病学调查,但不适合胃Hp的筛查。ELISA操作简单,近乎无放射性污染,敏感度也相对较高,经常用于流行病学的调研及大批体检患者的检测。IBT诊断真实性中等,特异性相比较而言略高,检测结果可以对胃Hp的感染分型,对进一步深入了解病情变化做可靠的依据,可作为辅助诊断。

胃幽门螺杆菌; 孕产妇;13C尿素呼气试验

目前检验胃Hp宏观上分为侵袭类和非侵袭类两种方法,具有侵袭类检测法主要包括病理组织切片的送检、快速尿素酶实验的检测等；其中非侵袭类检测法有胶体金技术、血清学抗体检查、粪便抗原检测和碳呼气试验等［1-4］。由于本次研究对象为孕产妇,鉴于其不适宜侵袭类检查的特殊性,本项研究使用临床多采用非侵袭类Hp检测法进行综合的评定,为临床工作中选择合适Hp诊断提供可行的、有力的依据,研究结论报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2015年7月～2016年7月锦州各医院来就诊的309例孕产妇为研究对象,纳入标准［5］：无胃部、食管等消化器官手术史；在30 d内没有使用过铋剂、治疗消化性溃疡药物、抗酸药或抗生素类等药物；6个月内没有进行口腔治疗；争得患者及患者家属同意。孕产妇年龄22～35岁。

1.2 方法 孕产妇分别采用Hp IgG抗体检测、ELISA、IBT、13C UBT方法进行检测,并将13C UBT作为“金标准”,并进行记录分析。

1.2.1 Hp IgG抗体检测 采用MP生物医学公司生产的Hp IgG抗体检测试剂盒；采集患者血液离心,加入25 μl的血清或血浆样本至加样方孔,并按照试剂盒说明书正确操作后,于15 min后读取结果。

1.2.2 ELISA 当日就诊的患者检查粪便标本,采用ELISA试验(双抗体夹心法),对其Hp抗原进行检测,所用试剂由艾康生物技术有限公司研发生产。

1.2.313C UBT 清晨,收集前来就诊患者在空腹时向收集管缓慢的呼气,收集后立刻密封； 让患者服用1颗13C尿素胶囊,使其在30 min后按相同的方法再次收集； 然后采用13C UBT对收集到的气体进行检验并分析其报告结果。判断结论如下:A 值≥4.0为Hp阳性,证明存在胃Hp感染；相反则无感染。

1.2.4 IBT 抽取患者静脉血3 ml,分离血清于-20 ℃保存待检。将Hp抗原用SDS聚酰胺凝胶电泳法,依照分子量不同大小分离,并转移到硝酸纤维膜上；检验在抗原的相应位置出现显色带的血清中的抗体,依据试剂说明书判断,判断存在Hp阳性类型,试剂由深圳市伯劳特生物制品有限公司生产。

1.3 统计学方法 采用SPSS17.0统计学软件进行统计分析。计数资料以率(%)表示,采用χ2检验；一致性采用Kappa检验,其Kappa值增大,符合程度越完美,即诊断试验的稳定性越强。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

13C UBT与Hp IgG抗体检测Hp检出率比较,差异具有统计学意义(χ2=15.541,P＜0.05)、13C UBT与ELISA检出率比较,差异具有统计学意义(χ2=8.870,P＜0.05),13C UBT与IBT检出率比较,差异无统计学意义(χ2=0.428,P＞0.05)。见表1。以13C UBT为“金标准”,准确度方面,IgG抗体检测为76.70%,ELISA为76.38%,IBT为85.11%。敏感度由高到低分别为Hp IgG抗体检测、ELISA、IBT,特异度由高到低分别为IBT、ELISA、Hp IgG抗体检测。见表2。各检测方法Kappa值比较 Hp IgG抗体检测Kappa值0.424,ELISA为0.537,IBT为0.759。

表2 三种检测方法特异度、敏感度及准确度情况(%)

3 讨论

Hp是全球最常见的病原体之一,感染率＞50%。Hp是定植于人类胃黏膜上的一种生长缓慢的革兰阴性微需氧菌,是引起慢性B型胃炎、胃溃疡及胃黏膜相关淋巴瘤和胃癌的主要致病因素［6］。由于胃炎、胃溃疡有可产生胃绞痛、反酸、打嗝、餐后胃痛、恶心呕吐等一系列症状,其中呕吐又是早期妊娠反应的主要症状,严重的妊娠呕吐患者可伴有体重下降、电解质紊乱等症状,对孕产妇健康危害极大。据研究显示,早期妊娠呕吐与Hp感染有关［7］,Hp感染可能加重早期妊娠呕吐,同时由于妊娠时母体内甾体激素水平增高,细胞内、外液增加,胃肠道内pH值会发生改变,同时也增大Hp感染的风险。Hp感染是一个公共健康问题［8］,主要通过粪-口、口-口等途径传播,同时与社会经济等各方面条件较差、饮用水污染、基本卫生环境不达标、不良饮食习惯有关,且其感染存在家庭聚集性。近年来,越来越多的研究表明,Hp的危害不仅局限于胃内,已超越了消化系统,如孕产妇营养性缺铁性贫血等,以及神经系统疾病如老年痴呆、帕金森综合征、偏头痛等［9］。有文献报道［10］中国Hp 感染率高于欧洲和美国,其发病率为42%～64%。

本研究对象为锦州市因消化道症状就诊的孕产妇309例,由于研究对象的特殊性,排除侵袭性的试验方法,仅对非侵袭性的常见的三种检查方法进行研究,得出Hp血清IgG抗体检测不可以作为Hp感染筛查的方法,但可以作为大批量的流行病学调查的结论,与相关文献报道结果相符合。

金明哲［11］对13C UBT是一种非侵袭性检测方法研究结果,该方法具快速、准确、特异性和敏感性高的优点,在国外用于Hp感染检测有10多年时间,目前成为Hp根除治疗随访的主要观察方法,是检测Hp 感染的金标准［12］。该试验通过口服或静脉给予将稳定核素13C标记的底物引入人体后,再利用同位素比值质谱仪等设备检测最终产物变化来进行研究,主要针对机体代谢反应和器官功能［13］。试验整个过程简单、试剂安全,适用于儿童、孕妇等高危险人群的临床诊断和研究的设计［14］。但是费用较昂贵,不适宜大批量流行病学的检查。血清抗体检测法检出率较高,目前已经广泛应用且适用大批量的流行病学调查［15,16］,此种检测方法操作简便,快速,创伤小,但是其特异性和准确度相对较低,Kappa值偏低,不适合作为胃Hp的筛查。ELISA的敏感度较高,特异度较低。实验检测的条件很可能与假阳性有关;就诊患者标本粪便成分较为复杂,粪便中含有大量各种类型的细菌,抗原成分相当多样化,抗原抗体存在交叉反应,并造成假阴性数量的出现。单一用ELISA作为诊断胃Hp感染依据是不合适的,弱阳性时缺乏明确诊断依据和指标。IBT的Hp检出率与13C UBT比较,差异无统计学意义(P＞0.05),研究发现IBT检出率和检测敏感度都相对较低,提示IBT可能会出现Hp感染的漏诊率。优点是特异性高,IBT诊断的真实性为中等,不可能作为单一检验的根据,但可以成为辅助诊断的方法之一,通过联合检验来提高对胃Hp感染的诊断率。有相关文献表明［17］,病理组织切片检查敏感度和可靠性都比较高,可以很好的反映出患者是否存在Hp 感染,但同期病理组织切片检查给患者带来痛苦,目前虽有无痛检查的技术手段,但针对孕产妇在妊娠期间用药非常局限,不当的药品不仅损害孕妇健康,更会对胎儿造成不利影响,故不适合体检普查,本文不作过多赘述。随着社会的进步,医学领域的不断发展和科技水平的不断提高,将会有更多更便捷具有更高诊断价值的检测方法可供临床选择,本文建议孕产妇患者孕前做好全面检查,从而减少Hp感染对人类健康的危害,做到早发现、早干预,尤其希望孕产妇都孕育健康的宝宝。

综上所述,Hp IgG抗体检测可以作为Hp感染大批量的流行病学调查,但不适合胃Hp的筛查方法。ELISA操作简单,近乎无放射性污染,敏感度也相对较高,经常用于流行病学的调研及大批体检患者的检测。IBT诊断真实性中等,特异性相比较而言略高,检测结果可以对胃Hp的感染分型,对进一步深入了解病情变化做可靠的依据,可作为辅助诊断。

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Comparison of common detection measures for helicobacter pylori infection in pregnant women

WANG Yue,LI Man-yuan,WANG Ming-xian,et al.Liaoning Jinzhou City Linghe District Maternal and Child Health Care Hospital,Jinzhou 121000,China

ObjectiveTo investigate diagnostic value of different detection measures for helicobacter pylori(Hp) infection,so as to select the most suitable method in detection.Methods13C urea breath test(13C UBT) was taken as gold standard for 309 pregnant women with gastrointestinal symptoms detected by Hp immune globulin G(IgG) antibody test,enzyme-linked immuno sorbent assay(ELISA) and immunoblotting(IBT).Observation was made on effects by various measures in diagnosis of Hp infection.ResultsThe difference of Hp detection rate had statistical significance between13C UBT and IgG antibody test(χ2=15.541,P＜0.05),and the difference of detection rate between13C UBT and ELISA also had statistical significance(χ2=8.870,P＜0.05).There was no statistically significant difference of detection rate between13C UBT and IBT(χ2=0.428,P＞0.05).IgG antibody test had accuracy as 76.70%,ELISA as 76.38% and IBT as 85.11%.Hp IgG antibody test,ELISA,and IBT respectively showed their sensitivity from high to low,while IBT,ELISA and Hp IgG antibody test showedspecificity from high to low.Hp IgG antibody test had Kappa value as 0.424,ELISA as 0.537,IBT as 0.759.ConclusionAs a common method for epidemiological investigation of massive Hp infection,Hp IgG antibody test is not suitable for Hp screening.Due to its easy operation,non radioactive pollution and high sensitivity,ELISA is usually applied in epidemiological research and massive detection.IBT shows moderate accuracy in diagnosis and slightly high specificity,and its test outcome can classify Hp infection.Due to its creditable reference for further disease changes,it can be taken as assistant diagnosis.

Helicobacter pylori; Pregnant women;13C urea breath test

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.01.015

2016-12-07］

121000 辽宁省锦州市凌河区妇幼保健院(王玥)；辽宁省锦州市妇婴医院(李满元 王明娴)；辽宁省锦州市中心医院(王倩)