袁宁，赵芳，邓海峰，李晓斌，陈学济，杨开伦

（新疆农业大学新疆肉乳用草食动物营养重点实验室，新疆乌鲁木齐830052）



补喂微生物制剂对泌乳期伊犁母马产奶量及乳成分的影响

袁宁，赵芳，邓海峰，李晓斌，陈学济，杨开伦*

（新疆农业大学新疆肉乳用草食动物营养重点实验室，新疆乌鲁木齐830052）

为研究补喂不同剂量的微生物制剂对泌乳期伊犁母马产奶量及乳成分的影响，选取年龄、胎次相近，泌乳期第3个月的伊犁母马24匹，随机分为4组，分别为对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组。对照组和试验组所有马匹饲喂同一剂量的精料补充料，在此基础上试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组分别补喂枯草芽孢杆菌（活菌数为2.0×1011cfu/g）0.05 g和植物乳杆菌（活菌数为3.0×1010cfu/g）0.133 g、枯草芽孢杆菌0.1 g和植物乳杆菌0.266 g、枯草芽孢杆菌0.15 g和植物乳杆菌0.399 g，试验期间每28 d测定伊犁马8 h的产奶量和乳成分。结果表明：28 d后，与对照组相比各试验组产奶量和乳糖含量分别提高了24.76%、17.14%、24.44%（P＜0.05）和26.63%、24.04%、23.51%（P＜0.05）。56 d时，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组乳脂含量分别比对照组高出45.57%、29.40%、35.45%。就乳蛋白产量而言，补喂枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌对乳汁中乳蛋白产量无显著影响，但各试验组均高于对照组。因此，补喂枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌可提高泌乳期伊犁母马产奶量和乳品质，其中以补喂枯草芽孢杆菌0.15g和植物乳杆菌0.399 g组效果显著。

泌乳期伊犁母马；枯草芽孢杆菌；植物乳杆菌；产奶量；乳成分

伊犁马是我国重要家畜品种之一，具有良好的运动、产肉、产乳性能（姚新奎，2011）。研究表明，马乳具有较高的营养价值，是人类理想的食品之一。但目前伊犁马的饲养过程中存在养殖过程不规范、日粮营养水平不平衡等问题，影响了泌乳期伊犁马的马奶产量。枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌作为可改善动物肠道菌群平衡的微生物添加剂，均具有调节动物胃肠道内有益菌群和有害菌群之间的平衡、改善动物胃肠道中消化酶活性、增加动物对饲料的转化率、提高动物生产性能等作用（邱凌等，2011）。研究表明，泌乳期奶牛每天摄入2×109个嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus）后，每头奶牛平均产奶产量提高1.8 kg/d（Jacquette等，1988；Ware等，1988）。本试验以泌乳期伊犁母马为试验动物，补喂不同剂量的微生物制剂，研究其对泌乳期伊犁母马产奶量和乳成分的影响，为提高泌乳期伊犁马产奶量和改善乳品质提供有效方法。

1　材料与方法

1.1试验时间及地点试验时间：2014年7—10月。试验地点：新疆伊犁昭苏马场试验基地。

1.2试验设计试验选取年龄、胎次相近，泌乳期第3个月的泌乳期伊犁母马24匹，随机分为4组，每组6匹，分别为对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组。对照组和试验组所有马匹饲喂同一营养水平和同一剂量的精料补充料，精料补充料每天每匹马饲喂3 kg，分3次补喂，分别于每天8∶00、14∶00和22∶00采食适量粗饲料后进行补喂，同时保证充足的饮水。在此基础上，试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组于8∶00时分别补喂枯草芽孢杆菌（活菌数为2.0×1011cfu/g）0.05 g和植物乳杆菌（活菌数为3.0×1010cfu/g）0.133 g、枯草芽孢杆菌0.1 g和植物乳杆菌0.266 g、枯草芽孢杆菌0.15 g和植物乳杆菌0.399 g。共进行84 d的饲养试验。精料补充料组成及营养水平见表1。

表1　精料补充料组成及营养水平（干物质基础）%

1.3饲养管理试验马匹单厩饲养，自由采食粗饲料和饮水。采食完粗料后，将马匹牵入活动场，让其自由活动。每天按时打扫马厩，清除粪便和垫料。测定泌乳期伊犁母马8 h产奶量时将母马与马驹分开，防止马驹摄入马乳。

1.4样品采集与测定在试验期间，每28 d测定泌乳期伊犁母马8 h的产奶量。根据泌乳马泌乳规律，每2 h对试验马匹进行人工挤奶1次（分别在10∶00、12∶00、14∶00、16∶00进行挤奶），将4次挤奶量相加即为每匹马每天8 h的产奶量。将8 h的马乳混匀后取100 mL装入干净的塑料瓶中，-20℃保存待测。

样品乳成分的测定使用乳成分分析仪（UL80BC）进行测定。

1.5数据分析试验数据采用Excel 2003软件进行整理，运用SPSS16.0软件进行方差分析，采用Duncan’s法进行多重比较。试验结果以“平均数±标准差”表示。

2　结果与分析

2.1补喂微生物制剂对泌乳期伊犁母马产奶量的影响由表2可知，补喂微生物制剂对泌乳期伊犁母马产奶量无显著影响（P＞0.05），但各组产奶量随试验天数的延长呈先增加后降低的趋势。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组各阶段产奶量均高于对照组，且分别在试验第28、56、56天产奶量达到了最大值，但差异均不显著（P＞0.05）。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组28 d产奶量分别比对照组提高24.76%、17.14%、24.44%。

表2　补喂微生物制剂对泌乳期伊犁母马产奶量的影响（n=6）

2.2补喂微生物制剂对泌乳期伊犁母马乳脂含量的影响由表3可知，不同剂量的复合微生物制剂对泌乳期伊犁母马乳脂含量有一定的影响。试验期间，各试验组乳脂含量均高于对照组，但差异不显著（P＞0.05），其中56 d时，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组乳脂含量分别比对照组提高45.57%、29.40%、35.45%。从整个试验期看，试验Ⅰ组和试验Ⅲ组乳脂含量的增加幅度最大。

2.3补喂微生物制剂对泌乳期伊犁母马乳糖含量的影响由表4可知，补喂复合微生物制剂28 d后，与对照组相比各试验组乳糖含量分别提高了26.63%、24.04%、23.51%（P＜0.05）。在整个试验期内，试验组乳糖含量增加较为迅速，下降幅度较小，而对照组乳糖含量增加缓慢，下降幅度较大，说明泌乳期伊犁母马补喂复合微生物制剂可明显增加乳糖含量。

表3　补喂微生物制剂对泌乳期伊犁母马乳脂含量的影响（n=6）

表4　补喂微生物制剂对泌乳期伊犁母马乳糖含量的影响（n=6）

2.4补喂微生物制剂对泌乳期伊犁母马乳蛋白含量的影响由表5可知，各组在试验期间乳糖含量均呈现先升高后下降的趋势，对照组在试验的56 d乳蛋白含量达到最大值，而试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组乳蛋白产量均在试验的第28 d达到最大值，且维持在较高水平，可在试验后期减缓乳蛋白含量下降的速度。由此可见，补喂复合微生物制剂对提高泌乳期伊犁母马乳蛋白含量具有积极作用。

表5　补喂微生物制剂对泌乳期伊犁母马乳蛋白含量的影响（n=6）

3　讨论

3.1补喂微生物制剂对泌乳期伊犁母马产奶量的影响益生菌是一种可以改善动物肠道菌群平衡的微生物添加剂，在奶牛饲养中已经有大量的研究报道。在奶牛日粮精料中添加纳豆芽孢杆菌，奶牛产奶量显著提高（栾广春等，2008）。泌乳期母牛摄入干酪乳杆菌和屎肠球菌组合物可增加产奶量（Gomez-Basauri等，2001）。Lehloenya等（2007）证实在母牛产前2周至产后30周饲喂酵母菌和丙酸杆菌混合物可使产奶量增加9%。Nocek等（2003）在产前3周至产后10周饲喂屎肠球菌（Enterococccus faecium）和酿酒酵母菌（S.cerevisiae）的组合物，奶牛干物质采食量、产奶量均有所增加。

伊犁马的泌乳期为150 d，在泌乳期的30～110 d泌乳量相对稳定，110～150 d时极剧下降（姚新奎，2011）。在本试验中泌乳期伊犁母马产奶量呈先增加后降低的趋势，这是由于本试验所选用的泌乳期伊犁母马处于泌乳期的第3个月，泌乳量相对稳定，而随试验时间的延长，根据泌乳期伊犁母马的泌乳规律，产奶量呈下降趋势。与对照组相比，泌乳期伊犁马摄入不同剂量的枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌后产奶量均有所提高，这与前人的研究结果一致。其原因可能有三个方面，一是枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌进入泌乳期伊犁母马胃肠道后大量增殖，分解饲草料的细菌素增加，使肠道菌群发生改变；二是枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌可分泌消化酶，促进了日粮中蛋白质、纤维素、脂肪酸等营养物质的水解，提高了泌乳期伊犁母马对营养物质的吸收与利用（Gibson等，2004）；三是枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌的代谢产物（乙酸、丙酸等）可改变肠黏膜的形态，特别会增加绒毛长度、隐窝深度（Shim等，2005）。这些改变均可促进营养物质的吸收，进而提高了饲料转化效率，最终促进了泌乳期伊犁母马的产奶量。

3.2补喂微生物制剂对泌乳期伊犁母马乳脂含量的影响日粮中有多种因素影响母畜产奶量和乳脂率，包括日粮精粗比，日粮中蛋白质、脂肪、纤维的含量等。相关研究表明，挥发性脂肪酸中丙酸比例越高，产奶量越高；乙酸和丁酸越高，乳脂率越高。El-Ghani等（2004）分别给泌乳期母羊饲喂6 g酵母菌（Saccharomyces cerevisiae I-1077），母羊产奶量和乳脂率均有所增加。Teh等（1987）将酵母菌和NaHCO3同时饲喂给泌乳期母羊，其乳脂率有所增加。Hoyos等（1987）将混合菌饲喂给泌乳期奶牛后，乳脂率提高19.4%。Oetzel等（2007）将屎肠球菌（Enterococcus faecium）和酵母菌（Saccharomyces cerevisiae）的混合物饲喂泌乳期奶牛，乳脂率明显增加。而Wohlt等（1999）研究结果表明饲喂微生物制剂对牛奶乳脂率无影响。

在本试验中，饲喂枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌后，与对照组相比，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组马乳中脂肪含量均有不同程度的增加，这表明枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌提高了泌乳期伊犁母马乳汁中乳脂率，可能是由于枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌在泌乳期伊犁母马胃肠道内以饲料中的营养物质为底物，发酵产生乙酸、丁酸和丙酸等挥发性脂肪酸，提高了饲料转化率，进而增加了马乳汁中脂肪含量（Sun等，2013）。此外Wang等（2001）认为泌乳期奶牛日粮中中性洗涤纤维的比例为21%时，饲喂的微生物可刺激肠道中纤维分解菌的活性，日粮中的纤维素得到分解与利用，最终使乳脂率得到增加。在本试验中泌乳期伊犁母马精料补充料中中性洗涤纤维的含量为20.81%，可能是由于饲喂的枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌刺激了泌乳期伊犁母马胃肠道细菌对纤维的消化与利用，使马乳汁中脂肪产量增加。

3.3补喂微生物制剂对泌乳期伊犁母马乳糖含量的影响乳糖是哺乳动物乳汁中特有的糖类，是一种双糖，由一分子葡萄糖和一分子半乳糖缩合而成，分子较大。Kim等（2006）在荷斯坦奶牛泌乳初期饲喂酿酒酵母可显著增加牛奶中乳糖含量。在本试验中，各试验组乳糖含量均高于对照组，且补喂中等剂量的枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌可使乳糖含量维持在较高的水平。这可能是饲喂的枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌使得泌乳期伊犁马胃肠道微生物菌群的活力和（或）数量得到激发，生成更多的丙酸，然后丙酸通过糖异生途径生成更多葡萄糖，最后导致乳汁中乳糖含量增加（刘强等，2008）。

3.4补喂微生物制剂对泌乳期伊犁母马乳蛋白含量的影响Chiquette（1995）报道荷斯坦奶牛摄入3 g/d米曲霉（A.oryzae）和10 g/d酿酒酵母（S. cerevisiae）混合物后，产奶量增加了6%。Banadaky等（2003）研究证实，荷斯坦母牛每天摄入6 g酿酒酵母后乳汁中蛋白、非乳脂固体、总固体含量均有所增加，而对产奶量无明显影响。而Willians等（1991）认为只有日粮中蛋白含量较高时，饲喂微生物制剂才可提高乳汁中乳蛋白率。

乳成分改善与胃肠道微生物发酵有密切关系，胃肠道中有机酸成分的优化能增加乳蛋白率。研究报道，瘤胃灌入丙酸能增加荷斯坦奶牛乳汁中乳糖和乳蛋白含量，同时瘤胃中较多的挥发性脂肪酸产量和微生物蛋白流入后肠道能增加乳汁中乳脂率。马的盲肠与反刍动物瘤胃具有类似的生理功能，日粮在盲肠处发酵后可产生有机酸。在本试验中，乳汁中乳蛋白含量均高于对照组，与前人的研究一致。可能是由于饲喂枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌后，可能改变了日粮发酵后产生的有机酸成分，增加了肠道中有机酸含量，从而提高了乳汁中乳蛋白含量。

4　结论

在本试验条件下，补喂枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌可提高泌乳期伊犁母马产奶量并改善乳品质，其中以补喂枯草芽孢杆菌0.15 g和植物乳杆菌0.399 g效果显著。

［1］刘强，黄应祥，王聪，等.蛋氨酸硒对牛营养物质代谢和生化指标的影响［J］.核农学报，2008，22（2）：233～237.

［2］栾广春，王加启，卜登攀，等.纳豆芽孢杆菌对泌乳期奶牛产奶量、牛奶品质的影响［J］.东北农业大学学报，2008，39（9）：58～61.

［3］邱凌，曾东，倪学勤，等.微生态制剂对奶牛产奶量和乳品质与肠道菌群的影响［J］.中国畜牧杂志，2011，47（3）：64～66.

［4］姚新奎.伊犁马、新吉马及其杂交马乳理化指标、泌乳特性初步研究：［博士学位论文］［D］.乌鲁木齐：新疆农业大学，2011.

［5］Banadaky M D，Khah A N，Zali A.Effects of feeding yeast（Saccharomyces cerevisiae）on productive performance and blood components of lactating Holstein dairy cows［A］.Annual Conference［C］.2003.

［6］Chiquette J.Saccharomyces cerevisiae and Aspergillus oryzae，used alone or in combination，as a feed supplement for beef and dairy cattle［J］.Canadian of Journal Animal Science，1995，75（3）：405～415.

［7］El-Ghani A A.Influence of diet supplementation with yeast culture（Saccharomyces cerevisiae）on performance of Zaraibi goats［J］.Small Ruminant Research，2004，52（3）：223～229.

［8］Fuller R.Probiotics in man and animals［J］.The Journal of Applied Bacteriology，1989，66（5）：365.

［9］Gomez-Basauri J，Ordanza M B，Siciliano-Jones J.Intake and milk production of dairy cows fed lactic acid bacteria and mannanoligosaccharide［J］. Journal of Dairy Science，2001，84（1）：283.

［10］Gibson G R，Probert H M，Van L J，et al.Dietary modulation of the human colonic microbiota：updating the concept of prebiotics［J］.Nutrition Research Reviews，2004，17（2）：259～275.

［11］Hoyos G，Garcia L，Medina F.Effects of feeding viable microbial feed additives on performance of lactating cows in a large dairy herd［J］.Journal of Dairy Science，1987，70（1）：217.［12］Jacquette R D，Dennis R J，Coalson J A，et al.Effect of feeding viable Lactobacillus acidophilus（BT1386）on performance of lactating dairy cows［J］. Journal of Dairy Science，1988，71（1）：219.

［13］Kim H S，Ahn Chung S G，Moon Y H，et al.Effect of yeast culture，fungal fermentation extract and non-ionic surfactant on performance of Holstein cows during transition period［J］.Animal Feed Science and Technology，2006，126（1）：23～29.

［14］Lehloenya K V，Stein D R，Allen D T，et al.Effect of feeding yeast and propionibacteria to dairy cows on milk yield and components，and reproduction［J］. Journal of Animal Physiology and Animal Nutrotion，2007，92（2）：190～202.

［15］Nocek J E，Kautz W P，Leedle J A Z，et al.Direct-fed microbial supplementation on the performance of dairy cattle during the transition period［J］. Journal of Dairy Science，2003，86（1）：331～335.

［16］Oetzel G R，Emery K M，Kautz W P，et al.Directfed microbial supplementation on health and performance of pre-and postpartum dairy cattle：a field trial［J］.Journal of Dairy Science，2007，90（4）：2058～2068.

［17］Shim S B，Williams I H，Verstegen M W A.Effects of dietary fructooligosaccharide on villous height and disaccharidase activity of the small intestine，pH，VFA，and ammonia concentrations in the large intestine of weaned pigs［J］.Acta Agriculturae Scandinavica Section A，2005，55（2）：91～97.

［18］Sun P，Wang J Q，Deng L F.Effects of Bacillus subtilis natto on milk production，rumen fermentation and ruminal microbiome of dairy cows［J］.Journal of Animal，2013，7（2）：216～222.

［19］Teh T H，Sahlu T，Escobar E N，et al.Effects of live yeast culture and sodium bicarbonate on lactating goats［J］.Journal of Dairy Science，1987，70（1）：200.

［20］Ware D R，Read P L，Manfredi E T.Lactation performance of two large dairy herds fed Lactobacillus acidophilus strain BT138 in a switchback experiment［J］.Journal of Dairy Science，1988，71（1）：219.

［21］Wang Z，Eastridge M L，Qiu X.Effects of forage neutral detergent fiber and yeast culture on performance of cows during early lactation［J］.Journal of Dairy Science，2001，84（1）：204～212.

［22］Williams P E V，Tait C A G，Innes G M，et al.Effects of the inclusion of yeast culture（Saccharomyces cerevisiae plus growth medium）in the diet of dairy cows on milk yield and forage degradation and fermentation patterns in the rumen of steers［J］.Journal of Animal Science，1991，69（7）：3016～3026.

［23］Wohlt J E，Finkelstein A D，Ghung C H.Yeast culture to improve intake，nutrient digestibility and performance by dairy cattle during early lactation［J］. Journal of Dairy Science，1999，74（4）：1395～1400.

This study was based on the beneficial effects of probiotics in vivo，the Yili mare during lactation were used as experimental animal supplemented with different quantities of probiotics to detect the milk yield and milk composition.A total of 24 Yili mare during lactation with similar age，birth order and for the third month in lactation were randomly divided into control group，trialⅠ，ⅡandⅢ.Control group and the trial groups fed with the same dose of concentrate supplement.TrialⅠ，ⅡandⅢwere supplemented with Bacillus subtilis（2.0×1011cfu/g）0.05 g and Lactobacillus（3.0×1010cfu/g）0.133 g，0.1 g of Bacillus subtilis and 0.266 g of Lactobacillus，0.15 g of Bacillus subtilis and 0.399 g of Lactobacillus respectively.Determining milk yield and milk composition at every 28 d during the trial.The result showed that compared with control group，milk yield and yield of milk lactose of trialⅠ，ⅡandⅢat 28 d were increased by 24.76%，17.14%，24.44%（P＜0.05）and 26.63%，24.04%，23.51%（P＜0.05）respectively.The yield of milk fat of trialⅠⅡandⅢat 56 d were increased by 45.57%，29.40%，35.45%compared with control group.In the aspects of milk protein，supplemented with Bacillus subtilis and Lactobacillus didn’t affect milk protein，but the yield of milk protein of trial groups were higher than that in control group.Therefore，supplemented with Bacillus subtilis and Lactobacillus could improve milk production and milk quality of Yili mare during lactation，and supplemented with 0.15 g of Bacillus subtilis and 0.399 g of Lactobacillus was recommended.

Yili mare during lactation；Lactobacillus；Bacillus subtilis；milk yield；milk composition

检测分析

S816.7

A

1004-3314（2016）01-0013-04

10.15906/j.cnki.cn11-2975/s.20160105

新疆维吾尔自治区重大专项（201130101-3）