饲料中添加黄腐酸对鲫鱼生长及消化酶活性的影响

2016-10-26乌兰齐景伟罗旭光安晓萍

中国饲料 2016年1期

关键词：胰脏黄腐酸消化酶

乌兰，齐景伟，罗旭光，安晓萍

（内蒙古农业大学动物科学学院，内蒙古呼和浩特010018）

饲料中添加黄腐酸对鲫鱼生长及消化酶活性的影响

乌兰，齐景伟，罗旭光，安晓萍

（内蒙古农业大学动物科学学院，内蒙古呼和浩特010018）

为研究饲料中添加黄腐酸对鲫鱼生长及消化酶活性的影响，本试验选取60尾40 g左右的鲫鱼进行饲养试验，分为对照组和试验组，每组3个重复，每个重复10尾鱼。试验组在基础饲料中添加0.30%的黄腐酸，对照组饲喂基础饲料。试验期为30 d。结果表明：试验组平均增重率较对照组提高30.96%（P＜0.05）；试验组肝胰脏蛋白酶活性、淀粉酶活性和肠道淀粉酶活性分别较对照组显著提高31.69%、40.00%和20.00%（P＜0.05），肠道蛋白酶活性和肝胰脏、肠道脂肪酶活性分别较对照组提高8.81%、8.07%和7.14%（P＞0.05）。由此可见，在基础饲料中添加适量的黄腐酸可以促进鲫鱼的生长，显著增加鱼体肝胰脏蛋白酶、淀粉酶和肠道淀粉酶的活性。

鲫鱼；饲料；黄腐酸；生长；消化酶

腐植酸是一类从泥炭、褐煤或风化煤中提取的高分子化合物（赵继芬，2004）。黄腐酸是腐植酸中分子量最小、溶解度最高、生物活性最强和吸收效果最佳的部分（姚东伟，2003），具有提高动物生长性能，改善肉品质和增强免疫功能的作用（白会新等，2013；常启发等，2013）。此外，黄腐酸还具有净化水质的作用（薛德林等，2009）。目前，黄腐酸对水产动物消化酶活性的研究鲜有报道。本试验以煤炭中提取的黄腐酸为试验材料，通过在鲫鱼基础饲料中添加适量的黄腐酸，研究其对鲫鱼生长和消化酶活性的影响，旨在深入探讨黄腐酸对水产动物的影响及作用机制。

1　材料和方法

1.1黄腐酸及基础饲料黄腐酸由内蒙古永业农丰生物科技有限责任公司提供，提取自风化煤和褐煤，黄腐酸含量为12.05%。试验基础饲料是根据鲫鱼饲养标准人工配制而成的颗粒饲料，基础饲料组成及营养水平见表1。

1.2试验设计及饲养管理鲫鱼驯养结束后，挑选体质健壮、体重40 g左右的鲫鱼60尾，随机分放在6个55 cm×50 cm×60 cm的室内循环水玻璃水族箱中。试验分对照组和试验组，每组3个重复，每个重复10尾鱼。对照组饲喂鲫鱼基础饲料，试验组在基础饲料中添加0.30%的黄腐酸。试验周期为30 d。试验前，试验鱼用基础饲料驯食7 d。每天定时投饲（9∶00、17∶00），24 h连续充气，定时测定水温、溶氧量、pH，日投饲量为鱼体重的2%～3%，并根据鱼的实际情况及时调整投饲量。每3 d换水1次，每次换水1/3。试验期间，水温为23～26℃，溶氧量＞5.0 mg/L，pH为7.0～7.6。

表1　基础日粮组成及营养水平%

1.3测定指标及方法

1.3.1生长性能指标测定试验开始及试验结束的前1 d停止投饲，让鱼饥饿1 d后用电子天平称取鱼体重，精确到0.01 g，计算平均增重率。计算公式为：

平均增重率/%=（试验末平均鱼体重-试验初平均鱼体重）/试验初平均鱼体重×100。

1.3.2消化酶活性测定

1.3.2.1样品采集试验结束的次日，分别从每个水族箱取出6尾鱼，断脊处死取样，在冰盘上解剖。取出鱼的肝胰脏和全肠，剔除脂肪组织，用滤纸轻轻吸干水分，置于-20℃冰箱中冷冻备用。每个水族箱的样品集中放在一起。

1.3.2.2粗酶液的制备将肠道和肝胰脏解冻之后，分别称取1 g组织，剪碎后，按W∶V=1∶10加入4℃0.9%的生理盐水，在冰浴下用电动匀浆器匀浆，匀浆液在3000 r/min、4℃离心30 min，取上清液于4℃保存，24 h内测定酶活性。

1.3.2.3酶活性的测定方法和定义蛋白酶活性的测定：参照《生化技术导论》蛋白酶的测定方法，即福林-酚法，并略作改进。蛋白酶活性的定义为：在37℃、pH 7.5的条件下，1 g组织中的蛋白酶1 min水解酪蛋白产生1 μg酪氨酸的量定为一个酶活力单位（U）。

淀粉酶和脂肪酶活性的测定：采用南京建成生物工程研究所研制的淀粉酶试剂盒（碘-淀粉比色法）和脂肪酶试剂盒，具体测定方法和步骤参照说明书。淀粉酶活性（AMS）定义：每1 mg组织蛋白在37℃下与底物作用30 min，水解10 mg淀粉定义为1个淀粉酶活力单位（U）。脂肪酶活性（LPS）定义：每1 g组织蛋白在37℃下，在本反应体系中与底物反应1 min，每消耗1 μmol底物定义为1个脂肪酶活力单位（U）。

1.4数据统计分析试验数据用Excel做初步整理后，采用SPSS 17.0软件包对数据进行方差分析。数据以“平均值±标准差”表示，差异显著用P＜0.05表示。

2　结果

2.1黄腐酸对鲫鱼平均增重率的影响由表2可知，与对照组相比，添加0.30%黄腐酸的试验组，其平均增重率提高30.96%（P＜0.05）。

表2　黄腐酸对鲫鱼平均增重率的影响

2.2黄腐酸对鲫鱼消化酶活性的影响由表3可知，与对照组相比，添加0.30%黄腐酸的试验组，鱼的肝胰脏和肠道蛋白酶活性分别提高了31.69%（P＜0.05）和8.81%（P＞0.05）；淀粉酶活性分别提高40.00%和20.00%（P＜0.05）；脂肪酶活性分别提高8.07%和7.14%（P＞0.05）。

表3　黄腐酸对鲫鱼消化酶活性的影响

3　讨论

3.1黄腐酸对鲫鱼生长的影响有研究显示，黄腐酸是一种安全的促生长添加剂，在猪日粮中添加0.50%的黄腐酸可提高猪的平均日增重，降低料重比（常启发等，2013）。在1～21日龄肉仔鸡的日粮中添加0.024%～0.240%的黄腐酸，可增加肉仔鸡的平均日增重并降低料重比（王晶等，2013）。本试验结果表明，在基础饲料中添加0.30%的黄腐酸可显著提高鲫鱼的平均增重率。这一结果与张志功等（1999）报道的一致，从而进一步证实了在鱼饲料中添加黄腐酸可以加快其生长速度。

3.2黄腐酸对鲫鱼消化酶活性的影响消化酶是消化腺和消化系统所分泌的起消化作用的酶类，具有酶的所有特征，能将大分子的营养物质催化成小分子，从而有利于营养物质吸收。有研究显示，消化酶活性是反映鱼类消化机能的重要指标，鱼类消化酶活性的高低决定其对营养物质的消化分解和吸收利用，增强鱼体的消化酶活性能提高鱼对饲料的消化吸收率和鱼生长速度（彭小玉和沈明浩，2010；李爱杰，1996）。本试验结果显示，在基础饲料中添加0.30%的黄腐酸可显著提高鲫鱼的肝胰脏蛋白酶活性、肝胰脏和肠道淀粉酶活性，鲫鱼肠道蛋白酶活性、肝胰脏和肠道脂肪酶活性也有小幅提高。本试验所用黄腐酸本身不能分泌蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶，但却能增强这些消化酶的活性，其原因可能是黄腐酸进入鱼的消化道后，能刺激肝胰脏和肠道分泌消化酶，或使消化道已有消化酶的活性增强。此外，黄腐酸具有保护动物胃肠黏膜的功效，投喂含有黄腐酸的饲料可以保护鱼类消化道中分泌消化酶的黏膜细胞，从而促进消化酶的分泌（闫论，2004）。

4　小结

本试验研究表明，在体重40 g左右的鲫鱼基础饲料中添加0.30%的黄腐酸，可以促进鲫鱼的生长，显著增加鱼体肝胰脏蛋白酶、淀粉酶和肠道淀粉酶的活性。

［1］白会新，常启发，石宝明，等.黄腐酸对生长育肥猪生长性能、胴体性状和肉品质的影响［J］.动物营养学报，2013，25（1）：133～139.

［2］常启发，白会新，石宝明，等.黄腐酸对生长猪生长性能、血清生化指标、血常规参数和免疫功能的影响［J］.动物营养学报，2013，25（8）：1836～1842.

［3］李爱杰.水产动物营养与饲料学［M］.北京：中国农业出版社，1996.5～6.

［4］彭小玉，沈明浩.蒲公英水提物对鲫鱼生长、鱼体成分、消化酶和免疫系统的影响［J］.中国畜牧兽医，2010，37（5）：13～17.

［5］王晶，张海军，武书庚，等.饲粮中添加黄腐酸对肉仔鸡生产性能和血液生化指标的影响［J］.动物营养学报，2013，25（1）：140～147.

［6］薛德林，胡江春，王国安，等.海洋胶红酵母、光合细菌、生化黄腐酸在海参育苗和养成中的应用效果［J］.腐植酸，2009，4：19～24.

［7］闫论.腐植酸及其广泛应用［J］.新疆农业科学，2004，41（S1）：130～132.

［8］姚东伟.黄腐酸对番茄生长产量及光合特性的影响：［硕士学位论文］［D］.晋中：山西农业大学，2003.

［9］张志功，徐学军，刘权.生化黄腐酸添加剂饲喂罗非鱼的效果［J］.内陆水产，1999，3：13.

［10］赵继芬.黄腐酸从风化煤中溶出时的吸附平衡及溶解性研究：［硕士学位论文］［D］.太原：太原理工大学，2004.

［11］中山大学生物系生化微生物教研室.生化技术导论［M］.北京：人民教育出版社，1978.52～58.

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The effect of dietary fulvic acid on growth and digestive enzyme activities of Carassius auratus was investigated.Sixty Crucian carp（body weight was 40 g）were randomly divided into 2 treatment groups with 3 replicates of 10 each for 30d.The control group was fed the basal diet，and the experimental group was fed the basal diet supplemented with 0.30% fulvic acid.The results showed that compared with the control group，the average weight gain of the experimental group increased by 30.96%（P＜0.05）；the activities of proteinase and amylase in hepatopancreas and the activities of amylase in intestine of the experimental group increased by 31.69%，40.00%and 20.00%（P＜0.05），respectively，the activities of proteinase in intestine and lipase in hepatopancreas and intestine of the experimental group also increased by 8.81%，8.07%and 7.14%，but the difference was not significant（P＞0.05）.The results suggested that dietary fulvic acid could promote the growth of Crucian carp，and significantly improve the activities of proteinase and amylase in hepatopancreas and the activities of amylase in intestine.

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