夏旻明 陆国文 章懿欣

胃癌组织MGMT蛋白的表达及临床意义

夏旻明 陆国文 章懿欣

目的 检测胃癌组织MGMT蛋白表达情况，分析其与胃癌生物学行为及长期预后的相关性。方法 收集262例胃癌组织及癌旁正常组织，采用免疫组织化学法测定组织内MGMT蛋白的表达情况，统计分析胃癌组织及癌旁正常组织MGMT蛋白表达的差异、胃癌组织MGMT蛋白表达与胃癌临床病理参数的关系及胃癌组织MGMT蛋白表达与胃癌患者5年死亡及生存时间的关系。结果 胃癌组织MGMT蛋白表达阳性率显著低于癌旁正常组织，胃癌组织MGMT蛋白表达与胃癌肿瘤大小、浸润深度分级、淋巴结转移分级、远处转移分级、腹膜扩散情况和TNM分期相关，胃癌组织MGMT蛋白阴性表达是胃癌5年死亡及5年生存时间的独立危险因素。结论 胃癌组织MGMT蛋白表达显著降低，胃癌组织MGMT蛋白低表达与胃癌恶性生物学行为密切相关，与胃癌长期不良预后独立相关。

胃癌 MGMT蛋白 预后 生物学行为

胃癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一，几乎2/3的胃癌发生在欠发达地区［1］。DNA甲基化出现在多种恶性肿瘤中，可引起致癌基因过表达，也可导致抑癌基因沉默，参与肿瘤的发生发展过程［2，3］。分子标记物DNA修复蛋白06-甲基鸟嘌呤 -DNA-甲基转移酶（MGMT）编码基因属于抑癌基因［4］。MGMT基因启动子甲基化可导致肿瘤组织MGMT蛋白低表达［5］。MGMT蛋白低表达与肺癌﹑乳腺癌和子宫内膜癌等恶性肿瘤预后不良密切相关［6，7］。本文探讨MGMT蛋白表达与胃癌临床特征和预后的相关性。

1　临床资料

1.1一般资料 2006年2月至2008年5月本院肿瘤外科经手术病理确诊胃癌患者262例。其中男156例，女106例；年龄≥60岁121例，＜60岁141例。病理诊断：腺癌214例，印戒细胞癌22例，其他26例。肿瘤大小：＜5cm 182例﹑≥5cm 80例。浸润深度分级：T1 25例﹑T2 42例﹑T3 67例﹑T4 128例。淋巴结转移分级：N0 82例﹑N1 38例﹑N2 47例﹑N3a 60例﹑N3b 35例。远处转移分级：M0 186例﹑M1 76例。腹膜扩散50例﹑腹膜未扩散212例。TNM分期：Ⅰ期47例﹑Ⅱ期60例﹑Ⅲ期78例﹑Ⅳ期77例。患者均排除既往恶性肿瘤病史和并存其他恶性肿瘤。

1.2免疫组织化学检测 术中获取的胃癌组织及癌旁正常组织经10%甲醛固定﹑石蜡包埋和常规切片后保存。采用链霉素亲生物素-过氧化物酶法（试剂盒由福州迈新生物技术开发公司提供）检测胃癌组织及癌旁正常组织MGMT蛋白表达。阳性细胞为细胞核和/或细胞浆呈棕色颗粒。阳性细胞数＜10%为MGMT蛋白表达阴性，＞10%为MGMT蛋白表达阳性。

1.3随访观察 胃癌患者手术后随访5年，前3年，随访1次/3个月；后2年，随访1次/6个月。总生存期为术后至最后随访或死亡时间。

1.4统计学方法 采用SPSS 19.0.统计软件。单因素分析采用卡方检验﹑log-rank检验和单因素Cox回归分析，多因素分析采用二分类Logistic回归分析和多因素Cox回归分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

作者单位：315040 浙江省宁波市鄞州人民医院肿瘤外科

2　结果

2.1胃癌组织及癌旁正常组织MGMT蛋白的表达 胃癌组织MGMT蛋白阳性表达150例（57.3%），癌旁正常组织MGMT蛋白阳性表达236例（90.1%），差异有统计学意义（χ2=72.755，P＜0.001）。

2.2胃癌组织MGMT基因启动子甲基化状态与胃癌临床特征的相关性 胃癌组织MGMT蛋白表达情况与肿瘤大小﹑浸润深度分级﹑淋巴结转移分级﹑远处转移分级﹑腹膜扩散情况和TNM分期相关（均P＜0.05），而性别﹑年龄和病理诊断与胃癌组织MGMT蛋白表达无显著相关（均P＞0.05）。见表1。

表1　胃癌组织MGMT蛋白表达情况与胃癌临床特征的相关性［n（%）］

2.3胃癌组织MGMT蛋白表达情况与胃癌患者5年死亡的相关分析 肿瘤大小﹑浸润深度分级﹑淋巴结转移分级﹑远处转移分级﹑腹膜扩散情况﹑TNM分期和胃癌组织MGMT蛋白表达与胃癌患者5年死亡相关（均P＜0.05），而性别﹑年龄和病理诊断与胃癌患者5年死亡无显著相关（均P＞0.05）。经二分类Logistic回归分析，胃癌组织MGMT蛋白阴性表达（OR=5.716，95%CI=2.218-9.301，P＜0.001）﹑肿瘤大小（OR=4.213；95%CI=1.982～8.887；P＜0.001）﹑腹膜扩散（OR=4.879；95% CI=1.761～9.235；P＜0.001）和远处转移（OR=3.911；95%CI=1.995～8.204；P＜0.001）是胃癌5年死亡的独立危险因素。见表2。

2.4胃癌组织MGMT蛋白表达情况与胃癌患者5年生存时间的相关分析 肿瘤大小﹑浸润深度分级﹑淋巴结转移分级﹑远处转移分级﹑腹膜扩散情况﹑TNM分期和胃癌组织MGMT蛋白表达与胃癌患者5年生存时间相关（均P＜0.05），而性别﹑年龄和病理诊断与胃癌患者5年生存时间无显著相关（均P＞0.05）。经多因素Cox回归分析，胃癌组织MGMT蛋白阴性表达（HR=4.287，95%CI=2.091～6.411，P＜0.001）﹑肿瘤大小（HR=3.102；95%CI=1.912～6.219；P＜0.001）﹑腹膜扩散（HR=3.563；95% CI=1.988～7.520；P＜0.001）和远处转移（HR=4.273；95%CI=2.518～8.005；P＜0.001）是胃癌5年生存时间的独立危险因素。（见表3）。胃癌组织MGMT蛋白阴性表达患者5年生存时间明显短于胃癌组织MGMT蛋白阳性表达患者（P＜0.001）（见图1）。

表2　影响胃癌患者5年死亡的相关因素分析（n）

表3　影响胃癌患者5年生存时间的相关因素分析

图1　胃癌组织MGMT蛋白表达情况与胃癌患者5年生存时间的相关分析

3　讨论

胃癌的发生发展是一个多因素相互作用的过程，DNA修复基因的缺失与胃癌的易感性﹑恶性程度及肿瘤相关的临床症状有关［8］。MGMT是一种高效的DNA直接修复酶，可将6-氧-甲基鸟嘌呤分子上的甲基转移到自身的半胱氨酸残基上，从而修复DNA分子的损伤。人类MGMT的编码基因是一种常见的肿瘤抑制基因。MGMT基因启动子甲基化可使MGMT蛋白表达减少。MGMT蛋白低表达可以促进肺癌﹑脑胶质瘤及乳癌等发生，也与癌症的恶性程度及不良预后相关。

最近，有研究提示，45.1%的胃癌组织MGMT蛋白表达缺失或下降［9］。本资料显示，42.7%的胃癌组织MGMT蛋白低表达，基本与之相符合。本资料也显示，与癌旁正常组织比较，胃癌组织的MGMT蛋白表达显著下降，提示MGMT蛋白表达缺失与胃癌的发生可能相关。究其原因可能与MGMT蛋白表达减少从而DNA修复能力缺失相关［10～12］。目前，少有研究揭示MGMT蛋白表达与胃癌临床病理特征之间的关系。本资料显示，MGMT蛋白表达与胃癌的肿瘤大小﹑浸润深度﹑淋巴结转移﹑远处转移﹑腹膜扩散和TNM分期密切相关，即肿瘤的恶性程度越高，MGMT蛋白阳性表达率越低，提示MGMT蛋白在肿瘤的发展过程中可能起重要作用，表明MGMT蛋白可能成为评价胃癌预后的一个生物学指标。

MGMT蛋白低表达与诸多癌症的高度恶性生物学行为显著相关，也与胶质瘤﹑肺癌等不良临床预后相关。MGMT蛋白表达与胃癌预后的关系缺乏研究。本资料中胃癌患者经过5年随访，观察其5年的病死率和生存时间，采用多因素分析发现，除肿瘤大小﹑腹膜扩散和远处转移外，胃癌组织MGMT蛋白阴性表达也成为胃癌患者5年死亡和生存时间的独立危险因素。这也提示，胃癌组织MGMT蛋白的检测可能成为胃癌预后预测的重要手段。

综述所示，MGMT蛋白低表达可能参与胃癌的发生发展过程，胃癌组织MGMT蛋白的检测可较好的评价胃癌的恶性生物学行为，同时也可能成为胃癌预后预测的重要手段。

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Objective This study aimed to investigate and to assess the relationship between the expression of MGMT protein in gastric cancer tissues，biological behavior of gastric cancer and long-term prognosis. Methods A total of 262 cases of gastric cancer tissues and normal tissues adjacent to carcinomas were collected. The expressions of intra-tissue MGMT proteins were measured using immunohistochemistry. The difference of expression of MGMT proteins between gastric cancer tissues and normal tissues adjacent to carcinomas，the relationship between expression of MGMT proteins in gastric cancer tissues and clinicopathological parameter of gastric cancer，and the relationship between expression of MGMT proteins in gastric cancer tissues and 5-year mortality and overall survival of patients with gastric cancers were analyzed statistically. Results Positive rate of expression of MGMT proteins was markedly lower in gastric cancer tissues than in normal tissues adjacent to carcinomas. The expression of MGMT protein in gastric cancer tissues was obviously associated with tumor size，invasion depth，lymph node metastasis，distant metastasis，peritoneal dissemination，and TNM stage. The negative expression of MGMT protein in gastric cancer tissues was identifi ed as an independent risk factor for 5-year mortality and overall survival of gastric cancers. Conclusion The expression of MGMT protein in gastric cancer tissues is decreased markedly. Low expression of MGMT protein in gastric cancer tissues is highly associated with malignant biological behavior of gastric cancer，and independently related to long-term poor prognosis of gastric cancer.

Gastric cancer MGMT protein Prognosis Biological behavior

浙江省宁波市科技计划项目（2013C50026）