朱小晖，张申华



·临床医学·

卵巢癌中Metadherin蛋白表达的临床病理意义

朱小晖，张申华

目的：探讨Metadherin蛋白(MTDH)在卵巢癌组织中的表达情况及临床意义。方法：选取56例卵巢癌患者，免疫组织化学法检测卵巢癌组织中MTDH表达，并结合MTDH表达情况分析临床病理数据。结果：56例卵巢癌MTDH表达阳性率为53.6%(30/56)。卵巢癌肿瘤分期Ⅲ/Ⅳ期患者MTDH表达阳性率明显高于Ⅰ/Ⅱ期患者(P<0.01)，淋巴结转移患者MTDH表达阳性率高于无淋巴结转移患者(P<0.05)，但在患者不同年龄、肿瘤组织学类型及分级和有无腹水间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论：卵巢癌中存在MTDH高表达，其可能在肿瘤生长和发展过程中发挥作用，对患者治疗及预后具有一定价值。

卵巢肿瘤；MTDH蛋白；肿瘤分期；淋巴结转移

卵巢癌是妇科死亡率最高的恶性肿瘤，具有发病隐匿、进展迅速的特征。尽管早期卵巢癌患者5年生存率可达90%，但临床上大多数患者确诊时肿瘤已经扩散或转移，仅25%的卵巢癌诊断时病变局限，目前5年生存率仅在12%～30%[1]。研究[2-3]发现，一些蛋白在恶性卵巢癌预后判断中具有一定价值，如糖类抗原125在监测卵巢癌复发和预后中具有一定价值[3]，但卵巢癌发生、发展与众多基因突变有关，发生机制复杂，寻找新的有效的卵巢癌临床治疗靶点仍具有重要的意义。近年研究[4]发现，Metadherin蛋白(MTDH)高表达于乳腺癌、非小细胞肺癌、脑胶质瘤等多种恶性肿瘤中，且与不良预后密切相关。我们通过免疫组织化学方法检测卵巢癌组织中MTDH表达情况，探讨MTDH作为卵巢癌预后影响因子的可能性，现作报道。

1　材料与方法

1．1一般资料选取2012-2013年我院行手术治疗的卵巢癌患者56例，年龄23～76岁，均经术后病理学确诊，术前未行放疗、化疗及药物治疗，且为单一妇科恶性肿瘤。按国际妇产科联盟2009年标准分为:Ⅰ期16例，Ⅱ期9例，Ⅲ期21例，Ⅳ期10例；按照世界卫生组织1997年组织学分级标准:Ⅰ级21例，Ⅱ级7例，Ⅲ级9例，Ⅳ级19例；有淋巴转移30例，无淋巴转移26例；有腹水25例，无腹水31例。所有手术切除标本用10%甲醛固定，石蜡包埋切片，HE染色明确病理诊断。标本取得均获患者签字同意。

1．2方法MTDH单克隆抗体购自美国Abcam公司(ab124789)，二氨基联苯胺试剂购自武汉博士德生物有限公司(AR1000)，免疫组织化学试剂盒购自中杉金桥有限公司(SP-9001)。SP染色方法检测卵巢癌组织中MTDH表达情况，石蜡包埋切片，厚度4 μm，二甲苯脱蜡，100%、95%、85%梯度乙醇入水，抗原修复采用98 ℃ 0.1%枸橼酸钠溶液浸泡15 min，封闭用正常山羊血清工作液孵育15 min，MTDH兔抗人单克隆抗体(1∶100)4 ℃过夜，PBS洗3遍，生物素化二抗37 ℃孵育15 min，滴加辣根酶标记的链霉卵白素工作液37 ℃孵育15 min，二氨基联苯胺显色，苏木素复染1 min，60 ℃烤片2 h，脱水，透明，中性树胶封片。

结合染色强度和染色百分比评估染色结果[5]。染色强度0～3分：0分为阴性，1分为弱，2分为中等染色，3分为强染色。染色百分比0%～20%为0分，21%～40%为1分，41%～60%为2分，61%～80%为3分，81%～100%为4分。最终评分结果为染色强度和染色百分比评分乘积，可分为低表达(0～6分)和高表达(7～12分)。

1．3统计学方法采用χ2检验。

2　结果

2.1卵巢癌组织中MTDH表达情况免疫组织化学检测结果显示，卵巢癌组织中MTDH主要在细胞质表达，呈团状、片块状(见图1、2)，本组卵巢癌组织中MTDH阳性表达率为53.6% (30/56)。

2.2卵巢癌患者不同病理特征间MTDH表达阳性率比较患者不同年龄、组织学分级、组织学类型和腹水情况间MTDH表达阳性率差异均无统计学意义(P>0.05)。而肿瘤分期Ⅰ/Ⅱ期患者MTDH阳性表达率为36.0%，Ⅲ/Ⅳ期阳性表达率为67.7%；无淋巴结转移阳性表达率为38.5%，有淋巴结转移阳性表达率为66.7%。肿瘤分期Ⅲ/Ⅳ期患者MTDH阳性表达率明显高于Ⅰ/Ⅱ期(P<0.01)，有淋巴结转移患者MTDH阳性表达率高于无淋巴结转移患者(P<0.05)(见表1)。

表1卵巢癌患者不同临床病理特征间MTDH蛋白表达阳性率比较[n;百分率(%)]

3　讨论

卵巢癌是女性生殖器官三大恶性肿瘤之一，以45岁以上为发病高峰，预后较差。研究者[6-7]认为超过90%卵巢癌由卵巢上皮癌变产生。临床症状包括腹部肿块、腰痛和一系列非特异性症状，如不正常的阴道出血或不自主体质量减轻等[8]。卵巢癌目前缺乏有效的治疗手段，化疗失败率高达30%～40%[9]。

MTDH基因位于8号染色体长臂2区2带(8q22)，含有12个外显子和11个内含子，编码约64 kDa的蛋白，其主要定位于胞质，在胞膜和胞核中也有表达[10]。近年研究[11]发现，MTDH可通过参与AKT、NF-κB、Wnt/β-catenin信号通路，增加AKT及GSK3β磷酸化，稳定c-Myc，并促进MDM2磷酸化，从而抑制p53、p21表达，促进BAD磷酸化，导致肿瘤发生。其高表达于乳腺癌、肝癌、骨肉瘤、舌癌等几乎全身所有系统的恶性肿瘤中，与患者肿瘤分期、组织分级、转移复发和预后生存等临床病理特点密切相关。本研究检测MTDH在卵巢癌组织中的表达情况，发现MTDH在卵巢癌中阳性表达率达59.3%。

侵袭、转移是恶性肿瘤进展的重要特征，并且直接导致患者死亡，与肿瘤患者短暂的生存期密切相关[12]。上皮间质转换(EMT)指细胞表皮细胞向间质细胞转换，在胚胎发育、组织塑形及伤口愈合等生理过程中发挥重要作用。晚期肿瘤伴随明显的转移特征，发生EMT的肿瘤更容易浸润、转移，导致患者病情进展迅速。有研究[13]报道，非小细胞肺癌中MTDH与EMT密切相关,而基因敲除MTDH可逆转EMT，发挥抑制肿瘤细胞侵袭、转移的作用[14]。本研究结果显示，淋巴结转移的卵巢癌患者MTDH表达阳性率高于无淋巴结转移患者(P<0.05)，提示卵巢癌中MTDH表达增高可能与淋巴结转移有一定相关性，可能与患者更易出现转移及不良预后有关。此外，肿瘤分期Ⅲ/Ⅳ期的卵巢癌患者MTDH阳性表达率明显高于Ⅰ/Ⅱ期(P<0.01)，而在不同患者年龄、肿瘤组织学类型及分级和有无腹水间差异均无统计学意义(P>0.05)。

综上，MTDH在卵巢癌中存在高表达，MTDH表达与患者肿瘤分期及淋巴结转移有一定相关性，可能是患者不良的预后指标，但MTDH在卵巢癌发生、发展过程中的具体作用机制，有待进一步探讨。

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(本文编辑卢玉清)

The clinical significance of metadherin expression in ovarian cancer

ZHU Xiao-hui,ZHANG Shen-hua

(DepartmentofObstetricsandGynecology,TheFirstPeople′sHospitalofTianmenCity,TianmenHubei431700,China)

Objective:To explore the clinical significance of metadherin(MTDH) expression in ovarian cancer.Methods:The MTDH expression in 56 patients with ovarian cancer were detected using immunohistochemistry,the related pathological data was analyzed.Results:The expression positive rate of MTDH in 56 patients was 53.6%(30/56).The expression positive rate of MTDH in stage Ⅲ/Ⅳ patients was significantly higher than that in stage Ⅰ/Ⅱ patients(P<0.01),the expression positive rate of MTDH in patients with lymph node metastasis was significantly higher than that in patients without lymph node metastasis(P<0.05),and the differences of MTDH expression in different age,tumor histology,staging and ascites were not statistically significant(P>0.05).Conclusions:The MTDH expression in ovarian cancer is high,which may play an important role in growth and development of tumor,and can guide the treatment and predict prognosis.

ovarian neoplasms;metadherin；lymphatic metastasis

2014-12-01

单位] 湖北省天门市第一人民医院 妇产科，431700

[作者简介] 朱小晖(1981-)，男，主治医师.

张申华，副主任医师.E-mail：36860613@qq.com

1000-2200(2016)05-0583-03

R 711.75

A

10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2016.05.008