曹伟丽, 陈 红

(武汉大学中南医院妇产科,湖北 武汉 430071)



·临床研究·

EMT患者血清和腹腔液中CA125、VEGF、炎性细胞因子水平的变化及意义

曹伟丽, 陈 红

(武汉大学中南医院妇产科,湖北 武汉 430071)

目的 探讨子宫内膜异位症(endometriosis, EMT)患者血清及腹腔液中CA125、VEGF及其炎性细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平的变化及意义。方法 选择取2011年1月至2015年6月均经病理证实为EMT的109例患者为EMT组(r-AFS Ⅰ～Ⅱ期45例,Ⅲ～Ⅳ期64例),选择同期病理确诊为妇科良性病变患者79例为对照组。检测并分析EMT组、对照组患者血清及腹腔液中CA125、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平的变化。结果 EMT组患者血清和腹腔液中CA125、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)；且随着r-AFS分期的增加,EMT Ⅲ～Ⅳ患者血清和腹腔液中CA125、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平高于Ⅰ～Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 EMT患者血清和腹腔液中CA125、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α均明显高表达,且随着r-AFS分期的增加,患者血清和腹腔液中CA125、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平均提高。

子宫内膜异位症； 血清； 腹腔液

子宫内膜异位症(endometriosis, EMT)指子宫内膜组织在子宫腔被覆内膜及子宫肌层以外的部位生长、浸润及反复出血,形成结节或包块,具有侵袭性和易复发等特点,临床引起疼痛和不育等,是育龄期妇女常见妇科良性病变,其发病率为10%～15%,严重影响妇女身心健康和生活质量[1]。此病临床表现多样,早期诊断多困难,约25%病例无任何症状,仅在腹腔镜或开腹手术时发现,临床上常引起误诊。研究[2]指出,EMT为一种血管生成依赖性疾病,内膜的种植过程是免疫应答异常、产生局部炎症反应和新生血管的过程,患者血清和腹腔液中巨噬细胞的数量明显增多,活性增强,分泌的细胞因子活性物质增加,且血清和腹腔液中CA125及TNF-α的浓度与正常人存在明显差异。本研究探讨EMT患者血清及腹腔液中CA125、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平的变化及意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2011年1月至2015年1月在武汉大学中南医院妇产科行腹腔镜手术,术后均经病理证实为EMT的109例患者为EMT组,年龄23～44岁,平均(31±2)岁；体质量指数(BMI)平均为(22.9±2.5)kg/m2,平均生育次数为(2±1)次,盆腔手术史为(2±2)次；根据美国生育协会评分标准(r-AFS)进行分期,其中Ⅰ～Ⅱ期45例,Ⅲ～Ⅳ期64例。将r-AFⅠ～Ⅱ期45例分为EMT重症组,Ⅲ～Ⅳ期64例为EMT轻症组。另选取同期在我院行腹腔镜手术治疗,且术后病理确诊为妇科良性病变女性患者79例为对照组,年龄23～47岁,平均(34±4)岁,BMI为(23.1±2.4)kg/m2；平均生育次数为(1±1)次,盆腔手术史为(1±1)次。两组患者年龄、BMI、平均生育次数、盆腔手术史差异无统计学意义(P>0.05),均签署知情同意书。

1.2 纳入及排除标准

纳入标准: 符合相关疾病的诊断标准；无严重肝肾疾病；平素月经规则；无子宫内膜癌；无盆腔炎；无其他严重脑部器质性病变。排除标准: 内分泌疾病者；近3个月内接受激素治疗者；免疫疾病患者；子宫腺肌患者；代谢性疾病患者；子宫肌瘤患者；生殖道结核患者；卵巢癌患者；有其他严重精神疾病者；有酒精药物滥用史。

1.3 方法

两组患者均于术前空腹抽取外周静脉血,常温下静置,离心半径10cm,3000r/min,离心12min,取上清液置-80℃冰箱冻存待测。EMT组和对照组患者均在全身麻醉下行腹腔镜手术,通过穿刺针或注射器直视下抽取子宫膀胱陷凹和子宫直肠陷凹腹腔液,常温下静置,离心半径10cm,3000r/min,离心12min,取上清液置于-80℃冰箱冻存待测。

采用ELISA试剂盒检测血清和腹腔液中CA125、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的含量,操作严格按照说明书进行。检测在相同实验条件下完成,均使用同一批试剂。

1.4 统计学处理

2 结 果

2.1 EMT组与对照组患者血清CA125、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平

EMT组患者血清CA125、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),见表1。

表1 EMT组与对照组患者血清CA125、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平

2.2 EMT组与对照组患者腹腔液CA125、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平

EMT组患者腹腔液中CA125、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),见表2。

2.3 不同疾病分期EMT患者血清CA125、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平

EMT Ⅲ～Ⅳ期患者血清CA125、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平显著高于Ⅰ～Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P<0.05),见表3。

2.4 不同疾病分期EMT患者腹腔液CA125、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平

EMT Ⅲ～Ⅳ期患者腹腔液中CA125、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平显著高于Ⅰ～Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P<0.05),见表4。

表2 EMT组与对照组患者腹腔液CA125、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平

表3 不同疾病分期EMT患者血清CA125、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平

表4 不同疾病分期EMT患者腹腔液CA125、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平

3 讨 论

EMT为育龄期妇女妇科常见疾病，临床表现为盆腔慢性疼痛、不孕等，有侵袭性生长、反复发作及转移等特点，严重影响妇女的身心健康，其发病机制目前还未完全阐明，主要与经血逆流种植学说、静脉和淋巴播散学说、免疫学说等[3-4]。研究[5]发现，逆流经血中的子宫内膜细胞能够成功异位种植和存活，与腹腔免疫功能紊乱、炎性细胞因子分泌增加及盆腔内无菌性炎症反应增强有关。EMT患者血清和腹腔液中多种细胞因子参与机体的免疫调节功能，降低了对异位免疫的监视，促进血管生成，导致异位内膜的种植与生长。研究表明，异位内膜本身及其周围组织血液供应的建立和维持是EMT的发病基础。目前已发现许多肽类生长因子以自分泌或旁分泌形式促进血管内皮细胞增殖与分化，诱导新生血管形成，而EMT患者异位内膜上血管内皮细胞增生活跃，细胞因子水平明显增高。正常腹腔液中存在大量巨噬细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞等，其中巨噬细胞占90%以上，异位内膜可激发机体产生相应细胞免疫及体液免疫，导致腹腔液中巨噬细胞数量增加，活化程度增强，被激活的单核巨噬细胞产生大量的细胞因子，参与机体炎症反应与抗感染作用。

VEGF主要由腹腔内活化的巨噬细胞分泌，是目前发现特异性最高、作用最强的促血管生成因子，在血管生成、炎症反应及组织重构中起重要作用。在EMT的发生发展中，VEGF与血管内皮细胞表面特异性受体结合，促进毛细血管增生，为异位的腺上皮细胞提供营养支持，促进异位内膜的种植与生长[6]。本研究发现，EMT 患者血清和腹腔液中VEGF水平明显高于对照组，随着分期的增加，VEGF水平也相应升高，说明VEGF参与着EMT的发病过程，并与疾病的发展相关。比较腹腔液和血清中VEGF含量时发现， 腹腔液中VEGF 水平明显高于血清中水平， 推测与EMT 多发生在腹腔有关，腹腔微环境改变与EMT 发病及严重程度相关。

CA125是一种高分子糖蛋白，存在于胚胎体腔上皮，在子宫内膜、子宫颈管内膜及腹膜、胸膜组织中均可检测出[7-8]。血清CA125是上皮性卵巢肿瘤的标志物，与子宫内膜异位症密切相关。在本研究中，EMT组血清和腹腔液中CA125水平均高于对照组，随着分期的增加，CA125水平也相应升高，说明CA125参与EMT的发病过程。

当子宫内膜种植入腹腔时,常引起局部炎症环境,导致局部免疫功能减弱,不能清除逆流的内膜碎片,从而引发腹腔液中炎症反应。在此过程中，巨噬细胞等分泌的多种细胞因子分如IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α等浓度增高。

IL-1家族包括IL-1α、IL-1β及IL-1Ra，其中IL-1β多出现在血循环中，促进免疫应答,参与炎症反应。IL-6 可由表皮细胞和单核巨噬细胞表达，在机体免疫调节、炎症反应及组织修复过程中起重要作用。IL-8 可由巨噬细胞、内皮细胞等多种细胞分泌，具有多重作用，既可介导炎症反应过程，亦可诱导内皮细胞增殖和迁移，促进血管生成。腹膜间皮细胞和异位内膜间质细胞可合成IL-8 并大量释放入腹腔液中；在腹腔炎症环境中， 巨噬细胞亦可大量释放IL-8，IL-8 的高表达可诱导异位内膜基底部毛细血管的形成， 进而诱导异位内膜的增殖和浸润。IL-8可在EMT 机体子宫内膜中高表达，当经血逆流至腹腔，子宫内膜中的IL-8 可被带至腹腔，进一步提高腹腔液中IL-8 的含量[9]。TNF-α是一种由中性粒细胞、活化的淋巴细胞、巨噬细胞、NK 细胞分泌的多功能的细胞因子，它参与多种生理和免疫过程，具有抗肿瘤、免疫调节、炎症介导、细胞毒性、细胞凋亡等作用。越来越多的证据表明，免疫功能在子宫内膜异位症的发病和发展中扮演着重要的角色。TNF-α的双重生物学活性使得它在正常情况下具有抗肿瘤、抗感染等作用，对机体有利，但释放过多或与其他细胞因子的关系失调时又会引起机体一系列病理损伤，参与疾病的发病机制[10]。在本研究中，EMT组血清和腹腔液中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平均高于对照组，随着分期的增加，IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平也相应升高，说明IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α参与EMT的发病过程。

目前，腹腔镜检查是诊断EMT的“金标准”，但因其存在的有创伤、价格昂贵、手术并发症等缺点，无法普及，同时对一些盆腔重度粘连的患者，腹腔镜检查也效果不佳。经阴道超声仅对卵巢子宫内膜异位囊肿有较高的检出率，对于盆腔子宫内膜异位症、盆腔粘连及深度浸润型子宫内膜异位症检出率不高。且目前没有一种肿瘤标志物可作为早期诊断子宫内膜异位症的独立指标，因此寻求更多的联合检测指标成为新的研究方向。所以，探讨EMT患者血清及腹腔液中CA125、VEGF、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平的变化及意义， 同时参考病史、临床症状、体征及其他辅助检查方法，可以为早期发现并诊断EMT提供新的思路。

本研究病例数较少，一定程度上可能影响研究的结果和精确性。同时，没有分析各种指标联合检测的灵敏性和特异性，需要将来进一步的深入研究。

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CA125 and cytokines levels in serum and peritoneal fluid of patients with endometriosis

CAOWei-li,CHENHong

(Dept. of Obstetrics and Gynecology, Zhongnan Hospital, Wuhan University, Wuhan 430071, Hubei Province, China)

Objective To investigate the CA125 and cytokines levels in serum and peritoneal fluid of patients with endometriosis (EMT), and their clinical significance. Methods One hundred and nine EMT patients, including 45 cases of stage Ⅰ-Ⅱ and 64 cases of stage Ⅲ-Ⅳ were enrolled from 2011 January to 2015 August; 64 patients with benign gynecological diseases were also enrolled as control group. The levels of CA125, VEGF, IL-1β, IL-6, IL-8 and TNF-α in serum and peritoneal fluid were measured by ELISA method. Results The levels of CA125, VEGF, IL-1β, IL-6, L-8 and TNF-α in serum and peritoneal fluid of EMT patients were significantly higher than those in control group(allP<0.05). The level of CA125, VEGF, IL-1β, IL-6, L-8 and TNF-α in serum and peritoneal fluid of EMT Ⅲ-Ⅳ group were significantly higher than those in EMT Ⅰ-Ⅱ group(allP<0.05). Conclusion The levels of CA125, VEGF, IL-1β, IL-6, L-8 and TNF-α in serum and peritoneal fluid are increased in EMT patients and the levels are increasing with the disease stages.

endometriosis; serum; peritoneal fluid

10.16118/j.1008-0392.2016.01.018

2015-10-15

曹伟丽(1984—),女,主治医师,学士.E-mail: 2544944770@qq.com

陈 红.E-mail: chen.hong888@126.com

R 711.71

A

1008-0392(2016)01-0085-04