许光勇，王朝军，徐 利，卢纪和，赵晓旭，鲁春刚，王林峰，苏敬良，任晓明（.北京养猪育种中心，北京 0094；.中国农业大学动物医学院，北京 009；.北京农学院动物科学技术学院，北京 006）



猪口蹄疫O型灭活疫苗不同组合免疫效果

许光勇1，王朝军1，徐 利1，卢纪和1，赵晓旭1，鲁春刚1，王林峰1，苏敬良2，任晓明3
（1.北京养猪育种中心，北京 100194；2.中国农业大学动物医学院，北京 100193；3.北京农学院动物科学技术学院，北京 102206）

摘 要：试验主要通过仔猪口蹄疫母源抗体消减规律来确定仔猪口蹄疫O型灭活疫苗首免日龄，选择不同猪口蹄疫O型灭活疫苗进行组合免疫接种后，观察其免疫抗体效价水平变化，从而评价不同疫苗组合的免疫效果，对养猪生产指导具有重要意义。

关键词：O型口蹄疫；首免日龄；抗体效价；免疫效果；猪

口蹄疫（FMD）是由口蹄疫病毒感染偶蹄动物，猪感染后以体温升高，口腔黏膜、舌唇、鼻镜、蹄肢及乳房皮肤发生水泡和溃烂为特征的一种急性、热性、高度接触传染性疾病，且因其传染性极强，故世界动物卫生组织（OIE）将其列为A类动物疫病，我国将其列为一类动物传染病［1］。口蹄疫病毒共7个血清型，即O型、A型、亚洲Ⅰ型、南非1型、南非2型、南非3型和C型［2］，虽近两年在我国偶有A型口蹄疫发生，但仍以O型口蹄疫为主要流行趋势，因此防控重点应当放在O型口蹄疫。一旦猪场发生口蹄疫，造成损失主要表现在母猪流产和哺乳仔猪死亡。口蹄疫作为人畜共患病，确实对养殖业或人类健康造成威胁。当前，我国对猪口蹄疫预防与控制主要以疫苗免疫为主，结合隔离扑杀及生物安全建设为辅的综合防控措施。对猪口蹄疫的防控，市场上有猪口蹄疫三价联苗，但因其成本高，养猪业行情低迷不稳，故免疫O型口蹄疫灭活疫苗仍是主调。本试验选用不同猪口蹄疫O型灭活疫苗进行组合，通过对抗体效价变化来评价不同组合的免疫效果，从而确定最优的免疫组合方式。

1 材料与方法

1.1 试验动物

前期选择30头26日龄断奶仔猪，每窝2头，共15窝；后期选择120头刚断奶转群的保育猪，每窝8头，共15窝。试验于北京养猪育种中心猪场完成。

1.2 试验用疫苗与试剂盒

猪口蹄疫O型灭活疫苗（批号：4136049），记为疫苗I，由国内某公司提供；猪口蹄疫O型灭活疫苗（批号：5136005），记为疫苗II，由国内某公司提供；液相阻断ELISA检测试剂盒（批号：20150624101-1，20151016101-10），购自中国农业科学院兰州兽医研究所。

1.3 试验处理

猪口蹄疫O型灭活疫苗首免时间确定试验：挑选的30头断奶仔猪不免疫任何口蹄疫疫苗，分别于28日龄、35日龄、42日龄、49日龄、56日龄、63日龄和70日龄采血检测口蹄疫O型抗体效价。

猪口蹄疫O型灭活疫苗不同组合免疫试验：120头保育猪平均分为（A～D）4组，于42日龄首次免疫猪口蹄疫O型灭活疫苗1 mL，四周后加强免疫一次2 mL。其处理如下。

A组：42日龄首次肌肉注射疫苗I，剂量1 mL；70日龄再次免疫疫苗I，剂量2 mL。B组：42日龄首次肌肉注射疫苗I，剂量1 mL；70日龄再次免疫疫苗II，剂量2 mL。C组：42日龄首次肌肉注射疫苗II，剂量1 mL；70日龄再次免疫疫苗I，剂量2 mL。D组：42日龄首次肌肉注射疫苗II，剂量1 mL；70日龄再次免疫疫苗II，剂量2 mL。A-D组分别于首免前1 d、首免后21 d、二免后21 d、二免后42 d和二免后90 d采血检测口蹄疫O型抗体效价并观察过敏反应。

1.4 试验方法

口蹄疫O型抗体效价测定均采用液相阻断ELISA检测试剂盒（LB-ELISA），具体操作完全按照试剂盒说明书进行。

2 数据统计与分析

检测结果数据用EXCEL进行统计分析处理。

文化调解并不意味着译员需要对所有具有文化特性的因素进行解释。实际上，只要有可能，口译员都应该促使双方进行直接交流。如果译员的调解策略恰当，这是完全可以做到的。请看下面的例子。

3 试验结果

试验日期：2015年7月6日至2015年8月19日（第1阶段）；2015年8月26日至2015年12月24日（第2阶段）。

2015年7月6日从15窝中挑选30头26日龄断奶仔猪，每窝2头，编号为N1-N30。该30头试验仔猪不免疫任何口蹄疫疫苗，分别于28、35、42、49、56、63和70日龄采血检测口蹄疫O型抗体效价，试验期间未出现死亡，其检测结果统计如表1。

该试验场母猪群免疫口蹄疫O型灭活疫苗，每年3次，剂量2 mL/头。由表1可知，仔猪口蹄疫O型母源抗体随时间推移呈现下降趋势，在42日龄时合格率降至50%，63日龄以后母源抗体完全消失。依照仔猪口蹄疫O型母源抗体变化情况，42日龄确定为口蹄疫O型灭活疫苗首次免疫时间。

2015年8月10日挑选120头断奶仔猪，每窝8头，共15窝，平均分为4组，分别编号为A1-A30、B1-B30、C1-C30和D1-D30，于2015年8月27日仔猪42日龄首次免疫口蹄疫O型灭活疫苗1 mL，4周后二免2 mL，疫苗具体组合使用见上述试验处理部分。分别于首免前1 d、首免后21 d、二免后21 d、二免后42 d和90 d采血检测口蹄疫O型抗体效价，免疫疫苗后试验猪只未出现过敏反应。A-D组试验猪口蹄疫O型抗体效价结果见表2～表5。

表1 仔猪口蹄疫O型母源抗体效价变化情况

试验过程中A组死亡1头，2头由于溶血弃用。由表2可知，仔猪在42日龄和70日龄注射疫苗I后，其口蹄疫O型抗体水平并未上升，口蹄疫抗体合格率较低，免疫效果不佳。

试验过程中B组死亡1头，1头由于血样溶血弃用。由表3可知，仔猪在42日龄注射疫苗I后21 d，其口蹄疫抗体合格率仅有35.71%；70日龄再次注射疫苗II后21 d，其口蹄疫抗体合格率明显上升，但到130日龄后合格率有所下降。

由表4结果可知，仔猪在42日龄注射疫苗II后21 d，其口蹄疫抗体合格率仅有26.67%；70日龄再次注射疫苗I后21 d，其口蹄疫抗体合格率有所上升，但到130日龄左右时合格率仅为26.67%。

表2 A组仔猪注射疫苗前后抗体效价

4 讨论

口蹄疫O型灭活疫苗首免时间确定试验阶段，所选30头断奶试验仔猪未注射免疫任何口蹄疫疫苗，基础母猪群采取每年3次普免方式，所用疫苗为疫苗II。断奶仔猪在未免疫任何口蹄疫疫苗条件下，其口蹄疫母源抗体呈现下降趋势，在42日龄时口蹄疫O型母源抗体合格率下降至50%，在63日龄口蹄疫O型母源抗体完全消失，说明口蹄疫O型母源抗体最长可持续九周时间，并确定口蹄疫O型灭活疫苗首免时间为42日龄。该阶段试验能够科学准确地知道仔猪口蹄疫O型母源抗体效价水平和消长变化规律，即可避免首次免疫口蹄疫疫苗时间过早，使疫苗与母源抗体相互抵消，降低疫苗免疫效果，又能避免首次免疫时间过晚，出现免疫空白期，给猪群带来感染风险。该阶段试验为口蹄疫免疫程序制定或优化提供科学有效的理论依据。

待首免时间确定后，采用不同疫苗组合进行注射免疫，注射不同试验疫苗均未出现任何应激。从结果发现，A组2次均采用疫苗I注射免疫后，其抗体合格率不理想，无论是在首次免疫还是二免后，抗体效价都未得到提高，反而呈现逐步下降趋势。B组首次注射疫苗I后，其抗体合格率有所下降，然后注射疫苗II后，抗体效价明显上升，抗体合格率也明显提高，二免后90 d抗体效价和抗体合格率均下降。C组首次注射疫苗II后，抗体效价下降，抗体合格率降低至26.67%，4周后注射疫苗I后，虽然抗体合格率有所升高，但仍不理想。D组首次注射疫苗II后，抗体效价同样下降，抗体合格率为31.03%，再次注射疫苗II后，其抗体效价和抗体合格率逐步升高，并于二免后42 d达到79.31%，但在二免后90 d却降至41.38%。

表3 B组仔猪注射疫苗前后抗体效价

表4 C组仔猪注射疫苗前后抗体效价

表5 D组仔猪注射疫苗前后抗体效价

A-D组首免前抗体合格率维持在相同水平，通过A组和B组比较，二免分别选择不同疫苗，疫苗II二免后21 d抗体合格率高达78.75%，而疫苗I二免后21 d抗体合格率仅有14.81%，差异显著，说明在加强免疫时，疫苗II的效果是好于疫苗I的。C组和D组比较，首次免疫均选择疫苗II，而二免选择不同疫苗，同样发现二免疫苗II效果优于疫苗I，且二免选择疫苗I其抗体合格率呈现下降趋势，在二免后90 d抗体合格率分别为26.67%和41.38%，差异显著。通过A组和C组比较，二免疫苗相同，首免疫苗分别为疫苗I和II，首免后21 d疫苗I和II免疫抗体合格率分别为33.33% 和26.67%。B组和D组比较，首免后21 d疫苗I和II免疫抗体合格率分别为35.71%和31.03%。另外，无论是何种组合免疫，在二免后90 d（约130日龄）其抗体效价和抗体合格率均处于较低水平。由此可见，首次免疫选择疫苗I效果更佳，出现这样结果极有可能是因为疫苗II中抗原含量比疫苗I中抗原含量要高，首次免疫时更大程度上中和了一部分母源抗体的结果，而四周后加强免疫所受母源抗体干扰较小，且后期饲养周期长，故疫苗II更适于加强免疫。

5 结论

通过不同试验组结果对比可知，首次免疫可以选择疫苗I或降低疫苗II免疫注射剂量，但是结合猪场成本考虑，首次免疫应该是选择疫苗I最佳，因为疫苗I为零成本疫苗；而4周后加强免疫可选择疫苗II接种。综合分析A-D组得知，B组免疫效果应该是最佳的。

参考文献

［1］ 许光勇，徐利，卢纪和，等.猪口蹄疫三价灭活疫苗免疫效果观察［J］.养猪，2013（5）：110-112.

［2］ 谢庆阁.口蹄疫［M］.北京：中国农业出版社，2004：13-15.

基金项目：北京三元种业科技股份有限公司自立课题（课题编号SYZYZ20150005）

作者简介：许光勇，男，江西金溪人，兽医师，在读博士研究生，主要从事规模化猪场生产管理和猪病防控研究。E-mail：vetbbsc@163.com

收稿日期：（2016-01-19）