高效液相色谱法测定饮料中合成色素不确定度评估

2016-05-30任志彬

邢台学院学报 2016年2期

关键词：不确定度

王　蕾，任志彬

（1.邯郸出入境检验检疫局，河北邯郸　056017；2.河北工程大学农学院，河北邯郸　056038）

高效液相色谱法测定饮料中合成色素不确定度评估

王蕾，任志彬

（1.邯郸出入境检验检疫局，河北邯郸056017；2.河北工程大学农学院，河北邯郸056038）

摘要：根据SN/T 1743-2006《食品中诱惑红、酸性红、亮蓝、日落黄的含量检测高效液相色谱法》方法，利用高效液相色谱测定饮料中合成色素的含量，通过分析不确定度来源，建立测量过程的数学模型。

关键词：诱惑红；亮蓝；日落黄；不确定度

合成色素具有色泽鲜艳，着色力强，稳定性好，易溶于水，易调色，品质均一，成本低廉等优点，目前已得到广泛应用。不确定度作为与检测结果相联系衡量检测水平高低的参数，越来越受到世界各国的重视。本文根据SN/T 1743-2006［1］方法，利用配有紫外检测器的高效液相色谱仪检测饮料中的诱惑红、亮蓝、日落黄三种合成色素，进行加标回收实验，建立数学模型，讨论测定过程中各分量对检测结果的不确定度贡献［2-4］，通过不确定度评估［5］，发现对实验结果影响较大的因素，通过改进减少误差，提高检测结果准确性。

1　材料与方法

1.1仪器与试剂

Waters e2695高效液相色谱仪配紫外检测器，C18反相色谱柱。诱惑红［GBW（E）100164］、亮蓝［GBW（E）100162］、日落黄［GBW（E）100159］，由北京海岸鸿蒙标准物质技术有限责任公司提供。

1.2高效液相色谱分析条件

甲醇/乙酸铵（0.02mol/L）淋洗液梯度洗脱：甲醇20%～35%，3%/min；35%～98%，9%/min；98%～98%，继续6min。进样量：10uL；检测波长：254nm；柱温：室温。

1.3样品测定方法

依据SN/T 1743-2006［1］，取50g饮料样品，加热驱除二氧化碳，然后用水稀释定容至50mL，经0.45um滤膜过滤后供液相色谱分析，外标法定量。

1.4计算公式

式中：

X——样品中色素的含量，单位为克每千克或克每升（g/kg或g/L）；

m——样液中色素的量，单位为微克（ug）；

M——样品量，单位为克或毫升（g或mL）；

V1——样品稀释总体积，单位为毫升（mL）；

V2——进样体积，单位为毫升（mL）。

1.5不确定度来源分析

（1）样品处理时，称量ure（m）和定容urel（V50mL）引入的不确定度。

（2）高效液相色谱仪引入的不确定度。

（3）标准溶液引入的不确定度。

（4）重复测量引入的不确定度。

2　不确定度评定

2.1称量引入的不确定度urel（m）

应用分度值为10mg的分析天平，称量样品50.00g，查阅天平检定证书，在0～50g范围内，天平的误差为0.005g，按照矩形分布，由天平称量导致样品质量的不确定度按均匀分布为：

2.2定容引入的不确定度urel（V）

样品定容引入的不确定度因素主要包括50 mL容量瓶体积校准和温度变化两个方面。

根据JJG 196-2006［6］，A级50 mL容量瓶允许的最大允差为±0.05mL，假设为矩形分布，其相对不确定度为：

实验中控制室温为20℃±5℃，水的体积膨胀系数为2.1×10-4/℃，按照矩形分布则u（V2）=

2.3高效液相色谱仪引入的不确定度urel（Y）

实验使用Waters e2695高效液相色谱仪，检定证书给出在k=2时，标准不确定度为0.2%，其引起的相对标准不确定度分量为0.001。

2.4标准溶液引入的不确定度urel（C）

本实验所用的三种标准品，诱惑红［GBW（E）100164］、亮蓝［GBW（E）100162］、日落黄［GBW（E）100159］的相对扩展不确定度均为1%（k=2），则由标准品纯度引入的不确定度为0.005。

标准溶液原液浓度为1mg/mL，5mL/支，将其配制成浓度梯度为10ug/mL，20ug/mL，30ug/mL，40ug/mL，50ug/mL的标准溶液工作曲线。配置过程中的不确定度主要由20-200uL、100-1000uL移液器和10mL容量瓶引入。查仪器设备校准证书得移液器的扩展不确定度均为0.6%（k=2），根据JJG196-2006［6］，算法同2.2，10mL容量瓶引入的不确定度为0.00115，则由标准溶液配制引入的不确定度为：u（C2）=

标准溶液引入的相对不确定度urel（C）=

2.5重复测量引入的不确定度urel（S）

用浓度为1μg /mL人工色素标准溶液进行加标回收率的测定，其前处理及测定过程与实际饮料样品一致，重复7次。由贝塞尔公式法得到：