冯建江

(江门市妇幼保健院，广东 江门　529000)



江门地区地中海贫血基因缺失情况及点突变分布研究*

冯建江

(江门市妇幼保健院，广东 江门529000)

摘要：目的分析探讨江门地区地中海贫血基因缺失情况及点突变分布状况，为地中海贫血提供相关资料。方法选取我院2012年7月~2014年10(2014年1月~2014年12月)月接收的门诊及住院的确诊为地中海贫血的患者150(1385)例，使用PCR结合反向点杂交(RDB)技术与GAP-PCR方法对基因进行诊断，确定出地中海贫血基因缺失的原因以及点突变情况。结果江门地区共检出α地中海贫血基因类型主要包括-(SEA)/αα、的αα/-α(3.7)、αα/-α(4.2)、-(SEA)/-α(3.7)、-(SEA)/-α(4.2)、αcsα/αα、α(QS)α/αα、αwsα/αα、-α3.7/-α3.7、-α3.7/-α4.2、α(QS)α/-α(4.2)(-(SEA)/αα、αα/-α(3.7)、αα/-α(4.2)、-(SEA)-α(3.7)、-(SEA)/-α(4.2)、α(cs)α/αα/、αα/α(QS)α/αα/α(ws)α/αα)；江门地区共检出β地中海贫血基因类型53(378)例，β地中海贫血基因类型主要包括CD41-42(-TCTT)、CD17(A→T)、IVS2-654(C→T)、-28(A→G)、CD71-72(+A)、CD41-42/CD41-42、CD41-42/CD17、CD27/28(CD41-42(-TCTT)、CD17(A→T)、IVS2-654(C→T)、-28(A→G)、CD71-72(+A)、CD26(CAG>AAG)、CD43(G>T)。结论江门地区α地中海贫血基因、β地中海贫血基因主要类型分别为-(SEA)/αα、CD41-42(-TCTT)。

关键词：江门地区；地中海贫血基因缺失；点突变

地中海贫血属于一种常染色体不完全显性(隐性遗传)而造成的遗传性疾病，主要是由于患者体内珠蛋白基因发生突变，才抑制了珠蛋白的链合导致的溶血性贫血，在我国南方地中海贫血病症较为常见[1]。以我院2012年7月~2014年10月(2014年1月~2014年12月)接收的150(1385)例门诊及住院的确诊为地中海贫血的患者为研究对象，对江门地区儿童地中海贫血诊断提供初步的依据，并对地中海贫血基因缺失以及点突变分布情况进行了分析，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选取我院2012年7月~2014年10月(2014年1月~2014年12月)接收的门诊及住院的确诊为地中海贫血的患者150(1385)例。年龄为0~38岁，患者均来源与江海区、蓬江区、新会区以及台山市、鹤山市、开平市、恩平市等。

1.2 方法

1.2.1 检测仪器与试剂 地中海贫血基因检测仪器分别使用DYY-2C(DYY-8C)型电泳仪、DA7600荧光定PCR仪、DYCP-31型系列水平电泳仪、SHZ-88水浴恒温振荡器、GSG-2000核酸/蛋白凝胶图像分析管理系统等进行。检测试剂主要使用亚能公司提供的α-地中海贫血点突变基因诊断试剂盒、亚能公司提供的α-地中海贫血基因检测试剂盒、亚能公司提供的β-地中海贫血基因诊断试剂盒、DNA提取液等[1]。

1.2.2 检测方法 对筛查后为阳性的地中海贫血患者使用PCR结合反向点杂交(RDB)技术与GAP-PCR方法对基因进行诊断，对患者的地中海贫血基因缺失情况以及点突变类型进行检测。

1.3统计学方法

2结果

2.1 江门地区α地中海贫血基因分布情况

江门地区共检出α地中海贫血基因类型97例，α地中海贫血基因类型主要包括-SEA/αα67例，占α地中海贫血基因类型地69.07%；αα/-α3.79例，占9.27%；αα/-α4.26例，占6.18%；-SEA/-α4.24例，占4.12%；-SEA/-α4.23例，占3.09%；αCSα/αα2例，占2.06%；αQSα/αα2例，占2.06%；αWSα/αα1例，占1.03%；-α3.7/-α3.71例，占1.03%；-α3.7/-α4.21例，占1.03%；αQSα/-α4.21例，占1.03%。(江门地区共检出α地中海贫血基因类型964例，α地中海贫血基因类型主要包括/-SEA/αα648例，占α地中海贫血基因类型的69.07%；αα/-α3.7143例，占9.27%；αα/-α4.270例，占6.18%； αCSα/αα38例，占3.94%；αQSα/αα15例，占1.55%；αWSα/αα16例，占1.65%；-SEA/-α3.77例，占0.72%；-SEA/-α4.25例，占0.52%。)

2.2 江门地区β地中海贫血基因分布情况

江门地区共检出β地中海贫血基因类型53例，β地中海贫血基因类型主要包括CD41-42(-TCTT)25例，占47.16%；CD17(A→T)6例，占11.32%；IVS2-654(C→T)5例，占9.43%；-28(A→G)5例，占9.43%；CD71-72(+A)4例，占7.54%；CD41-42/CD41-42为3例，占5.66%；CD41-42/CD17为3例，占5.66%；CD27/28为2例，占3.77%。(江门地区共检出β地中海贫血基因类型378例，β地中海贫血基因类型主要包括CD41-42(-TCTT)157例，占41.50%；CD17(A→T)51例，占13.5%；IVS2-654(C→T)82例，占21.7%；-28(A→G)44例，占11.6%；CD71-72(+A)13例，占3.4%；CD26 (CAG>AAG)8例，占2.1%；CD43 (G>T)4例，占1.1%；CD41-42/CD41-42为2例，占0.52%；CD41-42/CD17为2例，占0.52。)

2.3江门地区α复合β地中海贫血基因分布情况

江门地区共检出α复合β地中海贫血基因类型43例，α复合β地中海贫血基因类型主要包括-SEA/αα复合CD41-42 12例,占27.9%,αα/-α3.7复合CD41-427例,占16.2%.

3讨论

血红蛋白主要由血红素以及珠蛋白构成，其中珠蛋白包含4个蛋白质链，可以侯成1个4聚体，其中每一个蛋白链均可以根据自身基因的遗传信息进行合成，当机体的基因结构存在一定的缺陷时，会造成蛋白链不能正常合成或者合成数量下降的情况，如果不能进行珠蛋白的合成就会对血红蛋白的合成情况造成影响[2]。α-珠蛋白基因中最常见的突变类型是缺失突变，其缺失的范围以及差异相对较大，范围从几kb-100 kb以上，可以累及1-2个α-珠蛋白基因的完全缺失。经研究发现在全球范围中已经鉴定出不少于35中类型的缺失突变，其中6类属于α-地贫2突变、29类属于α-地贫1突变。括-SEA缺失型突变可以称为东南亚型突变，已经累及月20 kb，跨越了珠蛋白基因簇上的“ψα2-ψα1-α2-α1-θ1”[3]区间，括-SEA也是我国南方、香港、台湾以及东南亚等地区较为常见的类型。α-地贫2基因突变的类型中所包括的-α4.2以及-α3.7也是我国较为常见的α-珠蛋白基因缺失突变[4]。β地中海贫血主要是因为β-珠蛋白基因中的某个基因点发生改变，也就是说点突变不是指的大的缺失，突变会对β-珠蛋白的缺失或者β-珠蛋白的合成[4]造成一定的影响。

本研究选取我院2012年7月~2014年10月(2014年1月~2014年12月)接收的江门地区门诊及住院的确诊为地中海贫血的患者150(1385)例进行检测与研究后发现，江门地区共检出α地中海贫血基因类型97例，α地中海贫血基因类型中主要包括69.07%的-SEA/αα；9.27%的αα/-α3.7；6.18%的αα/-α4.2；4.12%的-SEA/-3.7-；3.09%的-SEA/-α4.2；2.06%的αCSα/αα；2.06%的αQSα/αα；1.03%的αWS/；1.03%的-α3.7/-α3.7；1.03%的-α3.7/-α4.21.03%的-αQSα/-α4.2(江门地区共检出α地中海贫血基因类型964例，α地中海贫血基因类型主要包括-SEA/αα648例，占α地中海贫血基因类型的69.07%；αα/α3.7-143例，占9.27%；αα/-α4.270例，占6.18%； αCSα/αα38例，占3.94%；αQSα/αα15例，占1.55%；αwsα/αα16例，占1.65%；-SEA/-α3.77例，占0.72%；-SEA/-α4.25例，占0.52%。)；江门地区共检出β地中海贫血基因类型53例，β地中海贫血基因类型主要包括47.16%CD41-42(-TCTT)；11.32%CD17(A→T)；9.43%IVS2-654(C→T)；9.43%-28(A→G)；7.54%CD71-72(+A)；5.66%CD41-42/CD41-42；5.66%CD41-42/CD17；3.77%CD27/28(江门地区共检出β地中海贫血基因类型378例，β地中海贫血基因类型主要包括CD41-42(-TCTT)157例，占41.50%；CD17(A→T)51例，占13.5%；IVS2-654(C→T)82例，占21.7%；-28(A→G)44例，占11.6%；CD71-72(+A)13例，占3.4%；CD26(CAG>AAG) 8例，占2.1%；CD43 (G>T)4例，占1.1%；CD41-42/CD41-42为2例，占0.52%；CD41-42/CD17为2例，占0.52)。目前，对地中海贫血的治疗还没有研发出较为有效的治疗手段，而且地中海贫血具有遗传性，因此要加强对地中海贫血患儿的出生进行预防，如果医院内的新生儿出现地中海贫血情况及时进行不间断的输血来延长患儿的生命，但是不能对患儿的病情进行控制，而且进行造血肝细胞的移植造价十分高昂，而且其技术要求也较高，对地中海贫血患者的家庭经济负担造成了极大的影响，也对患者的身体健康造成了威胁，并且我们发现点突变型α地中海贫血基因在江门人群中的携带率也不少,一旦αcsα/ 和 αQSα合并SEA/会发生比较重的中间型α地中海贫血.因此我们要加强 对基因检查的力度增加其费用(删除增加费用)，减少地中海贫血患儿的出生率。

综上所述，江门地区地中海贫血基因缺失(突变)情况较为严重，其中α地中海贫血基因、β地中海贫血基因主要类型分别为-SEA/αα、αα/-α3.7与CD41-42(-TCTT)、CD17(A→T)(IVS2-654(C→T)。

参考文献：

[1]范联,林业辉,周杏，等.佛山地区地中海贫血基因型的调查研究[J].中华全科医学2013,11(4):593,620.

[2]邓国生,罗宇迪,张宁等.玉林地区地中海贫血基因缺失和点突变分布的探讨[J].中华全科医学2011,09(1):122-123.

[3]梁汉彰.PCR联合RDB技术检测β-地中海贫血基因结果分析[J].海南医学2013,24(16):2403-2405.

[4]胡静云,陈善昌,陈栋等.178例孕妇β-珠蛋白生成障碍性贫血基因突变类型分析[J].国际检验医学杂志2013,34(2):220-220.

Discussion in Jiangmen thalassemia gene deletion mutation situation and Distribution

FENGJian-jiang

(Jiangmen City, MCH,Jiangmen 529000,China)

Abstract:Objective: To investigate the Jiangmen area thalassemia gene deletion mutation and distribution, to provide relevant information to the Mediterranean anemia. Methods: in our hospital in July 2012 ~ 2014, 10 (January 2014 - December 2014) month received outpatient and hospitalized patients diagnosed with thalassemia 150 (1385) cases, the use of PCR and reverse dot blot (RDB) technology with GAP-PCR method for gene diagnosis, determine the cause of thalassemia gene deletion and point mutations. Results: Jiangmen region were detected in α-thalassemia gene type including -(SEA)/αα、的αα/-α(3.7)、αα/-α(4.2)、-(SEA)/-α(3.7)、-(SEA)/-α(4.2)、αcsα/αα、α(QS)α/αα、αwsα/αα、-α3.7/-α3.7、-α3.7/-α4.2、α(QS)α/-α(4.2)(-(SEA)/αα、αα/-α(3.7)、αα/-α(4.2)、-(SEA)-α(3.7)、-(SEA)/-α(4.2)、α(cs)α/αα/、αα/α(QS)α/αα/α(ws)α/αα); Jiangmen area were detected β-thalassemia gene type 53 (378) cases, β-thalassemia gene type including CD41-42 (-TCTT), CD17 ( A → T), IVS2-654 (C → T), -28 (A → G), CD71-72 (+ A), CD41-42 / CD41-42, CD41-42 / CD17, CD27 / 28 (CD41- 42 (-TCTT), CD17 (A → T), IVS2-654 (C → T), - 28 (A → G), CD71-72 (+ A), CD26 (CAG> AAG), CD43 (G> T ) Conclusion: Jiangmen region α-thalassemia gene, β thalassemia major types are -(SEA)/αα, CD41-42 (-TCTT).

Key words:in Jiangmen; thalassemia gene deletion; point mutation

(收稿日期2015-11-25)

doi:10.3969/j.issn.1004-7115.2016.02.008

中图分类号：R394

文献标识码：A

文章编号：1004-7115(2016)02-0141-03

*作者简介：冯建江(1981—)，男，广东鹤山人，主管技师，本科，主要从事检验分子遗传病研究工作。