文∕王建勇 潘远达 吴谢华 尹医祥

（上海光明荷斯坦牧业有限公司）

目前我国奶牛养殖业处于快速发展期，大型牧场建设如雨后春笋般涌现，国内良种奶牛数量已经远远不能满足需求，只好用较高的价格从国外进口奶牛。如何利用好国内现有的优质高产奶牛群体快速扩繁是摆在养牛人面前的现实课题，而性别控制技术的实现和成熟使得这一愿望变为了现实。性控冻精是通过精子分离技术分离出来的，可以人为控制遗传性别的精液。XY精子分离技术已经进入商业化运作阶段，是当今最先进的性别控制技术。

由于性控冻精在制作上经过了分离处理，精子数较少（200 万～240 万个/支)，约为常规冻精精子数的1/4。另外，性控冻精在精子分离过程中，精子能量有所消耗，输入子宫后，在子宫内存活的时间要比常规冻精时间短。因此，性控冻精情期受胎率比常规冻精要低。为了探讨不同因素对奶牛性控冻精受胎率的影响，本文根椐本公司所属牧场2013年12月～2014年2月对性控冻精的使用情况进行了综合分析。

1 试验材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 性控冻精

选择美国育种公司遗传基因优秀的验证公牛性控冻精。精液质量及活力:规格为0.25 mL细管，每支冻精X精子数200 万～240 万个，解冻后精子活力0.35～0.41。

1.1.2 试验牛只

本公司所属牧场的14～16 月龄青年牛，健康、营养均衡且生殖系统发育正常。

1.2 试验方案

1.2.1 试验时间

2013年12月～2014年2月。

1.2.2 发情鉴定

首先根据奶牛接受爬跨（站立发情）为0计时，再结合直肠检查判定卵泡的发育状况和黏液的性质来确定奶牛所处的发情状态。

1.2.3 解冻方法

冻精从液氮罐取出后在35 ℃温水水浴40 s，在最快的时间内进行输精。

1.2.4 输精方法

采用直肠把握子宫颈输精法，操作时按照动作轻柔、无污染、无损伤的原则进行。输精部位分为子宫体内和有卵泡侧子宫角。

1.2.5 妊娠诊断

配种后30 天先用血检的方法进行早孕检测，最后在配种后60～70 天进行直肠检查验胎，确定是否有胎。

1.2.6 繁殖记录

参加配种的牛只繁殖信息全部记录在繁殖资料和配种记录本上，要求详细记录奶牛的发情表现，所用公牛号，配次，发情状况（自然发情、激素催情），输精部位等。

表1 不同种公牛性控冻精的受胎率

表2 不同配种员2013 年12 月～2014 年2 月所配母牛的受胎率

2 试验结果与分析

2.1 性控冻精受胎率

从2003年12月～2014年2月，共有2 515 头次的青年后备牛参加配种，受孕牛只为1 525 头，总情期受胎率60.6%。其中性控冻精输精779 头次，受孕405 头，情期受胎率52.0%；常规冻精输精1 736 头次，受孕1 120 头，情期受胎率64.5%。

2.2 不同种公牛性控冻精受胎率的分析

种公牛影响与配母牛的受胎率，对不同种公牛受胎率进行分析。不同的种公牛精液经分离、冷冻、解冻后，精子活力、存活时间有比较大的差异，给母牛输精后在受胎率上也反映出这方面的差异，不同种公牛性控冻精的受胎率差异显著（表1）。

2.3 不同配种员的受胎率

配种员对受胎率有较大的影响，为了研究其效应，对部分配种员在2013年12月～2014年2月期间所配母牛的受胎率进行了统计分析（表2）。

从分析结果可知，同一品种性控冻精由不同配种员进行受精，受胎率存在明显差异。这是由于配种员在发情鉴定、适时输精把握、输精技术熟练度等技能上存在差异。

此外，大型规模牧场由于配种头数相对较多，配种时间集中，其配种各项技术环节难以精细化，特别是在适时输精的掌控上。

2.4 不同输精部位对受胎率的影响

从表3的结果可以看出，卵泡侧子宫角输精受胎率显著高于子宫体输精，由于性控冻精在制作上经过了分离处理，精子数较少，子宫角深部输精可以提高进入输卵管壶腹部的精子数，有助于提高受胎率，距离受精部位（输卵管壶腹部）越近，情期受胎率越高。

表3 不同输精部位的受胎率比较

2.5 奶牛不同发情状态对受胎率的影响

从胡桥牧场奶牛不同发情状况性控冻精的受胎率结果可以看出，PG催情的受胎率与自然发情的差异不显著（表4）。

表4 胡桥牧场不同发情状况性控冻精的受胎率

表5 德州牧场不同配次性控冻精的受胎率

2.6 不同配次对受胎率的影响

德州牧场不同配次性控冻精的受胎率结果表明，后备牛第一情期性控冻精的受胎率高于第二情期受胎率，但差异不显著（表5）。使用性控冻精的目的是快速扩繁，后备牛第二情期如果也使用性控冻精，可加大扩繁速度。

3 讨论

3.1 性控冻精与常规冻精受胎率

从2003年12月～2014年2月，本公司所属牧场共有779 头次青年牛使用性控冻精输精，性控冻精情期受胎率52.0%。另有1 736 头次使用常规冻精输精，受胎率为64.5%，性控冻精受胎率为常规冻精的80.0%，差异显著。0.25 mL的常规冻精有效精子数约800 万个，体外25 ℃存活时间一般达12 h，性控冻精有效精子数约230 万个，存活时间约8 h，这是性控冻精受胎率较低的因素。

3.2 解决性控冻精受胎率制约性因素的措施

从本试验结果分析，冻精品种、配种员技术水平、输精部位、不同发情状态、配次等因素均影响性控冻精的受胎率，其中以输精部位对性控冻精受胎率影响更显著。由于奶牛性控冻精价格相对较高，且受胎率比常规冻精低，所以在使用性控冻精时应严格采取以下措施，有效提高性控冻精的受胎率。

3.2.1 严格选购优质性控冻精

选购性控冻精时，应选购信誉度好，技术力量雄厚的育种公司产品，不仅要关注育种值，同时要重视配种受胎率、产犊难易度、女儿怀孕率等信息。

3.2.2 严格选择受配母牛

严格选择受配母牛对提高性控冻精受胎率非常必要，以14～16 月龄后备牛最好，牛只健康、营养状况良好、生殖系统发育正常。输精次数3 次以上的母牛不宜使用。

3.3.3 输精部位应选择卵泡侧子宫角输精

本试验结果表明，卵泡侧子宫角输精，可以显著提高进入输卵管壶腹部的精子数，有助于提高受胎率。但采用子宫角输精，容易损伤子宫粘膜，因此，要求输精操作技术娴熟，严格无菌操作。