耿 薇，郑敏燕，尚永辉，张君才

(咸阳师范学院化学与化工学院，陕西咸阳712000）

分析测试

樱桃仁的脂肪酸组成与含量分析*

耿 薇，郑敏燕，尚永辉，张君才

(咸阳师范学院化学与化工学院，陕西咸阳712000）

用气相色谱-质谱联用（GC-MS）测定樱桃仁中的脂肪酸含量，用外标法与峰面积归一法两种方法进行定量分析。樱桃仁以不饱和脂肪酸为主，樱桃仁中单不饱和脂肪酸36.24%，多不饱和脂肪酸44.04%。樱桃仁中四种脂肪酸含量：亚油酸＞油酸＞棕榈酸＞硬脂酸。

樱桃仁；外标法；峰面积归一法；气质联用；脂肪酸

樱桃为蔷薇科樱桃属落叶乔木果树。由于樱桃成熟期早，果实营养丰富，具有上市早、单位面积产值高、市场需求量大的优势。在《滇南本草图说》、《本草再新》等中医药专著中,认为樱桃果核仁具有发表透疹、消瘤去瘢、行气止痛等功能。樱桃仁中含有多种药用活性成分，脂肪酸就是其中之一。脂肪酸是人体不可缺少的营养成分之一，与健康密切相关[1-3]。已有报道用峰面积归一法分析樱桃仁中的脂肪酸含量[3，4]，本文用气相色谱-质谱联用的外标法与峰面积归一法两种方法分别对樱桃仁中的脂肪酸含量进行定量分析。

1 实验部分

1.1 仪器和试剂

GCMS-QP2010气相色谱-质谱联用仪（日本岛津SHIMADZU制作所）；101型电热鼓风干燥箱（北京科伟永兴仪器有限公司）；Sartorius CP124S电子天平（Max 120g，d=0.1mg）；10μL微量进样器（澳大利亚SGE）；RE-52AA旋转蒸发器（上海嘉鹏科技有限公司）；20～200μL移液器（ThermoFinnpipette）；SHB-IIIA循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；索氏提取器；SB4200DTD超声波清洗机（宁波新芝生物科技股份有限公司）；DF-101S集热式恒温加热磁力搅拌器（河南省予华仪器有限公司）；标准检验筛（40目，孔径0.45mm）；HR7625飞利浦食品加工机。

樱桃仁，乙醚，正己烷，KOH，甲醇，H2SO4，棕榈酸，油酸，亚油酸，硬脂酸。

所用试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。

1.2 分析条件

气相色谱条件：J&W DB-WAX弹性石英毛细管色谱柱（30m×0.25mm×0.25μm）；载气为高纯He，纯度≥99.999%；进样口温度250℃；分流比1∶30，柱前压84.6kPa，柱流量1.00mL·min-1；柱温：130～240℃。柱初温130℃，保持1 min，以20℃·min-1升温至230℃，保持5min，再以20℃·min-1升温至240℃，保持6.5min，共18.00min。用微量进样器进样1.0μL。

质谱条件：EI离子源，质量扫描范围29～450m·z-1，质谱检测起测时间1.7min，溶剂峰切除时间1.6min。GC-MS接口温度200℃，离子源温度200℃，电子倍增器电压0.97kV，电子能量70eV[3]。

1.3 樱桃仁油的提取

将樱桃仁烘干粉碎，过40目筛。称取样品，移入滤纸筒内，以乙醚作溶剂，采用索式提取器，30℃恒温水浴回流3h。倒出上清液，抽滤，将滤液放置旋转蒸发仪上，蒸干乙醚后，得到樱桃仁油样品。

1.4 峰面积归一法

样品的甲酯化：准确称量樱桃仁油于50mL圆底烧瓶中，准确加入正己烷-乙醚（2∶1）溶液10.0mL，再加0.5mol·L-1KOH-甲醇溶液6.0mL，振荡，60℃恒温水浴回流进行酯化反应20min。加水至25mL，振荡并静置，吸取上层脂肪酸甲酯，进行GC-MS分析。

1.5 外标法

1.5.1 脂肪酸的甲酯化准确称量脂肪酸或样品于25mL比色管中，准确加入1%H2SO4-甲醇溶液2.0mL，于70℃水浴加热60min。再加正己烷定容至10mL，加水至25 mL，振荡，静置24h，吸取上层脂肪酸甲酯，进行GC-MS分析。

1.5.2 脂肪酸标准溶液的配制选取常见的4种脂肪酸：棕榈酸，油酸，亚油酸，硬脂酸。准确称量4种脂肪酸的7份标准系列于25mL比色管中，按1.5.1配制成标准溶液，进行GC-MS分析。

2 结果与讨论

2.1 峰面积归一法分析结果

图1 为樱桃仁中脂肪酸分析的GC-MS总离子流图，对谱图进行鉴定和定量分析,应用SHIMADZU GCMSsolution Release 2.10专业分析软件。

图1 樱桃仁中脂肪酸分析的GC-MS总离子流图Fig.1TIC of GC-MS of fatty acids from the cherry kernel

根据质谱图计算机检索数据库NIST 147数据库进行检索，通过对照标准谱图，及质谱碎片对峰的分析，确定每一个组分的化学结构[3]。采用计算机检索与人工解析各峰相应的质谱图，用峰面积归一法测定了脂肪酸的相对含量，结果见表1。

表1 樱桃仁中脂肪酸的组成Tab.1The composition of fatty acids from the cherry kernel

2.2 外标法分析结果

2.2 .1 四种脂肪酸的标准曲线

图2 为4种脂肪酸标准品的GC-MS总离子流图。绘制4种脂肪酸的标准曲线。

图2 4 种脂肪酸标准品的GC-MS总离子流图Fig.2TIC of GC-MS of the four standard substance of fatty acids

2.2 回收率与精密度

准确称取样品（5份）于25mL比色管中，分别加入棕榈酸、油酸、亚油酸、硬脂酸标准品，按1.5.1配制溶液，进行分析。表2是樱桃仁样品中4种脂肪酸含量的回收率与精密度。

表2 4 种脂肪酸的回收率与精密度Tab.2Recovery and precision of four fatty acids

2.3 样品分析结果

图3 为樱桃仁中脂肪酸分析的GC-MS总离子流图。

图3 樱桃仁中脂肪酸分析的GC-MS总离子流图Fig.3The TIC of GC-MS of fatty acids from the cherry kernel

表3为樱桃仁中4种脂肪酸的含量。

表3 樱桃仁中4种脂肪酸的含量Tab.3The content of four fatty acids from the cherry kernel

3 讨论

对比外标法与峰面积归一法两种方法分析樱桃仁中的脂肪酸含量，峰面积归一法较简单易行，是相对定量，樱桃仁以不饱和脂肪酸为主，樱桃仁中单不饱和脂肪酸36.24%，多不饱和脂肪酸44.04%。外标法是绝对定量，需要标准样品，做标准曲线，准确度较高，樱桃仁中4种脂肪酸含量：亚油酸＞油酸＞棕榈酸＞硬脂酸。

［1］魏永生，郑敏燕，耿薇，等.常用动、植物食用油中脂肪酸组成的分析［J］.食品科学，2012,33（16）：188-193.

［2］吴惠勤，黄晓兰，林晓珊，等.脂肪酸的色谱保留时间规律与质谱特征研究及其在食品分析中的应用［J］.分析化学，2007，35（7）：998-1003.

［3］郑敏燕，宁建刚，耿薇，等.两种不同酯化方法分析樱桃仁中的脂肪酸成分［J］.应用化工,2010,39（1）：133-135.

［4］姚宏亮，蒋胜慧，刘成花.樱桃仁油的提取工艺研究及其脂肪酸成分分析［J］.粮食与食品工业，2012，19（1）:30-32.

Fatty acid analysis of cherry kernel*

GENG Wei，ZHENG Min-yan，SHANG Yong-hui，ZHANG Jun-cai
（School of Chemistry and Chemical Engineering,Xianyang Normal University,Xianyang 712000，China）

This article analyzed the fatty acid in cherry kernel by GC-MS，comparing external standard method and peak area normalisation method to analyze quantitatively.There are different kinds of fatty acid in cherry kernel.The main kind is unsaturated fatty acid.The cherry kernel had 36.24%unsaturated fatty acid and 44.04%polyunsaturated fatty acid.The content of the four fatty acids in cherry kernel:linoleic acid＞oleic acid＞palmitic acid＞stearic acid.

cherry kernel；external standard method；peak area normalization method；GC-MS；fatty acid

O657.7

A

10.16247/j.cnki.23-1171/tq.20150318

2014-11-12

咸阳师范学院专项科研基金项目（14XSYK017）

耿薇（1982-），女，硕士，工程师，主要从事分析测试方面的研究工作。