何珺，谢述琼，杨佳年，陈伟

（1.贵州省生化工程中心，贵州贵阳550025；2.贵州理工学院，贵州贵阳550025）

12种十字花科蔬菜种子中萝卜硫素含量研究

何珺1，谢述琼2，*，杨佳年1，陈伟1

（1.贵州省生化工程中心，贵州贵阳550025；2.贵州理工学院，贵州贵阳550025）

采用HPLC测定十二种常见十字花科蔬菜种子中萝卜硫素含量，该十二种十字花科蔬菜种子中萝卜硫素含量是芸薹属＞萝卜属；芸薹属中西兰花种子的萝卜硫素含量最高，为10.02 mg/g，大头菜种子中含量最低为17.4 μg/g；萝卜属中胡萝卜种子中的萝卜硫素含量最高，为144.4 μg/g，白萝卜种子的含量最低，为8.7 μg/g。

十字花科植物；种子；萝卜硫素

十字花科植物包括330多个属，约3700多种，除南极洲外各大洲均有分布，尤以北温带分布最多［1］。我国的十字花科植物品种主要有花椰菜、西兰花、甘蓝、萝卜、白菜、大头菜、芥菜等［2］。近年来关于十字花科蔬菜具有防癌作用的报道很多，日本研究人员和美国专家组研究证明十字花科蔬菜里确实含有抗癌物质［3］——萝卜硫素。

国际上多年的流行病学调查发现，经常食用十字花科芸薹属蔬菜居民的胃癌、食管癌及肺癌的发病率较低，硫甙及降解产物确实具有抗癌特性［4］。研究表明，某些硫代葡萄糖甙的降解产物对肺癌、大肠癌、肝癌和胃癌具有保护性预防作用［5］。随着研究的深入，人们发现萝卜硫素不仅可以抑制并杀死癌细胞，还具有抗菌、提高机体抗氧化能力和免疫力等药理作用［6］。因此，萝卜硫素对于人类的抗癌药物的研究具有重要的意义。

本文以十二种常见的十字花科蔬菜的种子为原料，包括芸薹属：大头菜、菜心、芥菜、莲花白、嫩儿菜、牛心甘蓝、结球甘蓝、西兰花；萝卜属：白萝卜、青萝卜、红萝卜、胡萝卜，对这十二种十字花科蔬菜种子中萝卜硫素含量进行测定研究，以对这些常用十字花科蔬菜种子中萝卜硫素含量进行初步了解。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 材料

大头菜、菜心、芥菜、莲花白、嫩儿菜、牛心甘蓝、结球甘蓝、西兰花、白萝卜、青萝卜、红萝卜、胡萝卜种子均于2013年购自于贵阳市花溪区种子公司。

1.1.2 试药

萝卜硫素对照品购自sigma公司（S-4441；纯度≥90%）；甲醇（AR；天津科密欧化学试剂厂）；纯化水：贵州省生化工程中心自制。

1.1.3 仪器

高效液相色谱仪：US，Agilent Technology，1100 series；色谱柱：大连依利特分析仪器有限公司，C18（5 μm.，4.6 mm*150 mm）；电子天平：赛多利斯科学仪器有限公司，BSA124S；电热恒温水浴锅：北京长源实验设备厂，HH.SY21-Ni6；超声波清洗器：上海冠特超声仪器公司，SG2200HE。

1.2 方法

1.2.1 样品溶液制备

称取各种蔬菜种子干燥粉末1 g左右样品，分别加水2 mL溶解，在35℃条件下酶解8个小时，并加8 mL的甲醇超声半个小时，然后微滤，采用HPLC检测。

1.2.2 测定方法

1.2.2.1 色谱条件

色谱柱：Hypersil C18色谱柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流速：0.8 mL/min；检测器：紫外检测仪；检测波长：201 nm［7］；柱温：35℃；进样体积：10 μL；流动相：甲醇-水（20∶80）。

1.2.2.2 对照品溶液制备

准确称取萝卜硫素5 mg于25 mL量瓶中，加入甲醇超声溶解，并定容至刻度，备用。

1.2.2.3 萝卜硫素的含量计算方法

萝卜硫素含量（mg/g）=［C标（mg/mL）×90%×A样×样品体积（mL）］/［A标×样品质量（g）］

芸薹属萝卜硫素平均含量（mg/g）=（大头菜+菜心+芥菜+莲花白+嫩儿菜+牛心甘蓝+结球甘蓝+西兰花）种子中萝卜硫素的含量/8

萝卜属萝卜硫素平均含量（mg/g）=（白萝卜+红萝卜+青萝卜+胡萝卜）种子中萝卜硫素的含量/4

1.3 HPLC图谱

精确称取西兰花种子，大头菜种子，胡萝卜种子和白萝卜种子四种样品按1.2.1方法进行样液制备，按1.2.2.1上机测定，其中四种种子中萝卜硫素的HPLC图如图1～图4。

图1 西兰花种子萝卜硫素图谱Fig.1 Sulforaphane map of broccoli seeds

图2 大头菜种子萝卜硫素图谱Fig.2 Sulforaphane map of turnip seed

图3 胡萝卜种子萝卜硫素图谱Fig.3 Sulforaphane map of carrot seeds

图4 白萝卜种子萝卜硫素图谱Fig.4 Sulforaphane map of green radish seeds

2 结果与分析

2.1 萝卜硫素含量结果

2.1.1 八种芸薹属十字花科蔬菜种子中萝卜硫素含量

八种芸薹属（大头菜、菜心、芥菜、莲花白、嫩儿菜、牛心甘蓝、结球甘蓝、西兰花）十字花科蔬菜种子粉碎后，样品按1.2.1方法处理，平行取样3次，上机测定其中萝卜硫素的含量，实验结果见表1。

表1数据表明：此八种芸薹属十字花科蔬菜种子中都含有萝卜硫素，其含量由高到低是：西兰花＞结球甘蓝＞牛心甘蓝＞嫩儿菜＞莲花白＞大叶芥菜＞菜心＞大头菜，其中以西兰花种子中的含量最高。

2.1.2 四种萝卜属十字花科植物种子中萝卜硫素含量

四种萝卜属（白萝卜、青萝卜、红萝卜、胡萝卜）十字花科蔬菜种子粉碎后，样品按1.2.1方法处理，平行取样3次，上机测定其中萝卜硫素的含量，实验结果见表2。

表1 八种芸薹属十字花科蔬菜种子中的萝卜硫素含量结果Table 1 Sulforaphane content of eight Brassica cruciferous plants in their seeds（μg/g，n=3）

表2 四种萝卜属十字花科蔬菜种子中的萝卜硫素含量结果Table 2 Sulforaphane Content of four Raphanus cruciferous plants in their seeds（μg/g，n=3）

表2数据表明，此四种萝卜属十字花科蔬菜种子中含有萝卜硫素较少，其含量由高到低是：胡萝卜＞红萝卜＞青萝卜＞白萝卜，其中以胡萝卜含量最高。

2.1.3 两种属中萝卜硫素含量对比

将八种芸薹属（大头菜、菜心、芥菜、莲花白、嫩儿菜、牛心甘蓝、结球甘蓝、西兰花）和四种萝卜属（白萝卜、青萝卜、红萝卜、胡萝卜）种子中的萝卜硫素的平均含量，按照1.2.2.3的计算方法，分别计算出两个种属蔬菜中萝卜硫素的平均含量，见表3。

表3数据表明，在这十二种常见的十字花科蔬菜种子中，芸薹属种子的萝卜硫素含量远远超过了萝卜属种子中的萝卜硫素的含量，约为其18倍。

表3 两种属十字花科蔬菜种子中萝卜硫素的平均含量结果Table 3 Average content of Sulforaphane in two species cruciferous plants in their seeds（μg/g，n=3）

3 结论

萝卜硫素具有较强抗癌活性物质，大多数常食用十字花科蔬菜都含有萝卜硫素［8］，我们采用HPLC法测定了十二种常见十字花科蔬菜种子中萝卜硫素含量，结果表明西兰花种子中萝卜硫素的含量最高，而白萝卜种子中的含量最低；综合此十二种十字花科蔬菜中不同种属萝卜硫素含量结果，发现芸薹属种子中萝卜硫素含量远远高于萝卜属种子中萝卜硫素含量，因此，采用芸苔属种子作为提取萝卜硫素原料较好；其中以西兰花种子的效果最好。

［1］张鹏云，张耀中.中国植物志［M］.北京：科学出版社，2004

［2］单彦卿，张建丽，何洪巨.十字花科植物中硫代葡萄糖甙及萝卜硫素的性质研究［J］.食品科技，2007，32（9）：110-112

［3］张宇，吴莉莉，李金伟.3种十字花科芸苔属植物化学成分研究［J］.黑龙江医药科学，2007，30（2）：21-22

［4］王见冬，袁其朋，钱忠明.萝卜硫素研究进展［J］.食品与发酵工业，2003，29（2）：76-80

［5］佟丽丽，钮昆亮.十字花科植物中的硫代葡萄糖苷及其降解产物［J］.浙江科技学院学报，2004，16（3）：187-189

［6］ Thejassp，Kuttang.Antimetastatic activity of sulforaphane［J］.Life Sciences，2006，78（22）：3043-3050

［7］刘锡建，肖稳发，曹俭，等.SP850树脂分离萝卜硫素［J］.食品与发酵工业，2011，37（7）：197-200

［8］谢述琼，何珺，何军.9种十字花科蔬菜中萝卜硫素的含量研究［J］.安徽农业大学学报2013，40（3）：460-463

Determining the Sulforaphane Content of Twelve Cruciferous Plants'seeds

HE Jun1，XIE Shu-qiong2，*，YANG Jia-nian1，CHEN Wei1
（1.Research Center of Biochemistry Engineering of Guizhou Province，Guiyang 550025，Guizhou，China；2.Guizhou Institute of Technology，Guiyang 550025，Guizhou，China）

This experiment researched the Sulforaphane Content of twelve cruciferous plants in their seeds with HPLC，Sulforaphane Content in the twelve cruciferous plants is Brassica＞Raphanus.In Brassica broccoli seed's Sulforaphane Content was the higest for 10.02 mg/g，but turnip seed's was the lowest for17.4 μg/g；In Raphanus carrotseed'sSulforaphaneContentwasthehigest，for144.4μg/g，butwhiteradishseed'swasthelowest，for8.7μg/g.

Cruciferous Plants；seeds；Sulforaphane

10.3969/j.issn.1005-6521.2015.04.004

2013-10-21

贵阳市乌当区科学技术计划项目［2012乌科技合同字第51号］

何珺（1974—），女（汉），副教授，硕士生导师，研究方向：天然产物活性成分分离提取及分析测试。

*通信作者：谢述琼，女，硕士，研究生。