刘起胜 徐筱红 刘怀 彭微 曾治中

·论著·

乳腺癌中医辨证分型与BCRP表达的相关性分析

刘起胜 徐筱红 刘怀 彭微 曾治中

目的 探讨乳腺癌患者的中医辨证分型与乳腺癌耐药蛋白(BCRP)表达的相关性。方法 对80例乳腺癌患者进行术前中医辨证分型, 其中血瘀证23例、肝郁证30例、脾虚证17例、肾阴虚证10例, 对术后标本进行BCRP检测, 并进行分析。结果 乳腺癌患者术前辨证为血瘀证者BCRP表达的阳性率高于其他证型, 差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 乳腺癌术前中医辨证与肿瘤BCRP表达有相关性, 血瘀证者BCRP表达的阳性率最高, 预后差。

乳腺癌；中医；乳腺癌耐药蛋白

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤, 且其发病率呈逐年上升趋势, 现在乳腺癌发病率已跃居我国女性癌症发病首位［1］。严重危害女性的健康。而中医的辨证论治在其综合治疗中起着重要作用。BCRP是与肿瘤多药耐药有关的新的药物排除泵, 本研究通过研究乳腺癌术前中医辨证与BCRP的关系,指导乳腺癌的临床治疗。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集筛选湖南省直中医医院收治的原发性乳腺癌患者80例为本课题研究对象, 均为女性, 年龄21～85岁, 平均年龄(47.35±10.79)岁。详细采集患者一般情况及症状、体征等信息。

1.2 诊断标准 临床表现：乳腺肿块、乳头溢液、皮肤改变“橘皮样外观”、乳头乳晕异常、腋窝淋巴结肿大、乳腺触诊有肿块、X线检查可见放射状毛刺的肿块阴影、B超检查见癌肿特性、细胞涂片检查可见癌细胞、穿刺或活组织病理检查发现癌细胞。

1.3 纳入标准 病理诊断为原发性乳腺癌患者；年龄在20～85之间的女性；以前未经化疗、放疗、中药治疗等乳腺癌相关治疗；无智力及精神障碍。

1.4 排除标准 妊娠或哺乳期妇女；精神病患者；合并其他恶性肿瘤者(非乳腺癌转移)。

1.5 方法

1.5.1 中医辨证 中医辨证主要根据《中药新药临床研究指导原则》的诊断标准, 通过《信息采集表》收集80例乳腺癌患者临床信息, 综合乳腺癌患者术前的临床表现, 对其进行中医辨证分型。见表1。

表1 乳腺癌患者辨证分型情况

1.5.2 免疫组织化学方法 取80例乳腺癌患者术后标本,把标本进行石蜡包埋, 制成有硬度的组织块, 组织块用切片机3 μm厚连续切片, 免疫组化采用SP三步法：①脱蜡, 将切片放二甲苯中浸泡, 二甲苯Ⅰ浸泡10 min、二甲苯Ⅱ浸泡10 min。②梯度酒精脱水。③灭活内源性过氧化物酶：3% H2O2孵育10 min, PBS冲洗3次×3 min。④抗原修复：将0.01 M枸橼酸钠缓冲溶液注入塑料盒内, 放入玻片, 压力锅中加热, 冷却至室温后PBS冲洗3次×3 min。⑤DAB显色,苏木素复染。水洗, 返蓝并封固。已知的阳性片作阳性对照,显微镜下观察。

1.6 结果判定标准 显微镜下观察, 由病理医师判读BCRP蛋白的表达结果, 染色信号呈细颗粒状, 棕黄色, 定位于细胞膜或细胞质中, 每例切片至少观察10个高倍视野, 取平均值定为阳性率, 以肿瘤细胞阳性率＞25%为阳性。对实验过程全程监控, 避免不必要的误差出现。

1.7 统计学方法 采用SPSS16.0统计学软件进行统计分析。计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

乳腺癌患者术前辨证为血瘀证者BCRP表达的阳性率高于其他证型, 差异有统计学意义(P＜0.05)。见表2。

表2 乳腺癌中医辨证与BCRP的关系(n, %)

3 讨论

乳腺癌, 古医籍称“乳岩”。因乳房肿块坚硬如石, 溃烂后如岩石而得名, 中医认为乳腺癌发病的病因有：情志因素：七情可致脏腑功能失调, 导致经络痞涩, 聚结成核。饮食因素：肥甘厚味损伤脾胃, 运化失司, 以致痰凝、血瘀等瘀滞于乳络而为病。体质因素：有些患者脏腑虚弱有易患乳腺癌的病理体质。外因也是一重要因素：“四时八风之客于经络之中, 为瘤病也。脏腑亏虚、气血不足为发病之本；在正气虚衰的前提下, 同时邪气盛实的基础上, 导致气滞、痰凝、血瘀、热毒等蕴滞于乳络而成乳岩。

BCRP是1998年分离出的一种新的ABC 转运蛋白, 该蛋白含有633个氨基酸残基, 其为半转运蛋白。因该蛋白首先从乳腺细胞中被发现, 故又被称为乳腺癌耐药蛋白。BCRP广泛存在于正常组织中, 其耐药机制与P-糖蛋白(P-gp)相似, 通过将药物转运出胞外, 降低胞内药物浓度导致细胞耐药。有研究表明［2］, BCRP基因在乳腺癌组织中阳性表达率、表达水平均显著高于癌旁组织, BCRP 基因表达水平与患者体内雌激素水平及雌激素受体α(ERα)及人表皮生长因子受体-2(Her-2) 强度呈正相关, 其过表达可能在乳腺癌的多药耐药中起较重要的作用。有淋巴结转移者BCRP 基因表达水平显著高于无淋巴结转移者。石晶等［3］研究表明, BCRP表达阳性是接受以蒽环类化疗药为主的辅助化疗的乳腺癌患者的预后不良指标, 与无病生存期有负相关趋势。BCRP的表达可以指导乳腺癌的化疗。有研究认为BCRP表达的肿瘤细胞对米托蒽醌、阿霉素、柔红霉素等均产生交叉耐药, 但是对长春碱、紫杉醇和顺铂敏感, 因此可以作为临床用药的依据。

化疗是乳腺癌的重要治疗方法之一, 然而癌细胞的多药耐药对肿瘤化疗的疗效造成了严重影响。目前, 中医药治疗乳腺癌已取得良好疗效, 也越来越受到重视, 本研究发现乳腺癌术前辨证与BCRP的表达相关。乳腺癌患者术前辨证为血瘀证出现BCRP阳性的几率最高(86.96%)；从研究结果中可见乳腺癌中血瘀证型患者耐药性强, 其化疗效果较差, 预后较差。这些研究结果有利于指导临床医生对各证型预后的判断, 可以为乳腺癌患者化疗提供参考依据, 并针对性的进行中西医结合治疗。

［1］ 杨丽华.乳腺癌中医证型和耐药蛋白BCRP、MRP2、Sorcin等相关性研究.厦门大学, 2011.

［2］ 王麟, 魏明杰, 金峰, 等.乳腺癌耐药相关蛋白在乳腺癌的表达及与临床病理参数相关性.解剖科学进展, 2008, 14(2):133-136.

［3］ 石晶, 滕月娥, 张敬东, 等.乳腺癌组织中ABCG2 和HIF-1α的表达及临床意义.中国医科大学学报, 2008, 37(5):697-700.

Analysis of correlation between syndrome differentiation of traditional Chinese medicine and BCRP expression in breast cancer

LIU Qi-sheng, XU Xiao-hong, LIU Huai, et al.
Pathology group, Faculty of Basic Medicine of Hunan College of Traditional Chinese Medicine, Zhuzhou 412012, China

Objective To investigate correlation between syndrome differentiation of traditional Chinese medicine and breast cancer resistance protein (BCRP) expression.Methods There were 80 breast cancer patients received syndrome differentiation of traditional Chinese medicine before surgery, as blood stasis syndrome group with 23 cases, hepatic depression syndrome group with 30 cases, spleen deficiency syndrome group with 17 cases, and renal yin deficiency syndrome group with 10 cases.Detection of BCRP was made on postoperative samples for analysis.Results Patients with blood stasis syndrome by preoperative syndrome differentiation had higher positive rate of BCRP than other types.The difference had statistical significance (P＜0.05).Conclusion Syndrome differentiation of traditional Chinese medicine before breast cancer surgery is correlated with BCRP expression.Patients with blood stasis syndrome have the highest positive rate of BCRP and bad prognosis.

Breast cancer; Traditional Chinese medicine; Breast cancer resistance protein

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.26.001

2015-03-23］

湖南省中医药管理局项目(项目编号：2012108)

412012 湖南中医药高等专科学校基础医学部病理组