汪 旭，蔡小平，李宏喜

（甘肃省清水县畜牧兽医局，甘肃 清水 741400）

禽流感（AI）是由A型流感病毒引起多种家禽及野鸟的一种高度接触性传染病，鸡体免疫抗体监测是了解疫苗免疫状况的最有效方法。通过分析检测结果，可以适时指导防疫工作。我们应用血清学方法对清水县18 乡镇健康鸡血清进行检测，并对检测资料进行分析，以供清水县防疫工作参考。

1 材料与方法

1.1 样品来源 清水县18 乡镇随机采集的健康鸡血清样品255 份（在-20 ℃储存）。

1.2 试剂 等渗PBS缓冲液（0.1 mol/L，pH 值7.0～7.2）；阿氏（Alsevr′s）液；禽流感H5 HI 血清以及阴性血清；禽流感H5 HI 抗原；3 只SPF 鸡的红细胞（1%RBC）。

1.3 试验方法 首先，对255 份鸡血清样品进行灭活，然后制备成鸡红细胞悬液。接着，以高致病性禽流感诊断技术为依据进行抗原标定。最后，进行血凝抑制（HI）试验，以《高致病性禽流感诊断技术》为依据进行操作[2]（见表1）。

表1 血凝抑制试验操作术式 单位：μL

2 结果

H5 亚型抗原标定的血凝价为210，应用于血凝抑制（HI）试验的4 个血凝单位抗原的稀释倍数为28。清水县18 个乡镇鸡禽流感抗体的血清学检测结果如表2。

在检测的阳性结果中，清水县鸡禽流感H5 亚型HI 最高抗体滴度为28；HI 最低抗体滴度为23。全县总体血清抗体阳性率为79.8%，其中血清抗体阳性率最高是红堡、白沙两镇，阳性率高达100%；阳性率较低的是松树乡和丰望乡，阳性率分别是66.67%和68.42%；根据农业部《高致病性禽流感和口蹄疫等重大动物疫病免疫方案》的相关规定，HI 抗体效价≥25，且存栏禽群免疫抗体合格率必须≥70%判定为合格[5]，清水县18 乡镇中有16 个其鸡禽流感H5 亚型疫苗的免疫合格，有丰旺、松树等2 个乡镇未达到标准，清水县禽流感血清抗体阳性率具体分布见图1。

表2 2013年清水县18个乡镇禽流感抗体血清学检测结果

图1 清水县18乡镇血凝抑制试验（H I）血清抗体阳性率分布

3 分析与讨论

3.1 抗体效价 从总体监测结果来看，清水县的禽流感免疫抗体效价及抗体水平总体较高，保持在70%～100%左右，基本达到农业部《高致病性禽流感和口蹄疫等重大动物疫病免疫方案》中规定的禽流感HI 抗体效价≥25判定为合格的，且合格率大于等于70%的总体要求[5]。说明清水县家禽禽流感强制免疫密度大，效果较好。2012 年以来，虽然清水县周边省市曾暴发禽流感疫情，而本地家禽饲养量大、交易频繁，又是候鸟迁徙之地[6]，但发生禽流感疫情的几率少之又少，更说明了免疫工作对于预防禽流感疫情的极端重要性。

3.2 季节对禽流感免疫抗体水平的影响 不同季节的家禽流感免疫抗体水平存在规律性的波动，总体合格率在冬春季节较高。这是因为冬春季节是禽流感的高发期，但在此期间，清水广大养禽户的免疫意识普遍增强，进行了密度大、覆盖面广的免疫工作，有力的防范了疫病的流行。

3.3 养殖管理水平对禽流感免疫抗体水平的影响 散养场的抗体检测合格率普遍低于规模场。这是由于散养户防疫意识相对较差，又容易受市场波动的影响，一旦兽医管理部门督促不到位，在免疫注射、防疫消毒等工作就会存在漏洞。因此，一方面需要养殖户进一步认识，另一方面需要兽医管理部门加大监管和督促工作力度。

对清水县18 个乡镇255 份鸡血清进行血凝抑制试验（HI），H5 亚型禽流感病毒总体阳性率较高，抗体滴度也较高，且各乡镇春季动物关于禽流感的防疫工作都搞得比较扎实。可初步推断该地区大多数家禽对禽流感H5 亚型病毒可以产生较强的保护抗体。但是仍然有部分乡镇抗体阳性率较低，其原因可能是由于抽样的鸡中有补栏禽，还未进行禽流感疫苗的免疫，或禽流感疫苗首免过程中没有及时形成抗体，这对禽流感的防治存在很大的隐患。因此，对补栏禽的补针免疫工作要尽快进行，各乡镇政府和乡镇兽医站以及村防疫员要有高度的责任心，及时做好补栏禽的补针免疫工作。

[1]蔡宝祥.家畜传染病学[M].4 版.北京：中国农业出版社，2006：169-173，304-310.

[2]赵荣乐，郑光宇.禽流感病毒研究进展[J].生物学通报，2004，4:1-2.

[3]GB/T 18936-2003《高致病性禽流感诊断技术》[S].

[4]蔡剑平，肖尧，周晓阳，等.禽流感病毒的生物学特性及其实验室检测[J].中华检验医学杂志，2005，28（3）：232-234.

[5]李秀英，禽流感疫苗HI 抗体的免疫力监测[J].中国兽医杂志，2006，42（2）：32-33.

[6]马洪雨，徐玲，邵明旭.禽流感及其防治[J].中国畜牧兽医，2004（03）：197-200.