赵文娟 雷 英

（太原动物园,山西太原 030009）

太原动物园蛮羊布氏杆菌病血清学调查

赵文娟 雷 英

（太原动物园,山西太原 030009）

采用ELISH法对我园食草区饲养的23只蛮羊，进行布氏杆菌病检测，结果显示:发现17号和20号两个样本检测结果为阳性，其他样本均为阴性。结论表明:ELISH法是一种敏感、特异的诊断方法，我园饲养的蛮羊流产和死胎均是由于感染布鲁氏杆菌造成的，对布鲁氏杆菌病的早期诊断及防治提供了有利的依据。

ELISH法 早期诊断 防治

布氏杆菌病是由布鲁氏菌引起的一种人畜共患传染病，也是一种自然疫源性疾病。此病牛、羊、猪、鹿等均有易感性，主要侵害生殖系统和关节，以出现传染性流产为典型临床症状。人也有感染此病的可能，轻者可出现疲乏、头疼、关节肌肉疼痛等症状，重者伴有流产、睾丸炎，严重影响其生殖能力，甚至会丧失基本的劳动能力，目前，世界动物卫生组织将此病列为B类传染性疾病，我国将其列为二类动物疫病。这些年来，随着畜牧业的规模化、产业化发展，畜禽间调运异常频繁，由此布病传染病例有上升趋势，人间传染此病的病例也大增趋势[1]。国际上将布氏杆菌属分为6个种，20个生物型，各以本动物主要感染对象，病畜和带菌动物为主要传染源。病菌主要随感染的母畜的胎衣、羊水、胎儿、精液、阴道分泌物和乳汁排出。污染饲料、饮水、环境、土壤、用具等。病原菌通过破损的皮肤、黏膜侵入机体，经呼吸道、消化道或生殖系统黏膜感染。羊、牛和猪对本病的易感性最高，人感染具有明显的职业性，以密切接触动物的人多发[2]。针对我园饲养的蛮羊发生多起无外伤的情况下，母畜发生流产、死胎的病例。兽医考虑是布病的可能，马上对我园所饲养的23只蛮羊进行血清学检测。

1 材料与方法

1.1 材料

一般采集病畜流产后7～15d内，新鲜的血液。布氏杆菌抗原、200701标准阳性血清，200601国家标准品、阴性血清200601国家标准品，均由中国兽医药品监察所细菌室提供，0.5%石炭酸生理盐水，pH7.0，Mezle缓冲液，pH8.9。

1.2 实验动物

太原动物园食草区饲养的23只蛮羊。

1.3 实验方法

麻醉动物后采血并编号，以防重复采血。采集血清标本23个，离心析出血清，-20℃冷冻备用，进行试管凝集实验。

1.3.1 镜检

采集流产胎儿的羊水。涂片后采用柯氏染色法，细小的短棒状成球杆状的小杆菌，呈红色，而其他菌及羊水组织等呈绿色。革兰阴性菌，不产生芽孢，无运动性。

1.3.2 试管凝集试验

（1）取反应管5只，立于试管架上，其中一只供稀释被检血清用，4支做检查用。（2）用玻璃铅笔在每支反应管上标记血清号及试管号。（3）用5mL吸管吸取 0.5%石炭酸生理盐水，于血清稀释管内加2.3ml，第二管内不加，第三、四、五管内各加0.5ml。（4）用1ml吸管吸取被检血清0.2ml，放入血清稀释管内，充分混合后，吸取1ml分别放入第二、第三管内各0.5ml。将第三管混匀，吸0.5ml加入第四管，以此类推，至第五管混合后弃去0.5ml。（5）血清稀释完毕后，除血清稀释管不加抗原外，其余各管各加10倍稀释抗原0.5mL。加入抗原后，血清稀释度从第二管起，依次为1：25、1：50、1：75、和1：100四个稀释度，每管总量都是1ml。（6）与此同时，做一对照组，即抗原对照管，阳性血清和阴性血清（1：25）对照管。（7）各成分加完后充分震荡混合，于37～38℃温箱内放4～10小时，取出后再于室温中放置22～24h（共28h）然后判定。

1.3.3 结果判定

在阳性和阴性对照成立的前提下，50%以上凝集现象的最高稀释度为判为血清抗体效价。抗体效价1：50以上判为阳性；出现抗体效价1：25判为疑似反应，无凝集现象，液体均为混浊者为阴性。

表1 试管凝集试验的阳性血清

结果：

通过血清学检测，可判定为布氏杆菌感染的蛮羊2例，17号试管和20号试管均是阳性，占总样本数的8.70%。其他试管均为阴性见表1。

2 防治

（1）我园对阳性布病的蛮羊，及时进行了淘汰扑杀无害化处理，对流产胎儿、胎衣、羊水及分泌物和排泄物做了焚烧处理[3]。污染的圈舍、场地、饮水池，用10%的石灰乳进行彻底消毒。产羔、产犊高峰时期，母畜流产，没有妥善处理胎衣、胎儿、胎水，使得布鲁氏杆菌以通过媒介传染给其他畜体，造成4个母畜先后流产、死胎。周围其他品种没有发生该病。

（2）加强我园散放的饲养食草动物，定期布鲁氏杆菌病的检疫，正规化定期地进行布病的防疫和检疫工作。检测时间划定必须有针对性，成年羊只每年检测至少两次，怀孕母畜与头胎产后15d至30d，羊只五月龄以上，牛只8月龄以上，进行疾病监测。对新生的羊5月龄进行检疫，一年两次监测。每年9月份定期接种羊三联苗，采取预防为主的方针。监测的数量按照50%的比例进行抽检。并结合血清学检测。人的预防，对其兽医和饲养员到山西医科大学第二附属医院进行对布鲁氏杆菌病的检测。检测结果都为阴性。日常工作做相关人员要加强个人防护，穿工作服、胶靴、戴口罩和胶皮手套。工作后要对各种物品进行84消毒液处理后使用。

[1] 袁开早.牛羊布病综合防治措施[J].兽医导刊，2014，208（9）：（47）

[2] 徐建平，刘丽洁，李霞，等.牛羊布鲁氏菌病流行病学调查[J].中国兽医杂志，2008，44（8）：78-79.

[3] 郑明球.布鲁氏杆菌病的检疫[J].家畜传染病学，2001，（5）：38-39.