边 樱，冯天龙，张朝凤，许翔鸿，张 勉

(中国药科大学生药学研究室，江苏南京 211198)

缘毛紫菀(Aster souliei Franch.)为菊科紫菀属植物，分布于甘肃、青海、四川、云南、西藏等地海拔2700～4000 m的高山针叶林体外缘、灌丛以及山坡草地或河滩草坝［1］。缘毛紫菀的头状花序是藏药藏紫菀的来源之一，性温，味辛，具有润下气、止咳等功能，临床上主要用于支气管炎、咳痰、肺结核咳血、喉痹和小便不利等的治疗［2］。现代研究表明缘毛紫菀具有抗菌和抗肿瘤活性［3］。缘毛紫菀的化学成分研究较少，为了阐明缘毛紫菀中的化学成分并为进一步的抗菌、抗肿瘤等药理活性的研究奠定基础，本课题组对缘毛紫菀的化学成分进行了研究。目前从缘毛紫菀头状花序中分离鉴定了9个化合物，主要为黄酮类化合物，分别为槲皮素(quercetin，1)、芹菜素(apigenin，2)、山柰酚(kaempferol，3)、柚皮素(naringnin，4)、芹菜素－7－O－β－D－吡喃葡萄糖苷(apigenin－7－O－β－D－pyranglucos，5)、芹菜素－7－O－β－D－吡喃葡萄糖醛酸苷(apigenin－7－O－β－D－pyranglycuronide，6)、β－谷甾醇(β－sitostero，7)、β－胡萝卜苷(β－daucosterin，8)和α－菠甾醇－3－O－β－D－吡喃葡萄糖苷(α－spinasteryl－β－D－glucopyranoside，9)，其中化合物4、9为首次从缘毛紫菀中分离得到。

1 仪器材料

Brucker ACF－300、500型核磁共振仪;Agilent 1100LC－ESI/MS型液－质联用仪;Agilent 1200分析型液相色谱;薄层层析硅胶(GF254)和柱层析硅胶(100～200目、200～300目均为青岛海洋化工集团公司生产);羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH－20，Pharmacia公司);MCI gel－CHP－20P分离填料(日本三菱化工);所用试剂均为分析纯。

缘毛紫菀药材于2012年购于西藏拉萨亚朗中藏药材部，经本文作者之一张勉教授鉴定为缘毛紫菀(Aster souliei Franch.)干燥头状花序，凭证标本存放于中国药科大学生药学研究室。

2 化学成分分离与鉴定

2.1 提取分离

缘毛紫菀干燥头状花序(7 kg)，加80%乙醇热回流提取2次，每次1 h，合并提取液，回收乙醇至无醇味，得总浸膏1.83 kg。将总浸膏混悬在水中，依次用石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取，萃取3次，分别得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位浸膏。其中乙酸乙酯部位浸膏256.5 g，取乙酸乙酯部位浸膏采用干法拌样进行硅胶柱层析分离，以二氯甲烷－甲醇(100∶0～0∶100)为流动相梯度洗脱，收集各梯度流分，用薄层检视合并相似的点分为FrA～FrK流分。FrB合并之前静置底部分别析出黄色颗粒状化合物1、化合物2的粗品，粗品经反复重结晶得到化合物1(7.39 g)、化合物2(1.80 g);FrB经多次硅胶柱层析后得到化合物7(0.31 g)、化合物3(0.25 g);FrC静置底部析出白色片状化合物9粗品，粗品经重结晶得到化合物9(2.19 g);FrC经MCI－gel(70%甲醇－水)除色素后，硅胶柱层析的到化合物化合物4(5 mg)、化合物8(28 mg);FrD经硅胶柱层析后，采用聚酰胺层析柱(70%甲醇－水)得到化合物5(0.56 g)。正丁醇部位浸膏364.2 g，取正丁醇部位浸膏10 g采用干法拌样进行硅胶柱层析分离，以二氯甲烷－甲醇(5∶1～1∶1)为流动相梯度洗脱得到化合物6粗品，粗品经多次聚酰胺柱层析(70%乙醇)洗脱得到化合物6(56 mg)。

2.2 结构鉴定

化合物1黄色粉末(甲醇);10%硫酸－乙醇显色剂显色黄色斑点加深，盐酸－镁粉反应呈阳性，表明是黄酮类化合物。将化合物1与槲皮素对照品共薄层，多个溶剂系统展开相同Rf值的位置有颜色一致的斑点。故确定化合物1为槲皮素。

化合物2黄色粉末(甲醇);10%硫酸－乙醇显色剂显色黄色斑点加深，盐酸－镁粉反应呈阳性，表明是黄酮类化合物。将化合物2与芹菜素对照品共薄层，多个溶剂系统展开相同Rf值的位置有颜色一致的斑点。故确定化合物2为芹菜素。

化合物3黄色粉末(甲醇);10%硫酸－乙醇显色剂显色黄色斑点加深，盐酸－镁粉反应呈阳性，表明是黄酮类化合物。1H－NMR(500 MHz，DMSO－d6)δ:6.19(1H，d，J=1.8 Hz，H－ 6)，6.44(1H，d，J=1.8 Hz，H－8)，6.92(2H，d，J=8.6 Hz，H－3'，5')，8.03(2H，d，J=8.6 Hz，H－2'，6')，12.47(1H，s，5－ OH)，10.76(1H，s，7－OH)，10.08(1H，s，4'－OH)，9.35(1H，s，3－OH);13C－ NMR(125 MHz，DMSO－ d6)δ:146.8(C－2)，135.8(C－3)，175.8(C－4)，156.5(C－5)，98.5(C－6)，163.8(C－7)，93.5(C－8)，160.6(C－9)，103.0(C－10)，121.6(C－1')，129.4(C－2'，6')，115.4(C－3'，5')，159.1(C－4')。以上数据与文献［4］基本一致，故鉴定化合物3为山柰酚。

化合物4无色针晶(甲醇);ESI－MS m/z 273［M+H］+，271［M+H］－，1H－NMR(300 MHz，CD3OD)δ:7.33(2H，d，J=8.25 Hz，H－2'，6')，6.85(2H，d，J=8.25 Hz，H－3'，5')，5.90(1H，d，J=2.0 Hz，H－8)，5.89(1H，d，J=2.0 Hz，H－6)，5.35(1H，dd，J=3.0，12.6 Hz，H－ 2)，3.15(1H，dd，J=12.6，17.2 Hz，H－ 3a)，2.73(1H，dd，J=3.0，17.2 Hz，H－ 3b);13C－ NMR(75 MHz，CD3OD)δ:80.8(C－ 2)，44.3(C－3)，198.0(C－4)，165.5(C－5)，97.1(C－6)，168.3(C－ 7)，96.2(C－ 8)，164.8(C－ 9)，104.8(C－10)，131.6(C－1')，129.5(C－2'，6')，116.8(C－3'，5')，159.3(C－4')。以上数据与文献［5］基本一致，故鉴定化合物4为柚皮素。

化合物5黄色粉末(甲醇);1H－NMR(300 MHz，DMSO－d6)δ:7.96(2H，d，J=8.7 Hz，H－2'，6')，6.94(2H，d，J=8.7 Hz，H－ 3'，5')，6.84(1H，d，J=2.1 Hz，H－8)，6.45(1H，d，J=2.1 Hz，H－6)，6.86(1H，s，H－3)，5.07(1H，d，J=6.9 Hz，H－1')，3.18 ～3.75(6H，m，H－2'～6').13C－NMR(125 MHz，DMSO－d6)δ:164.1(C－2)，103.0(C－3)，181.8(C－4)，161.3(C－5)，99.4(C－6)， 162.9(C－ 7)，94.7(C－ 8)，156.8(C－ 9)，105.3(C－10)，120.9(C－1')，128.4(C－2'，6')，115.9(C－3'，5')，161.0(C－4')，99.9(C－1″)，73.1(C－ 2″)，76.5(C－ 3″)，69.6(C－4″)，77.2(C－5″)，60.6(C－6″)。以上数据与文献［6］基本一致，故鉴定化合物5为芹菜素－7－O－β－D－吡喃葡萄糖苷。

化合物6黄色粉末(甲醇);10%硫酸－乙醇显色剂显色黄色斑点加深，盐酸－镁粉反应呈阳性，表明是黄酮类化合物。ESI－MSm/z 445.1［M－H］－。将化合物6与芹菜素－7－O－β－D－吡喃葡萄糖醛酸苷对照品共薄层，多个溶剂系统展开相同Rf值的位置有颜色一致的斑点。故确定化合物6为芹菜素－7－O－β－D－吡喃葡萄糖醛酸苷。

化合物7无色针晶(乙酸乙酯);10%硫酸－乙醇溶液显紫红色，将化合物7与β－谷甾醇对照片共薄层，多个溶剂系统展开相同Rf值的位置均有颜色一致的斑点，故确定化合物7为β－谷甾醇。

化合物8白色粉末(甲醇);10%硫酸－乙醇溶液显紫红色，将化合物8与β－胡萝卜苷对照片共薄层，多个溶剂系统展开相同Rf值的位置均有颜色一致的斑点，故确定化合物8为β－胡萝卜苷。

化合物9白色片状结晶(二氯甲烷－甲醇);1H－ NMR(300MHz，C5D5N)δ:0.58 ～1.10(18H，－CH3×6)，3.96－5.03(7H，H－2'～6')，5.05(1H，dd，H－7)，5.07～5.23(2H，m，H－22，23).13C－ NMR(75 MHz，C5D5N)δ:37.1(C－1)，31.9(C－2)，78.3(C－3)，34.5(C－4)，39.5(C－5)，29.8(C－6)，117.6(C－7)，139.3(C－8)，49.4(C－9)，34.3(C－10)，21.5(C－11)，39.9(C－12)，43.2(C－13)，55.1(C－14)，23.1(C－15)，28.7(C－16)，12.0(C－18)，12.8(C－19)，40.9(C－20)，21.1(C－21)，138.4(C－22)，129.4(C－23)，51.2(C－24)，21.4(C－26)，19.0(C－27)，25.5(C－28)，12.3(C－29)，102.1(C－1')，75.1(C－2')，76.9(C－3')，71.6(C－4')，78.4(C－5')，62.7(C－6')。以上数据与文献［7］基本一致，故鉴定化合物9为α－菠甾醇－3－O－β－D－吡喃葡萄糖苷。

［1］中国科学院植物研究所.中国高等植物图鉴:第4册［M］.北京:科学出版社，1987:433.

［2］中国医学科学院药物研究所.中药志:第2册［M］.北京:人民卫生出版社，1982:198.

［3］Zhang Y H，Wang Y L，Cai A H，et al.A bioactive diterpene from the Chinese Herb Aster souliei［J］.Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences，2004，13(4):285－287.

［4］陈屏，杨骏山.蒲葵子化学成分的研究［J］.中国药学杂志，2008，43(21):1669－1670.

［5］管慧娟，张雪，屠凤娟，等.铁皮石斛化学成分的研究［J］.中草药，2009，40(12):1873－1876.

［6］潘春媛，张国刚，米文珍.火绒草中的黄酮苷类成分［J］.沈阳药科大学学报，2008，26(11):886－888.

［7］熊江，周俊，戴好富，等.多蕊商陆的化学成分研究［J］.云南植物研究，2002，24(3):401－405.