沈谷群， 袁建林， 程静新， 张国庆, 熊廷川

(新疆医科大学附属肿瘤医院妇外三科， 乌鲁木齐 830011)

新疆是一个多民族聚集的地区，也是我国宫颈癌高发地区之一。在新疆宫颈癌高发区维吾尔族妇女宫颈癌的患病率为526/10万，是北京市妇女宫颈癌患病率的210多倍[1]。口服避孕药的女性发生子宫颈鳞癌的风险增加[2-4]，而宫颈转化区对雌激素较为敏感，提示雌激素与宫颈鳞癌的发生有一定的关联，芳香化酶P450(aromatase P450 ，P450arom)与雌激素依赖的疾病相关。本研究通过对新疆维吾尔族(维族)、汉族等妇女宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia, CIN)及正常宫颈组织中P450arom和雌激素β受体(estrogen receptor β ，ER-β)的表达情况进行分析，探讨P450arom及ER-β在宫颈鳞癌的发生发展过程中的作用，以及在新疆维、汉族间的表达是否存在差异。

1 对象与方法

1.1研究对象收集2012年6月-2013年6月在新疆医科大学附属肿瘤医院就诊的宫颈鳞癌(宫颈鳞癌组)、CIN(CIN组)及正常宫颈组织(对照组)的石蜡标本180例，3组标本各60例，其中每组标本维、汉族各30例。研究对象均为初次治疗、非化疗及放疗后的患者，对照组则除外恶性肿瘤及与雌激素相关的疾患。

1.2方法采用免疫组织化学法(SP法)，严格按照试剂盒说明操作，判定标准：每张切片随机计数5～10个高倍视野的1 000个细胞中阳性细胞所占百分比。按其数量及显色强度分为3级：表达弱阳性(+)，即阳性细胞数<25%，显色强度为淡黄色或仅个别细胞呈棕黄色；表达强阳性(+++), 即阳性细胞数>75%，多数细胞呈黄或棕黄色；表达中度阳性(++)，即阳性细胞数及显色强度介于弱阳性和强阳性之间；若阳性细胞少，但着色较显色强度上背景无明显差别者为阴性(-)。

1.3统计学处理采用SPSS18.0统计软件对数据行χ2检验及秩和检验，检验水准α=0.05。

2 结果

在高倍显微镜下观察细胞着色，可见P450arom表达阳性表现为细胞质染为淡黄色或棕黄色或褐黄色(图1、2)。ER-β阳性表达表现为细胞核呈棕褐色，鳞状上皮和宫颈的腺体、间质中均见阳性细胞，以腺体及鳞状上皮旁基底层较多，间质中散在(图3、4)。

CIN的标本因多数为活检小标本，在制片后有部分切片中无上皮组织；同时制片过程中出现掉片现象。故P450arom的标本中，宫颈鳞癌60例，维、汉族各30例；CIN 50例，维、汉组各25例；正常宫颈组织56例，维族27例，汉族29例；ER-β的标本中，宫颈鳞癌59例，维族29例，汉族30例；CIN 51例，维族25例，汉族26例；正常宫颈组织57例，维族28例，汉族29例。

图1 P450arom在宫颈鳞癌组织中阳性表达(SP×400)

图2 P450arom 在CIN 组织中阳性表达(SP×200)

图3 ER-β在宫颈鳞癌组织中阳性表达(SP×400)

图4 ER-β在CIN组织中阳性表达(SP ×400)

2.1P450arom及ER-β在宫颈鳞癌、CIN、正常宫颈组织中的表达P450arom在对照组阳性表达率为17.9%(10/56)低于宫颈鳞癌组的55.0%(33/60)及CIN组的48.0%(24/50)，3组差异有统计学意义(P=0.001)。ER-β在对照组阳性表达率为57.9%(33/57)，CIN组为37.3%(19/51)，宫颈鳞癌组为15.3%(9/59)，随着宫颈病变程度的增加，其表达呈递减的趋势(P=0.000),见表1。

2.2P450arom和ER-β在3组维、族不同宫颈组织中的表达比较P450arom和ER-β在维吾尔族及汉族女性宫颈组织中表达无差异，见表2。

表1 P450arom和ER-β在不同宫颈组织中的表达

表2 P450arom和ER-β在3组维、汉民族的不同宫颈组织中表达比较

3 讨论

P450arom 是细胞色素P450的一种，在生物体内广泛分布，是雌激素合成中关键的限速酶，局部组织微环境中的高雌激素水平，是发生雌激素依赖性肿瘤的重要原因。目前研究发现[5-7]，芳香化酶与乳腺癌、子宫内膜癌及子宫内膜异位症等雌激素依赖性疾病的发生发展有关。肿瘤上皮细胞可通过自分泌的方式，分泌芳香化酶而合成雌激素，其周围间质细胞通过增加合成或释放生长因子以旁分泌方式产生雌激素，从而促进肿瘤的生长。宫颈转化区是激素依赖性组织，是HPV 感染和宫颈癌的好发部位，35%宫颈癌组织中有P450arom的表达。正常子宫颈组织中P450arom的表达活性低，但是宫颈炎时，尤其是HPV感染时，局部组织中产生较高的前列腺素E2，诱导并激活P450arom的表达，增加雌激素的产生；而雌激素本身又能刺激环氧化酶，并通过环氧化酶激活，促进了子宫局部前列腺素E2的形成。这种正反馈循环可能在促进宫颈癌形成与发展的过程中起到重要作用。本研究表明P450arom在宫颈鳞癌组及CIN组中的表达显著高于对照组(P=0.001)，而CIN组与宫颈鳞癌组的表达差异无统计学意义(P=0.765)，提示其可能在宫颈癌的发生发展过程中发挥了一定的作用。

雌激素发挥生理效应的物质基础是雌激素受体。雌激素与受体结合后，导致多种细胞水平的变化。宫颈为性激素的靶器官，Au等[8]研究显示，增加与肿瘤生长相关的雌激素受体、芳香化酶和Cycline D1的表达，可促进宫颈肿瘤的生长。正常宫颈上皮中ER的表达为100%，随着病变程度的增加，其表达率及表达强度逐渐降低,在宫颈癌组表达最低[9-10]。Dillner等[11]通过转基因技术阻断宫颈癌细胞中雌激素受体通路，从而阻断雌激素的功能，引起细胞大范围的变化，如HPVE6与E7 mRNA的减少、细胞集落形态学被打乱、细胞繁殖中断、宫颈癌细胞的凋亡等。这些研究表明，宫颈癌细胞的生长可能与局部雌激素受体相关。在一项HPV阳性的宫颈癌的体外实验研究中发现，宫颈癌的发生与P450arom的增高及ER-β的增高相关，且表达高水平ER的妇女更易获得宫颈的HPV感染[12]。

本研究显示，ER-β的表达程度在正常宫颈、CIN、宫颈鳞癌组织中依次降低，根据ER-β的表达在乳腺癌的研究，其降低甚至缺失可能起到类似肿瘤抑制基因的作用，ER-β的表达可能是肿瘤预后良好的标志[13]。因此认为在宫颈鳞癌的发生发展过程中，ER-β表达降低可能会促进宫颈癌的发生。

新疆是一个多民族聚集的地区，由维吾尔族、汉族、哈萨克族等13个主要民族组成，维吾尔族妇女宫颈癌的患病率明显高于其他民族，在新疆南部维吾尔族HPV各亚型的分布及频率体现了维吾尔族HPV感染类型的独特性[14]，推测维吾尔族与汉族宫颈鳞癌的发生机制可能有不同，但本研究未发现P450arom及ER-β表达在维、汉族患者间的差异，也可能与病例数少有关。

综上所述，宫颈局部组织中的芳香化酶P450表达增高和雌激素β受体表达降低，可能在促进宫颈鳞癌发生发展的过程中起到作用，但在新疆维、汉族宫颈鳞癌中的表达无差别。

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