岳慧贤 石丽娟 孙培明 （临沂大学生命科学学院 山东 临沂 276000）

一起青年雪山草鸡沙门氏菌病的诊治

岳慧贤 石丽娟 孙培明*（临沂大学生命科学学院 山东 临沂 276000）

沙门氏菌感染可以引起禽类各种各样的急性或慢性疾病，主要分为2种类型：第一种是鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌，第二种是副伤寒沙门氏菌，其中第一种沙门氏菌病的危害更严重。鸡白痢沙门氏菌感染引起鸡白痢，鸡伤寒沙门氏菌感染引起禽伤寒，两种沙门氏菌病在临床症状、流行病学、病理变化、控制及消灭措施等方面有许多相似之处，但也有一定的差异。鸡白痢是危害雏鸡的一种主要疾病，多表现为白痢和败血症特征，引起雏鸡的大批死亡；成年鸡不表现急性感染的特征，多呈慢性经过。禽伤寒较常见于育成和成年的鸡，在临床症状、病理剖检变化等方面与鸡白痢很难鉴别。该类沙门氏菌病在标准化商品鸡场中较少发生，但在庭院散养鸡场中则较多发生。近些年来，鸡沙门氏菌病的发生特点出现一些新的变化，即青年鸡的发病逐渐增多，引起生长迟缓和后期的生产性能下降，造成严重的经济损失，这在草鸡养殖中表现的非常明显。草鸡养殖一般采取网上育雏，中雏以后实行放养的方式，这一养殖方式与青年鸡发生鸡沙门氏菌病有关。近期，笔者对山东省临沂市的一起疑似鸡沙门氏菌病的青年雪山草鸡进行了诊断，通过临床症状、病理剖检变化及实验室诊断，确诊为沙门氏菌病，现报道如下。

1 发病情况

2014年4月份，山东省临沂市某鸡场的4500余只雪山草鸡发生以鸡冠发白、萎缩为主要特征的疾病，其它表现不明显。该鸡群采用庭院散养方式，在67日龄时从山东省泰安市某育成鸡场引进，当时鸡群状况较好，进鸡10d后，少量鸡只出现鸡冠发白的临床症状。鸡群发病时，曾用阿莫西林饮水，未见明显效果。截止到就诊时间，鸡群病程约30d，没有出现明显死亡，但场主担心鸡群因外观而影响其出售价格而要求诊治。

2 临床症状

病鸡初期主要表现鸡冠发白，有的肉垂也发白；随着病程的延长，鸡冠逐渐萎缩，有的鸡冠变小、发绀，公鸡尤为明显；少数病鸡排黄白色水样稀粪。鸡群采食、饮水数量没有明显变化，但病鸡精神状态受到影响，随着病程的延长，发病鸡只逐渐增多。

3 剖检变化

剖检病鸡2只，公鸡和母鸡各1只，母鸡的病变更明显。公鸡的剖检变化主要表现在睾丸萎缩，肌胃黏膜和肠道有轻微出血，其它无明显变化。母鸡的剖检变化主要表现在卵巢萎缩(无明显发育)，腹膜炎症(输卵管黄色渗出物，见图1)，肠道有出血(比公鸡严重)，肠系膜和肠道外膜有明显的黄色渗出物，其它无明显变化。心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏等脏器没有出现明显的病变。

4 PCR诊断

以无菌操作采集病鸡的卵巢、睾丸和肝脏(公鸡)作为病料，选用报道的沙门氏菌通用引物进行PCR扩增，上游引物为5-CTTTGGTCGTAAAATAAGGCG-3，下游引物为5-TGCCCAAAGCAGAGAGATTC-3，由上海生工生物技术公司合成。采用25μl反应体系，其中：10×buffer(含Mg2+)2.5μl、2.5 mmol/l 的dNTP 2μl、上游引物1μl、下游引物1μl、Taq DNA聚合酶0.2μl、模板(试剂盒提取的病料组织基因组)3μl，最后补灭菌水至25μl。反应条件：95℃预变性5min，94℃ 30s，55℃ 30s，72℃ 15s，35个循环后，72℃延伸10min。PCR产物进行1%琼脂糖凝胶电泳，从病鸡的卵巢、睾丸和肝脏(公鸡)组织中均扩增出预期大小为260bp目的片段(见图2)，确定该鸡群感染沙门氏菌。1 2 3 M

图1 卵巢，输卵管的剖检图

图2 睾丸、肝脏、卵巢组织的PCR检测图M.DL-2000 Marker；1.睾丸；2.肝脏；3.卵巢。

5 治疗

全群草鸡用左氟沙星0.01%饮水，连用5d；发病草鸡用阿米卡星注射液按10mg/kg体重肌肉注射，1次/d，连用3d；同时添加电解多维饮水以增强草鸡抵抗力。用药3d后病情逐渐减轻，大群状态明显好转,病情得到控制。

6 诊治体会

（1）PCR法具有耗时短、成本低、诊断准确的特点，在鸡沙门氏菌病快速诊断和早期治疗方面具有一定的意义。但此类方法需要特殊的仪器和较高的技术水平，在实践中影响了其应用的范围。（2）本次PCR结果显示，病鸡的卵巢、睾丸和肝脏组织中均存在沙门氏菌，其中卵巢的检测结果最理想。建议用PCR检测鸡沙门氏菌病时，从肝脏、心脏、睾丸、卵巢和脑组织等选用2～3个脏器病料用于检测，其中卵巢作为首选检测病料，从而提高检测的准确性。（3）本次PCR选用的引物为沙门氏菌通用引物，所有单纯通过这个实验只能确定鸡群感染沙门氏菌病，进一步结合临床症状、流行病学、剖检变化等，综合诊断为第一种沙门氏菌病，即鸡白痢或禽伤寒。鸡白痢与禽伤寒非常相似，病原同属于肠杆菌科一个单独的种，临床症状、流行病学、病理变化、控制及消灭措施等都比较相似，所以本研究未进一步对鸡白痢沙门氏菌或鸡伤寒沙门氏菌进行鉴别诊断。（4）雏鸡感染沙门氏菌，一般肝脏的病变最明显，表现肝脏表面出现白色的坏死灶。但是青年鸡感染沙门氏菌，肝脏等脏器的病变不明显，但是生殖器官发生的萎缩和以黄色、黄白色渗出物为特征的腹膜炎具有重要诊断意义。如果蛋鸡在青年期发生沙门氏菌病，由于生殖器官的病变，导致产蛋期表现不产蛋和达不到产蛋高峰；如果产蛋鸡感染沙门氏菌，由于卵黄性腹膜炎的病变，导致产蛋量下降和蛋壳质量变差。（5）对于草鸡沙门氏菌病的治疗，常用的广谱和抗革兰氏阴性菌抗菌药都有作用，该病例选用广谱抗菌药左氟沙星和革兰氏阴性杀菌药阿米卡星具有很好的治疗效果。阿米卡星需要注射给药，该养鸡场未曾使用过，大多数养鸡场都较少使用，注射给药虽然麻烦，但能保证治疗效果。由于沙门氏杆菌耐药性的问题，有条件的可以通过药敏试验筛选高敏药物，避免盲目用药。（6）发病的鸡场，建议实行全进全出的饲养方式，加强环境消毒，消灭可能存在的病原。对于种鸡场尤为重要，因为沙门氏菌病可以垂直传播，病鸡治愈后可以长期存在于卵巢中，由于种蛋带菌而传给后代，造成早期感染。成年鸡一般呈隐性感染或带菌者，粪便中持续排出病原菌危害鸡群。（7）鸡沙门氏菌病的发生，多与养殖环境差有关，还与饲料饮水不洁有关。青年草鸡多采用散养方式，随着养殖次数的增多，环境逐渐变差，这样易发生沙门氏菌病。因此要预防本病，必须加强鸡场的饲养管理和环境卫生，给予营养均衡的饲料，保持饲料和饮水的清洁卫生，减少发病各种诱因，同时要注意定期的进行药物预防。

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1007-1733(2014)10-0037-02

2014–07–22）

项目资助：国家级大学生创新创业训练计划项目(201310452066)

*通讯作者