张玉仙，王文利，王金秋，曹 静，陈耀星，王子旭

（1.北京农业职业学院畜牧兽医系，北京 房山102442；2.中国农业大学动物医学院，北京 海淀100193）

同源益生素是从肉鸡肠道内分离出来的一类活性微生物添加剂。研究表明[1]，益生素被畜禽采食后能在肠道发育、繁殖并可促进畜禽生长，提高饲料用利率，防止腹泻，提高机体的抗病力，被认为是一种多功能的绿色饲料添加剂。益生素具有无污染、抗病力强、安全性高、无耐药性、无残留、低成本等优点且不会对人和动物产生“三致现象”，可替代抗生素，被广泛应用于畜牧业[1]。

小肠不仅是营养物质消化和吸收重要场所，也具有重要的免疫屏障功能。良好的小肠黏膜结构是营养物质的消化、吸收和动物正常生长的生理基础[2-4]。本试验目的在于探讨肉仔鸡饲料中添加不同剂量的益生素对肉仔鸡小肠黏膜结构的影响，也为益生素在肉鸡饲养中应用提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 动物分组 1 500羽1日龄AA肉鸡（公母半），由北京华都肉鸡场提供，平均体重42.90±0.26 g。随机分为5个组：对照组饲喂全价基础日粮；试验1、2、3、4组，分别在基础日粮的基础上添加0.1%、0.2%、0.3%、0.4%同源益生素，每组设10个重复,每个重复30羽。试验期为21 d。饲养管理按照北京市地方标准DB23/T169-93肉鸡饲养管理技术规程进行。按照所在地的防疫部门制定的免疫程序进行常规免疫。

1.2 益生素的来源 同源益生素菌种的来源是从肉鸡肠道中筛选出的，采用现代发酵技术提纯，配以相应的载体，其中含芽孢杆菌、乳酸菌、双歧杆菌等多种益生菌，产品为棕色粉末，活菌数为20亿CFU/g。

1.3 样品处理 在试验第21天剖杀，迅速取十二指肠、空肠、回肠中段各2～3mm，浸入新配置的生理盐水涮洗掉内容物后，用40 g/L多聚甲醛磷酸缓冲液(0.1mol/L，pH值7.4)固定48 h，常规石蜡包埋，制备连续横断切片10张（厚5um），常规苏木精-伊红（H.E.）染色。

1.4 测定项目

1.4.1 生长性能指标 在试验开始到结束称重并记录体重、耗料量，数据采用SPSS17.0统计软件分析进行两组间独立样本双尾t检验。

1.4.2 组织学指标 经H.E.染色后，在光学显微镜下观察小肠的黏膜结构。每段小肠取5张切片，每张切片选2～5个视野，应用Moditec照相处理软件拍照，每张照片测量5根最长肠绒毛的长度（以肠腺绒毛连接处到绒毛顶端为准）、最深隐窝深度（以肠腺绒毛连接处到肠腺基部为准）、黏膜厚度和肠壁厚度。所得数据用SPSS17.0统计软件对测量数据进行单因素方差分析和多重比较。试验结果用均数±标准差（-X±S）表示。

2 结果

2.1 各组肉仔鸡的体重变化情况 见表1。

表1 同源益生素对21日龄肉仔鸡生产指标的影响

从表1中可以看出，各组仔鸡初生重没有差异，平均体重42.90±0.26 g，饲喂21 d后，从整体来看各试验组在末重、日增重、料重比等方面都优于对照组，而且是增重快，耗料量低。在5个试验组中0.3%组增重最快，显著高于对照组，差异极显著（P＜0.01），也显著高于其他各组；料重比0.3%组在5个试验组中最低，说明该组肉仔鸡吃料少长肉快。

2.2 肠黏膜上皮的形态结构的变化 H.E.染色后在光学显微镜下观察发现，5个试验组肉仔鸡的肠黏膜结构均完整，层次分明，肠黏膜上皮细胞的轮廓清晰，染色鲜明，排列规则，小肠肠绒毛顶端均无脱落现象。

2.3 小肠绒毛长度、黏膜厚度、肠壁厚度和绒毛长度/隐窝深度比值的变化 见表2、3、4。

21日龄肉仔鸡小肠绒毛从前至后，即从十二指肠、空肠至回肠，小肠绒毛长度、黏膜厚度、肠壁厚度逐渐降低。从表2中可以看出在十二指肠黏膜结构指标方面，0.3%组在绒毛长度、黏膜厚度、肠壁厚度及绒毛长度与隐窝深度的比值（C/V值）等方面显著优于其他试验组，表明在肉鸡饲料中添加益生素时0.3%的浓度最佳。从表3中可以看出在空肠黏膜结构指标方面，0.3%组在绒毛长度、黏膜厚度、肠壁厚度及绒毛长度与隐窝深度的比值（C/V值）等方面显著优于其他试验组，表明在肉鸡饲料中添加益生素时0.3%的浓度最佳。从表4中可以看出在回肠黏膜结构指标方面，0.3%组极显著高于对照组、0.2%组和0.4%组（P＜0.01）。在回肠V/C指标方面，0.3%组极显著地高于对照组和其他试验组（P＜0.01）。

表2 不同浓度的同源益生素对21日龄肉仔鸡十二指肠的小肠绒毛长度、黏膜厚度、肠壁厚度及绒毛长度与隐窝深度的比值的影响

表3 不同浓度的同源益生素21日龄肉仔鸡空肠的小肠绒毛长度、黏膜厚度、肠壁厚度及绒毛长度与隐窝深度的比值的影响

表4 不同浓度的同源益生素对21日龄肉仔鸡回肠的小肠绒毛长度、黏膜厚度、肠壁厚度及绒毛长度与隐窝深度的比值的影响

3 讨论与分析

3.1 不同剂量的同源益生素对肉仔鸡体重增长的影响 从试验结果来看，试验采用的益生素是从肉仔鸡肠道中提取的芽孢杆菌、乳酸菌、双歧杆菌等有益菌。其中芽孢杆菌是一种需氧菌，这给乳酸菌创造了一个缺氧的生长环境，同时将淀粉转化为单糖，供乳酸菌利用[9]。滑静[10]等研究表明，枯草芽孢杆菌可以促进肉仔鸡体内蛋白质、脂类的合成代谢，促进骨骼和肌肉的生长发育，有利于促进动物生长。本试验是将不同浓度的同源益生素饲喂肉鸡，结果表明，在肉仔鸡饲料中添加0.1%、0.2%、0.3%、0.4%的浓度均可提高肉仔鸡的增重，提高饲料的利用率，降低料重比，但以0.3%浓度的效果最佳，取得的经济效益最高。

3.2 不同剂量的同源益生素对肉仔鸡小肠黏膜结构的影响 小肠的正常结构与功能是营养物质被充分消化与吸收的基本保证，特别是小肠的肠绒毛长度、隐窝深度、黏膜厚度及绒毛表面积是衡量小肠消化吸收功能的重要指标[4-5]。本试验结果表明，5个试验组肉仔鸡肠黏膜结构完整，层次分明，肠黏膜上皮细胞的轮廓清晰，染色鲜明，排列规则，肠黏膜上皮无脱落现象，尤其在绒毛顶端。肉仔鸡饲料中添加益生素后，小肠绒毛高度在十二指肠、空肠和回肠呈剂量依赖性增长，且益生素组小肠绒毛高度高于对照组。其中，0.3%组肠绒毛高度、黏膜厚度、肠壁厚度在十二指肠、空肠和回肠极显著高于对照组（P＜0.01）。小肠绒毛V/C比值在十二指肠呈剂量依赖性增长，且0.3%组小肠绒毛V/C比值极显著高于对照组（P＜0.01）。营养生理学的研究也表明，绒毛长度/隐窝深度比值综合反映小肠的功能状况，比值下降表明消化吸收功能下降[6]。动物生长发育受阻。本试验表明，益生素对肉仔鸡小肠消化吸收有影响，0.3%的浓度影响较大，不同浓度均可增强肉鸡小肠的消化吸收能力，使肉仔鸡的生长发育加快，但以0.3%益生素浓度最为合理，最能改善和维护肉仔鸡小肠黏膜的正常结构，最能提高肉仔鸡小肠的消化吸收能力，而且日增重最明显，耗料量最少，生长发育最快，料重比最低，经济效益最高。

4 结论

4.1 在肉仔鸡基础日粮中添加不同浓度的同源益生素，从增重、耗料量、料重比、饲料报酬及经济效益分析结果看，在饲料中添加0.3%益生素效果最佳。

4.2 从21日龄肉仔鸡小肠黏膜结构来看，0.3%组可使肉仔鸡体重增加最多，使小肠的绒毛长度、隐窝深度及等指标最大，消化吸收能力最强；所以在促进肉仔鸡生长时，0.3%的添加剂量最为合理。

4.3 从本试验来看，益生素虽然是由鸡的肠道中分离的有益菌，但也不是添加的浓度越大越好，一定要适度，才能取得事半功倍的效果。

[1]李焰，许正金，洪枫.复合益生素在规模化肉鸡生产中的应用效果观察[J].中国家禽，2008，30（23）：55-56.

[2]Kelly D，Coutts A G P.Function in neonates：role of early nutri⁃tion[J].Livest Prod Sci，2000，66（2）：161-167.

[3]Gaskins H R.T he intestinal immune system：gut reaction and growth of the pig[J].Anim Sci，1996，74（Suppll）：169.

[4]张玉仙，王文利，陈耀星，等.不同浓度的大蒜溶液对小鼠小肠黏膜结构的影响[J].中国兽医杂志，2008，44（5）：42-45.

[5]张玉仙，王文利，陈耀星，等.不同剂量的乳猪壮对仔猪小肠黏膜上皮内淋巴细胞核杯状细胞数量变化的试验[J].中国兽医杂志，2012，48（5）：37-38.

[6]张玉仙，王文利，陈耀星，等.不同浓度的大蒜溶液对小鼠小肠黏膜上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量变化的研究[J].黑龙江畜牧兽医杂志，2009，39（6）：42-45.

[7]李可洲，李宁，黎介寿，等.短链脂肪酸对大鼠移植小肠形态及功能的作用研究[J].世界华人杂志，2002，10（6）：720-722.

[8]常文环.黄霉素对肉仔鸡促生长机理的研究[D].北京：中国农业大学硕士学位论文，1996.

[9]张玉仙，王文利，张京和.不同浓度的同源益生素对肉鸡生产性能和消化指标的影响[J].黑龙江畜牧兽医杂志，2014，39（6）：42-45.

[10]滑静，郭玉琴，张淑萍，等.肉仔鸡日粮中添加枯草芽孢杆菌对平均日增质量和血液生化指标的影响[J].黑龙江畜牧兽医杂志，2003，33（2）：14-15.