张萍 李小梅

探讨影响脂肪组织病理切片质量的因素

张萍 李小梅

脂肪组织；病理切片

在病理制片工作中, 常常会遇到脂肪组织, 由于其组织结构特殊, 如果将这些按常规程序的脱水、浸腊等处理时,其中含有丰富脂肪组织的标本难以将其完全溶出, 而使切片不顺利, 经常出现破碎、挤压或切片不完整等现象, 直接影响病理切片质量, 造成病理诊断的困难。所以湖北省荆州市第三人民医院在处理组织过程中通过调整脱水、浸腊的时间,来保证脂肪组织切片的完整。现将改进后的方法整理如下。

1 取材和固定

由于脂肪组织具有大量脂肪细胞聚集而成, 而疏松的结缔组织将成群的脂肪细胞分隔成许多脂肪小叶, 仅有少量的胶原纤维、血管和神经, 因此对组织固定要充分。取材时组织厚薄要均匀, 一般大小为2 cm×1.5 cm×0.3 cm为宜, 标本固定的好坏直接影响制片的各个环节, 标本离体后应及时的固定, 防止组织发生干缩变硬或自容、腐败。所以固定对于制作脂肪组织切片至关重要［1］。本科是每天下午3点取材放入10%福尔马林液固定至第二天上午8点。

2 脱水、透明、浸蜡

因为脂肪组织大部分为脂肪滴, 不利于液体与这些组织的相互渗透。乙醇脱水必须彻底, 尽量使脂肪溶解, 与常规组织同步用全自动脱水机对组织进行处理, 全自动的病理组织脱水机是用甲醛、乙醇、二甲苯、石蜡对组织进行处理的, 乙醇脱水、二甲苯透明、石蜡浸蜡。同步处理完后将脂肪组织再移至杯中进入65℃恒温箱中继续浸蜡2～3 h(石蜡：溶点为56～58℃,内加入少量蜂蜡, 比例20：1), 以尽可能除去组织中的透明剂,使脂肪细胞内充满蜡以增加组织的硬度, 达到支掌组织的作用［2］。这样处理的脂肪组织可以保证脂肪组织切片完整。

3 切片和染色

作为脂肪组织的切片不能切的太薄、过薄的切片脂肪含量较少, 影响对中性脂肪的显示［3］。在切片时要注意水温控制一般以43℃为宜, 因为水温过高或浸蜡不足都可使摊片时组织向四周散开, 不仅造成捞片困难、且使组织结构松散融化, 为了使脂肪组织显示结构完整, 组织切片厚度5～6 µm为宜。

在进行HE染色时, 组织要先在69℃烤箱内烤10 min, 再用1000～1500 W的电热吹风距离载玻片2～3 cm吹3～5 min, 这样即能使组织内的蜡融化、又使组织与载玻片粘贴牢固不易脱片。进入苏木素染色颜色宜深一些。本科一般在苏木素中染10 min,染色过程中盐酸乙醇的分化较为关键, 分化一定要恰到好处［2］。

3 结果

提高脂肪组织切片质量的关键是脱水或浸蜡。脂肪组织脱水、透明后要加倍延长浸蜡时间, 使组织得以充分浸蜡增加组织硬度, 使组织不变形, 才能保证切片平整、组织连片顺利且易摊平、无皱折, 塌陷现象, 不易破碎、脂肪细胞框架完整。使镜下脂肪组织结构清晰, 层次分明, 无假象。切片质量是指导医师作出准确诊断的重要保证。

［1］ 周显.脂肪组织制片的改良方法.临床与实验病理学杂志, 2009,25(2):216.

［2］ 邵凌波,陈宇中.提高皮肤脂肪组织切片质量的体会.现代实用医学, 2002,14(12):669.

［3］ 胥维勇,杨群,范小莉.显示神经内分泌细胞的方法.中国组织化学与细胞化学杂志, 2006, 15(1):106-107.

434000 湖北省荆州市第三人民医院