白 晶, 李爱军#, 王丽萍，张 斌, 张 毅

1)郑州大学第一附属医院妇产科 郑州 450052 2)郑州大学第一附属医院肿瘤科 郑州 450052 3)美国德克萨斯州大学圣安东尼奥医学中心医学系 圣安东尼奥 77027703 4)郑州大学第一附属医院生物细胞治疗中心 郑州 450052

卵巢癌是女性三大恶性肿瘤之一。目前有研究[1]表明细胞黏附分子与肿瘤的发生相关。CD44是一种糖蛋白，是细胞黏附分子的成员之一，主要位于细胞表面，它在免疫识别、细胞运动、细胞间黏附、细胞与基质间相互作用及淋巴细胞归巢中均起促进作用，是接受细胞外基质糖基化、透明质酸化信息的受体。CD24是一种低相对分子质量高度糖基化的黏附分子， 介导癌细胞与活化血小板和内皮细胞的结合，可能促进肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移，参与肿瘤的发生发展[2-3]。该实验采用免疫组化方法，观察CD44和CD24在浆液性卵巢癌组织中的表达情况，并分析二者与卵巢癌各临床参数间的关系，为卵巢癌的诊断和治疗提供理论依据。

1 材料与方法

1.1标本来源30例浆液性卵巢癌标本取自郑州大学第一附属医院妇产科2008年1月至2012年1月手术切除的卵巢癌组织，患者年龄25～73(49.7±13.8)岁；10例正常卵巢组织标本取自同期在郑州大学第一附属医院妇产科行子宫肌瘤手术切除的卵巢组织，术后病理示卵巢组织无病变，患者年龄48～65(52.3±6.8)岁。按照国际妇产科联盟(FIGO)的病理分期标准[4]将卵巢癌分为4期，其中Ⅰ期6例，Ⅱ期9例，Ⅲ期8例，Ⅳ期7例；组织学分级[5]G1期(高分化)15例，G2期(中分化)9例，G3期(低分化)6例；无淋巴结转移者19例，有淋巴结转移者11例；肿瘤直径≥5 cm者6例，<5 cm者24例；患者年龄>49岁者17例，≤49岁者13例。所有标本经体积分数10%中性甲醛溶液固定，常规石蜡包埋，6 μm厚切片备用。

1.2 2种卵巢组织中CD44和CD24的检测采用北京中杉金桥生物技术有限公司SP-9000免疫组化染色试剂盒和DAB显色试剂盒进行染色。兔抗人CD44单克隆抗体(ZA-0573，1200稀释)、鼠抗人CD24单克隆抗体(ZA-0274，1200稀释)均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。石蜡标本常规脱蜡至水后冲洗，抗原修复,去离子水消除内源性过氧化物酶活性，正常山羊血清封闭非特异性结合位点，滴加一抗和二抗,DAB显色，苏木素复染，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树脂封片[6]。用PBS代替一抗作为阴性对照，用已知阳性染色的乳癌组织标本作为阳性对照。

1.3结果判断以胞膜呈棕黄色或棕褐色颗粒为阳性，每张切片观察10个400倍视野，综合染色强度和阳性细胞所占比例进行判定。染色强度评分标准：不着色0 分，黄色1分，棕黄色2 分，黄褐色3 分。阳性细胞所占比例评分标准[7]：阳性细胞率<5%者0分，5%～者1分，25%～者2分，50%者3分，75%～ 者4分。2种评分相乘，0分为阴性，1～12分为阳性。

1.4统计学处理采用SPSS 17.0进行统计学处理,浆液性卵巢癌和正常卵巢组织中CD44及CD24阳性表达率的比较、浆液性卵巢癌组织中CD44、CD24与不同病理特征的关系均采用Fisher确切概率法，浆液性卵巢癌组织中CD44和CD24的关联性分析采用Pearson列联系数，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1不同卵巢组织中CD44、CD24的表达正常卵巢组织中CD44呈阴性表达；浆液性卵巢癌组织中CD44表达于癌细胞的细胞膜及部分细胞质中，呈弥漫棕黄色颗粒。正常卵巢组织中CD24呈阴性表达；与CD44表达部位不同，CD24表达于浆液性卵巢癌组织的细胞膜顶端边缘部位，呈棕黄色颗粒。见图1和表1。

2.2浆液性卵巢癌组织中CD44及CD24的表达与临床病理特征的关系结果见表2。

2.3浆液性卵巢癌组织中CD44和CD24表达间的关系结果见表3。

图1 各种卵巢组织中CD44、CD24的表达情况(SP,×400)

表1 正常卵巢和浆液性卵巢癌组织中CD44和CD24的表达 例(%)

表2 浆液性卵巢癌组织中CD44及CD24的表达与临床病理特征的关系 例(%)

表3 浆液性卵巢癌组织中 CD44和CD24表达间的关系 例

rP=0.397,P=0.018。

3 讨论

肿瘤的侵袭、转移是一个具有高度组织性和器官选择性的多因素、多步骤的过程。虽然已知很多因素参与肿瘤的侵袭和转移，但不同组织来源的肿瘤细胞侵袭发生的机制还不清楚。卵巢癌是妇科常见的三大恶性肿瘤之一，在各年龄段均可发病，由于卵巢组织成分非常复杂，是全身原发肿瘤类型最多的器官，不同组织学类型的卵巢肿瘤，其生物学行为存在很大的差异。上皮性卵巢肿瘤是最常见的卵巢肿瘤，其中浆液性卵巢癌占上皮性卵巢癌的75%,患者经手术、化疗后，70%的患者经过几个月或几年又复发[8-9]，5 a生存率仅30.6%[10]。 正是由于卵巢癌不易发现、即使临床发现后生存率低且易复发的特点，近年来对卵巢癌发病机制的研究越来越多，研究人员试图通过各种途径找到卵巢癌浸润和转移的机制，以阻断卵巢癌的进一步发展，但至今为止其机制仍不十分清楚。

该实验选择10例正常卵巢组织及30例浆液性卵巢癌组织，从黏附分子的角度分析CD44和CD24的表达与临床特征的关系，发现CD44和CD24在浆液性卵巢癌组织中的阳性表达率均高于正常卵巢组织，推测黏附分子CD44和CD24的表达可能参与肿瘤的发生。浆液性卵巢癌组织中两者的表达与淋巴结转移、FIGO分期和组织学分级有关，而与年龄、肿瘤直径无关。病理分期增高，两者的表达均增加，说明随病理分期增高，肿瘤细胞与基质的黏附性增强，更容易向组织深层浸润。组织学分级越高，肿瘤的分化越差，黏附分子CD44与CD24的阳性表达率越高，说明肿瘤细胞分化程度越低，越具有原始细胞的一些特性，越具有侵袭和转移的能力。此外，该研究中CD44 和CD24 在浆液性卵巢癌组织中的表达呈正关联。这提示两者可能在卵巢癌的发生发展及侵袭中起共同的作用，但作用的机制有待于进一步研究。

该研究结果表明，CD44和CD24在浆液性卵巢癌组织中的表达可能促进了卵巢癌的发生和发展，共同检测CD44和CD24的表达可以为临床诊断卵巢癌、确定其恶性程度提供依据。关于两者共同作用的机制有待于进一步研究。

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